Пцр крови на туберкулез


Кровь на туберкулез пцр

Именно по этой причине ПЦР назначается только в особых случаях, когда диагноз под вопросом или же когда невозможно произвести другие методы исследования.

ПЦР диагностика туберкулеза, как уже говорилось выше, имеет ряд своих неоспоримых преимуществ, среди которых можно выделить следующие:

С первого взгляда данная процедура представляет собой идеальную методику, которая, казалось бы, и точна и безопасна, но она имеет и собственные недостатки, такие как:

  1. Высокая цена, что делает ее менее доступной для всего населения.
  2. В период после лечения прибегать к ней не стоит, так как ПЦР в данном случае покажет наличие болезнетворных бактерий.
  3. Вследствие мутации микобактерий ПЦР теряет собственную эффективность.
  4. Данная процедура и забор материала должны осуществляться только высококвалифицированными специалистами.
  5. boleznikrovi.com

    Выявление туберкулеза методом ПЦР

    Несмотря на колоссальные достижения в области медицины, человечество до сих пор не может полностью взять под контроль такое опасное заболевание, как туберкулез. В борьбе с этой инфекцией усовершенствовались методы диагностики, вакцинация, способы лечения. Но туберкулез по-прежнему нередко приводит к смертельному исходу. Уберечься от страшной инфекции можно, если вести здоровый образ жизни, проводить плановую вакцинацию и регулярное обследование. Полностью исцелиться в случае заражения поможет только ранняя диагностика. Анализ крови ПЦР на туберкулез позволяет на самых ранних сроках выявить палочку Коха.

    Туберкулез что за инфекция

    Туберкулез (устаревшее название чахотка) ? это инфекционная патология, поражающая чаще всего органы дыхания. Микобактерии туберкулеза распространяются воздушно-капельным путем при чихании и кашле зараженного человека или животного. Опасность для инфицирования также представляет слюнная жидкость больного туберкулезом. После попадания в организм часто наличие инфекции никак не проявляется, то есть заболевание протекает в скрытой форме.

    В зависимости от течения болезни выделяют две формы туберкулезной инфекции:

  6. Закрытую стадию туберкулеза фтизиатры относят к малоопасной либо вообще неопасной, с точки зрения заражения окружающих. Микобактерии при скрытой форме в мокроте не выявляются доступными диагностическими методами, в том числе и посредством анализа ПЦР. Опасно это состояние тем, что в одном из десяти случаев оно может переходить в активную стадию, то есть в открытую форму туберкулеза.
  7. Открытую стадию туберкулезного инфицирования характеризует обнаружение в мокроте и в иных биологических жидкостях организма палочек Коха. При такой форме заболевания пациент крайне опасен для окружающих его людей даже при соблюдении норм гигиены.
  8. К востребованным диагностическим мероприятиям по обнаружению туберкулезных микобактерий относятся флюорография, томография и рентгенография грудной клетки и иных пораженных органов. С успехом проводятся исследования разного биологического материала, а также кожная туберкулиновая проба она же реакция Манту. Но наиболее эффективен молекулярно-генетический анализ полимеразной цепной реакции, сокращенно именуемый ПЦР.

    Что представляет из себя исследование ПЦР на туберкулезную инфекцию

    Полимеразная цепная реакция ? это точнейшая молекулярно-генетическая диагностика. Анализ ПЦР при туберкулезном инфицировании позволяет с большой достоверностью выявить присутствие ДНК или РНК возбудителя в изучаемой пробе крови или иных биологических жидкостях организма.

    К многочисленным достоинствам диагностического метода ПЦР относится то обстоятельство, что для проведения исследования при помощи особого фермента полимеразы, может быть достаточно совсем незначительного числа бактерий, хватит и единичной клетки.

    Другие преимущества при ПЦР диагностике туберкулеза:

  9. Безупречная точность полимеