Проба каковского аддиса
Проба Аддиса-Каковского
Проба Аддиса-Каковского – клиническое исследование, направленное на определение количества лейкоцитов, эритроцитов и мочевых цилиндров в образце осадка мочи, выделенной и собранной за сутки. Анализ имеет самостоятельное диагностическое значение, его результаты используются в нефрологии, урологии для диагностики и мониторинга эффективности терапии заболеваний мочеполовой системы, таких как пиелонефрит, гломерулонефрит, мочекаменная болезнь. Первый сбор мочи производится с утра, далее осуществляется при каждом мочеиспускании на протяжении 24 часов. Для анализа необходима 1/50 часть общего объема. Исследование проводится микроскопическим методом. При отсутствии патологии в почках и мочевыводящих путях обнаруживается около 2 млн. лейкоцитов, менее 1 млн. эритроцитов, менее 20 тыс. цилиндров. Подготовка результатов анализа составляет 1 рабочий день.
Проба Аддиса-Каковского – клиническое исследование, направленное на определение количества лейкоцитов, эритроцитов и мочевых цилиндров в образце осадка мочи, выделенной и собранной за сутки. Анализ имеет самостоятельное диагностическое значение, его результаты используются в нефрологии, урологии для диагностики и мониторинга эффективности терапии заболеваний мочеполовой системы, таких как пиелонефрит, гломерулонефрит, мочекаменная болезнь. Первый сбор мочи производится с утра, далее осуществляется при каждом мочеиспускании на протяжении 24 часов. Для анализа необходима 1/50 часть общего объема. Исследование проводится микроскопическим методом. При отсутствии патологии в почках и мочевыводящих путях обнаруживается около 2 млн. лейкоцитов, менее 1 млн. эритроцитов, менее 20 тыс. цилиндров. Подготовка результатов анализа составляет 1 рабочий день.
Проба Аддиса-Каковского – количественный метод исследования суточной мочи. В ходе ее выполнения подсчитывается число эритроцитов, лейкоцитов и белковых цилиндров в небольшом образце осадка, а затем выполняется пересчет на суточный объем мочи. Анализ используется в медицинской практике при дифференциальной диагностике заболеваний мочевой системы, в частности пиелонефрита и гломерулонефрита. Вывод о наличии той или иной патологии делается на основе абсолютных значений клеточных элементов и цилиндров, а также на основе их соотношений.
Если мочевыделительная система человека функционирует нормально, то в результатах пробы Аддиса-Каковского определяется не более 1 млн. эритроцитов, не более 2 млн. лейкоцитов и не более 20 тыс. цилиндров определенного типа. Эритроциты поступают в почечные клубочки при фильтрации крови и большей частью реабсорбируются. Незначительное их количество переходит в мочу. Увеличение экскреции красных кровяных телец свидетельствует о повреждении почечных клубочков и нарушении фильтрации крови или о повреждении участка мочевыделительной системы (лоханок, мочеточников, мочевого пузыря, уретры).
Незначительное выделение лейкоцитов с мочой связано с постоянной активностью иммунной системы, ее готовностью «атаковать» инородные агенты. Увеличение количества белых кровяных телец в результатах пробы Аддиса-Каковского происходит при наличии воспалительных или инфекционных процессов в мочевыделительной системе или в органах, расположенных вблизи нее. Мочевые цилиндры представляют собой белковые конгломераты, содержащие клетки внутреннего слоя почечных канальцев, иногда – эритроциты. Увеличение их количества в моче наблюдается при различных нарушениях фильтрации, по составу цилиндров можно сделать вывод о характере патологии.
При выполнении пробы Аддиса-Каковского исследованию подвергается порция биоматериала, собранного с течение суток. Если сбор на протяжении 24 часов невозможен, то назначается исследование порции мочи, выделенной за 12 часов. Исследуемые элементы – эритроциты, лейкоциты и цилиндры – подсчитываются с помощью микроскопа. Результаты пробы используются при диагностике заболеваний мочевыделительной системы в урологии и нефрологии.
Показания
В медицинской практике проба Аддиса-Каковского используется для выявления гематурии и лейкоцитурии, определения степени этих состояний. Гематурия – появление в моче большого количества эритроцитов, лейкоцитурия – увеличение количества лейкоцитов. По степени преобладания одного из этих состояний делается вывод о наличии пиелонефрита или гломерулонефрита. Хронический пиелонефрит обычно сопровождается значительным повышением количества лейкоцитов (до 3-4 млн. и более) и их преобладанием над эритроцитами. Если при установленном диагнозе пиелонефрита определяется гематурия, то вероятно она имеет вторичный характер и вызвана мочекаменной болезнью. При гломерулонефрите в результатах пробы Аддиса-Каковского эритроциты преобладают над лейкоцитами.
Еще одно распространенное показание для пробы Аддиса-Каковского – заболевания, вторично приводящие к нарушению в работе почек. Исследование назначается при прогрессирующей и длительно протекающей артериальной гипертонии, сахарном диабете, амилоидозе и других системных патологиях. Так, для гипертонической болезни с артериолосклерозом почек характерно увеличение концентрации эритроцитов в моче. Таким образом, анализ используется для диагностики и мониторинга пиелонефрита, гломерулонефрита, мочекаменной болезни, хронической почечной недостаточности, а также для оценки функции почек при системных заболеваниях.
По сравнению с другими количественными исследованиями, такими как общий анализ и анализ по Нечипоренко, проба Аддиса-Каковского учитывает суточные колебания состава мочи. Это дает более точное и полное представление о работе мочевыделительной системы. К недостаткам метода относятся трудоемкость процедуры сбора материала и высокая вероятность ошибок при выполнении теста (особенно если мочевой пузырь опорожняется не полностью), возможность частичного разрушения форменных элементов в результате длительного хранения мочи, непригодность результатов пробы при односторонней патологии почек.
Подготовка к анализу и забор материала
Подготовка к сбору мочи для выполнения пробы Аддиса-Каковского направлена на стандартизацию удельного веса мочи и ее pH, что приводит к уменьшению вероятности распада форменных элементов в результате длительного хранения биоматериала. За 24 часа до начала процедуры пациенту необходимо соблюдать диету с преобладанием мясных блюд и ограничить прием жидкости. В день сбора нужно отказаться от тяжелой физической работы, избегать эмоционального перенапряжения. Если назначено исследование суточной мочи, то первое мочеиспускание с утра выполняется в унитаз, затем в течение 24 часов моча собирается в стерильную трехлитровую емкость с крышкой. На протяжении суток она должна храниться в холодильнике без замораживания.
Для выполнения пробы Аддиса-Каковского необходима 1/50 часть от общего объема мочи. Этот образец помещают в специальную градуированную пробирку, а затем в центрифугу. Моча разделяется на осадок и надосадочную часть. Из осадка забирается проба 0,6 мл, вносится в счетную камеру и исследуется под микроскопом. Затем выполняется пересчет показателей на суточный объем мочи. Сроки проведения анализа не превышают 1 рабочего дня.
Нормальные значения
В норме при выполнении пробы Аддиса-Каковского лейкоцитов определяется не более 2 млн./сут., эритроцитов – не более 1 млн./сут., цилиндров – не более 20 тыс./сут. Показатели эритроцитов и цилиндров могут быть несколько повышены после физической нагрузки, переживания сильных эмоций.
Повышение значений
Основной причиной повышения значений пробы Аддиса-Каковского являются заболевания мочевыделительной системы: гломерулонефриты, пиелонефриты, мочекаменная болезнь, почечная недостаточность, инфекции и травмы. Показатель лейкоцитов может быть увеличен при воспалительных процессах в органах, расположенных рядом с мочевой системой. Например, количество белых кровяных клеток в крови растет при остром панкреатите, аппендиците, простатите. Еще одной причиной повышения значений пробы Аддиса-Каковского являются заболевания, которые вторично вовлекают почки в патологический процесс. К ним относятся артериальная гипертония, системная красная волчанка, сахарный диабет, амилоидоз и некоторые другие.
Снижение значений
Уменьшение количества лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров имеет диагностическое значение при мониторинге заболеваний мочевыделительной системы и при динамической оценке изначально нарушенной функции почек. Причиной снижения значений пробы Аддиса-Каковского в этих случаях является положительный ответ на терапию.
Лечение отклонений от нормы
Проба Аддиса-Каковского, как и другие количественные исследования мочи, используется для диагностики и мониторинга заболеваний мочевой системы, оценки функции почек при некоторых системных заболеваниях. Отличительной чертой этого анализа является то, что его результат учитывает суточные колебания выведения с мочой форменных элементов крови и цилиндров. При отклонении итоговых показателей от нормы за назначением лечения нужно обратиться к лечащему врачу – терапевту, урологу, нефрологу. Для снижения вероятности физиологического повышения значений необходимо соблюсти правила подготовки к сбору мочи.
Источник
Проба Аддиса-Каковского
При подозрении на нарушение функций почек и других мочевыводящих органов необходимо комплексное обследование. Обязательная часть диагностики — исследование урины. Проба Аддиса — Каковского назначается с целью выявить количество и соотношение кровяных клеток, присутствующих в биологической жидкости (цилиндров, лейкоцитов, эритроцитов).
Особенности исследования
Методика исследования была разработана в 1910 году доцентом Киевского университета Антонием Каковским. Она предполагала сбор мочи за 8 часов. Но концентрация элементов урины колеблется на протяжении суток. Она зависит от особенностей рациона, частоты приемов пищи, объема употребляемой жидкости. Поэтому в 1925 году американским ученым Томасом Аддисом этот способ диагностики был усовершенствован. Сегодня для анализа по Аддису — Каковскому собирают мочу за 24 часа. Это позволяет получить объективные показатели с учетом суточных колебаний.
Наличие форменных элементов определяется при клиническом исследовании урины. Применение метода Аддиса — Каковского позволяет более точно установить их разновидность и количество.
Результатом исследования осадка мочи становится выявление неизмененных либо выщелоченных красных кровяных клеток. Эритроциты первого вида содержат гемоглобин, в выщелоченных элементах этот сложный белок отсутствует. При нормальной работе почек эти компоненты крови не должны присутствовать. Их обнаружение свидетельствует о патологии.
Исследование урины здорового человека может показать наличие незначительного количества лейкоцитов. Превышение их допустимой нормы — повод для более детальной диагностики и лечения.
Обнаружение единичных гиалиновых цилиндров после значительных физических нагрузок считается нормой. Во всех остальных случаях выявление эритроцитарных, восковидных, эпителиальных, зернистых, пигментных, гиалиновых элементов осадка — признак серьезного заболевания почек. Определение количества цилиндров дает возможность установить причину и характер течения патологического процесса.
Читайте также: Особенности проведения ХТИ анализаПоказания для анализа
Лабораторное исследование урины по методике Аддиса — Каковского назначается для выявления патологий почек. Для врача поводом назначить пациенту анализ становится необходимость уточнить наличие болезни или контроля состояние пациента при:
- единичной или множественных кистозных образованиях;
- гломерулонефрите;
- пиелонефрите;
- уролитиазе;
- почечном инфаркте;
- закупорке вен фильтрующего органа тромбом;
- амилоидозе;
- хронической дисфункции почек.
Может понадобиться анализ после перенесенной вирусной инфекции, тяжелой интоксикации алкоголем и солями цинка, ртути, свинца, кадмия и других тяжелых металлов. Исследование по Аддису — Каковскому — один из методов диагностики при злокачественной форме гипертонической болезни.
Как правильно подготовиться и собрать урину для анализа?
Исследование предполагает несложную подготовку. Она заключается в соблюдении пациентом высокобелковой диеты. Преобладание мясных продуктов закисляет мочу, что помогает выявить вид и число присутствующих цилиндров. Эти элементы крайне тяжело обнаружить в жидкости со щелочной, а также нейтральной реакцией. Помимо заблаговременного употребления большего, чем обычно, количества мяса, за 24 часа до начала сбора урины необходимо сократить объем выпиваемой жидкости.
Алгоритм сбора мочи по Аддису — Каковскому несложен:
- Заранее приготовить стерильную емкость — банку на 3 л и контейнер меньшего объема для транспортировки части материала в лабораторию.
- После пробуждения утром помочиться в унитаз. Время записать.
- Начиная со следующего посещения туалета, биологическую жидкость необходимо собирать в бутыль.
- Сбор осуществляется на протяжении 24 часов с момента первого мочеиспускания накануне.
- Для получения максимально объективных результатов врачи рекомендуют не посещать туалет ночью.
У детей собирать мочу целые сутки сложно. Поэтому проба Аддиса — Каковского проводится экспресс-методом. Выделяемая жидкость собирается 12 часов — с вечера до утра. Время получения первой и последней порции урины обязательно записывают.
Читайте также: Анализ мочи на суточную протеинуриюИногда вместо пробы Аддиса — Каковского детям назначают анализ по Амбурже.
Перед сбором очередной порции урины необходимо тщательно обмывать наружные половые органы. Женщинам рекомендуется прикрывать вход вагины ватным тампоном.
Материал, предназначенный для исследования, нужно хранить внутри холодильника. По завершении сбора жидкость перемешивают. Затем отливают 1/50 от общего объема в стерильный контейнер. На протяжении 2 часов его необходимо доставить на исследование.
Методика выполнения анализа
Собранная моча подвергается центрифугированию для разделения жидкости на осадок и надосадочную часть. Затем 0,6 мл осадка помещают внутрь специальной камеры-счетчика. Используется прибор, разработанный Бюргером, Розенталем и Фуксом или Горяевым. В камере осуществляется точный подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов, цилиндров. После этого лаборантом производится определение суточного содержания элементов.
Расшифровка данных
Нормальные показатели результата анализа по Аддису — Каковскому практически не отличаются для людей разных возрастных групп. Для взрослых допустимые суточные значения:
- лейкоцитов — не более 2 млн;
- эритроцитов — не более 1 млн;
- цилиндров — не более 20 млн.
У детей допускается присутствие не более 2,5 млн лейкоцитов и до 1 млн эритроцитов.
Важно! Несоответствие показателей норме — признак заболеваний почек.
Высокое содержание белых кровяных клеток свидетельствует о воспалении — пиелонефрите, цистите, уретрите. Большое количество эритроцитов появляется при гломерулонефрите.
Для диагностики заболеваний особое значение имеет вид цилиндров, выявленный в результате анализа. Эпителиальные появляются при нефрозе, нефрите на острой стадии. Лейкоцитарные цилиндры в моче — признак пиелонефрита, системной красной волчанки. Гиалиновые элементы обнаруживаются после вирусных инфекций и гипертермии, а также отравлений. Некроз почечных структур сопровождается появлением в моче эпителиальных слепков канальцев.
Метод Каковского — Аддиса используется для оценки изменений состояния мочевыделительных органов. Однако из-за необходимости длительного сбора и хранения материала анализ не назначается для уточнения диагноза, его используют, только если нужно точно определить заболевание.
Читайте также: Как беременным собирать мочу для анализа по Нечипоренко?Что такое проба Каковского-Аддиса?
Проба Каковского-Аддиса - это анализ мочи. Данный метод исследования считается трудоемким. Тем не менее его используют в медицинской практике. Суть данного исследования заключается в суточном определении форменных элементов в моче.
Особенности подготовки пациента к сдаче данного анализа
Для того чтобы обеспечить точность результата, пациенту рекомендуется за сутки до сбора материала соблюдать специальную диету. Она заключается в употреблении мясных продуктов и ограничении приёма жидкости. Данные условия необходимо соблюдать для того, чтобы избежать заниженных результатов, которые могут появиться из-за распада форменных элементов.
Это может произойти в нейтральной и щелочной моче. Также возможен данный распад, если урина имеет низкий удельный вес. В случае соблюдения рекомендаций по питанию, удельный вес и PH мочи приходит в нужную норму.
Особенностью является то, что материал необходимо собирать сутки. Также следует обеспечить правильное хранение жидкости. Иначе проба Каковского-Аддиса покажет неверный результат. Следует знать, что существует два способа сбора мочи для данного анализа.
Первый заключается в том, что пациенту утром нужно освободить мочевой пузырь. Далее, осуществлять сбор материала в специальную ёмкость с добавлением формалина или кристаллов тимола. Если добавлять первое названное вещество, то его количество должно составлять 4 или 5 капель. Использование кристаллов тимола предполагает, что его нужно добавить в количестве 2 или 3 штук. Хранить мочу необходимо в холодильнике.
Также можно осуществлять сбор в течении десяти или двенадцати часов. Но следует знать, что первый вариант даст более точный результат исследования. Для сбора материала вторым способом, необходимо вечером опустошить мочевой пузырь. Далее, в утренние часы, а именно через 10 или 12 часов после вечернего мочеиспускания, пациент осуществляет сбор урины в специальную ёмкость. Возможно, что человек не сможет удержать мочу в организме 10 часов. В этом случае ее следует собирать частями. Хранение материала также осуществляется в холодильнике. Женщинам рекомендуется использовать катетер для сбора мочи.
Собранный материал следует отправить в лабораторию для исследования. Таким образом сдается проба Каковского-Аддиса.
Как проводится исследование посредством в лаборатории?
Для того чтобы провести исследование мочи методом Каковского-Аддиса, следует подготовить специальное оборудование, а именно:
- пробирка специального центрифужного типа;
- пипетка объёмом 10 миллилитров;
- счетная камера;
- палочка из стекла;
- микроскоп для исследования.
Проба мочи по Аддис-Каковскому: этапы исследования
После того, как моча будет доставлена в лабораторию, она перемешивается. Далее, осуществляется измерение ее количества. После берётся необходимая часть для исследования. Объём мочи, который будет исследоваться лаборантом, вычисляется по специальной формуле. А именно, необходимо взять количество мочи, которое было выделено организмом за 12 минут. Для этого общий объём собранного материала делится на число, которое получится при умножении времени, за сколько собрана урина на 5. Где 5 - это число объёма мочи, которое было выделено организмом за 12 минут.
Далее, получившийся объём материала помещается в пробирку центрифужного типа. В ней осуществляется процесс центрифугирации. В зависимости от скорости оборотов, он занимает разное время. Например, если скорость составляет 3 500 оборотов в минуту, то понадобится 3 минуты. При условии 2 000 оборотов - процес займет 5 минут.
Далее, происходит отсасывание верхнего слоя. Оставляется 0,5 мл мочи с осадком. В случаях, когда последний превышает данный объем, следует оставить один миллилитр жидкости. Следующий этап исследования заключается в перемешивании материала и его помещении в счетную камеру. Последняя осуществляет подсчёт присутствия в моче таких элементов, как лейкоциты, эритроциты и цилиндры.
Затем, в зависимости от объёма исследуемого материала, полученные данные умножаются на значение, которое даст возможность определить суточное количество элементов в моче.
Проба Аддиса Каковского: норма показателей при сдаче, плюсы метода
Нормой считается присутствие в моче эритроцитов до 1 000 000, лейкоцитов до 2 000 000, цилиндров до 20 000.
Какое преимущество имеет проба Каковского-Аддиса перед другими методами?
Основным достоинством данного исследования является то, что оно позволяет учесть суточные колебания организма при выделении форменных элементов посредством урины.
Какие недостатки имеет данный метод?
- Существует категория пациентов, которые не в состоянии удержать мочу 10 или 12 часов в организме. Например, люди с диагнозом никтурия.
- Также существуют больные, чьё состояние организма не позволяет им полностью опустошить мочевой пузырь. Такое явление наблюдается у тех, кто болеет аденомой или раком предстательной железы.
- Сдать мочу посредством катетера возможно только в стационаре.
- Проба Аддиса-Каковского у детей не осуществима, поскольку малыши не будут сдерживаться продолжительное время.
Существуют причины, при которых показатели мочи могут быть выше нормы. А именно, гнойные процессы в организме хронического характера, гепаринотерапия и отравления какими-либо ядами.
При осуществлении сбора материала для такого исследования, как анализ мочи по Аддис-Каковскому, тратится много времени на его хранение. Поэтому может происходить частичный лизис форменных элементов, что приведёт к неточности результата.
Проба Каковского — Аддиса
13 марта 2009
А. Ф. Каковский (1910) предложил собирать утреннюю мочу за 8 ч с последующим подсчетом форменных элементов, а в 1925 г. F. Addis предложил подсчет форменных элементов в 12-часовой ночной порции мочи, собранной в условиях строгого ограничения жидкости в утренние и дневные часы.
В настоящее время применяют различные модификации метода Каковского — Аддиса в зависимости от времени сбора мочи (за 10 — 12, 24 ч). Выбор метода сбора мочи зависит от возраста больного (у маленького ребенка трудно собрать суточную мочу). В любом случае следует рекомендовать некоторое ограничение приема жидкости в день сбора мочи. Первый способ. Собирают мочу за 10 — 12 ч (лучше ночные порции с 22 ч до . 8 ч утра).
Мочу собирают в один сосуд, который сохраняют в прохладном месте. Измеряют общее количество мочи. Осторожно взбалтывают и из общего количества берут в центрифужную пробирку такое количество мочи, которое соответствует количеству ее, выделенной за 12 мин, т. е. за 1/5 часа.
Это количество мочи можно определить по формуле: x=V/(t*5),
где:
-
х — количество мочи, выделенной за 12 мин;
-
V — общий объем мочи (мл), выделенной за 10 — 12 ч;
-
t — количество часов, в течение которого производился сбор мочи;
-
5 — число, определяющее объем мочи за 12 мин, т. е. за 1/5 ч.
Мочу центрифугируют при 1000 — 1500 об/мин (при большем числе оборотов возможны разрушение и склеивание форменных элементов осадка мочи). Надосадочную жидкость осторожно удаляют пипеткой, оставив 0,5 — 1 мл осадка мочи. Осадок хорошо смешивают и каплю взвеси переносят в гемоцитометр для подсчета форменных элементов в 1 мм3. Для этой цели наиболее доступна счетная камера Горяева (1 мл при обильном осадке мочи). Подсчет форменных элементов производят по всей камере Горяева.
Определив количество форменных элементов в 1 мм3, вычисляют их содержание в суточном количестве мочи. Полученное число умножают на 500, так как для исследования брали 0,5 мл/500 мм3 мочи. Найденное число, означающее количество форменных элементов в объеме мочи за 1/5 ч, умножают на 5 (за 1 ч) и на 24. Конечный результат означает количество форменных элементов в суточной моче.
Можно производить подсчет количества форменных элементов по следующей формуле: количество форменных элементов в 1 мм3 мочи * 60 000 (так как 500, 5 и 245 — постоянные величины) или на 120 000 при наличии обильного осадка в 1 мл мочи.
В лабораторной практике широко используют камеру Фукса — Розенталя с большим объемом (3,2 мм3), в которой подсчитывают форменные элементы по всей сетке.
Расчет: полученное количество форменных элементов по всей камере пересчитывают на 1 мм3. Для этого общее количество форменных элементов делят на 3,2. Для определения количества форменных элементов в 1 мл мочи это число умножают на 1000, так как для исследования брали 1 мл мочи, и делят на 10 (степень концентрирования при центрифугировании). Зная суточный объем мочи, подсчитывают количество клеток, экскретированных за сутки.
Расчет можно произвести по формуле: x=(1000*V*N)/(3,2*10) или (1000*V*N)/3,2,
где:
- х — суточная экскреция форменных элементов;
- N — количество клеток в камере Фукса — Розенталя;
- V — суточный объем мочи.
«Детская урология», Н.А. Лопаткин
Читайте далее:Определение изоферментов ЛДГ в моче (по Юркову) →
Для количественного определения изоферментов ЛДГ существует ряд методов, основанных на различии в апоферменте изозимов. Применяют методы электрофореза, хроматографии, термической инактивности и др. В клинике наиболее широко используется метод зонального электрофореза на агаровом геле с окрашиванием тетрахолиевыми солями, адсорбция на ДЗАЕ-целлюлозе и термическое инактивирование. Наиболее точны и надежны методы, основанные на электрофоретическом разделении изоферментов [Юрков Ю….
После окончания электрофореза пластинки перекладывают в специальную камеру для окраски, заливают красящую смесь и инкубируют в термостате 2 ч при 37 °С. Затем сливают смесь и несколько раз тщательно промывают агаровые пластинки дистиллированной водой. Сушку пластинок производят следующим образом: вырезанные по форме пластинки полоски хроматографической бумаги осторожно накладывают на агар, не сдвигая его. На чистую…
Общая активность ЛДГ в моче больных пиелонефритом в среднем достигает 37,5 ± 3,5 единицы Вроб-левского, но какой-либо зависимости ее от формы и степени тяжести пиелонефрита не отмечено. Перспективными для изучения при воспалительных заболеваниях почек являются ферменты малатдегидрогеназа (МДГ) и альдолаза (АЛД). МДГ относится к ферментам цикла Кребса, который катализирует обратимую реакцию окисления яблочной кислоты в…
Исследуемые сыворотки разводят 1:10 с помощью кроличьей сыворотки (в разведении 1:250), подогревают в электрической водяной бане при 54 °С в течение 20 мин (для разрушения комплемента) и охлаждают. Затем к ним добавляют формалинизированные или свежие эритроциты барана из расчета 0,2 мл на 1 мл сыворотки, содержимое пробирки встряхивают и помещают на 30 мин в термостат…
Приготовленные Аг разводят определенным количеством буфера (рН 6,4) и соединяют с раствором формалинизированных и танизированных эритроцитов в таком количестве, чтобы окончательное разведение Аг было 1:10. Установлено, что именно это разведение является оптимальным, так как не дает гемолиза или агглютинации эритроцитов в отсутствие специфической сыворотки. Содержимое колбочек встряхивают и выдерживают при комнатной температуре в течение 1…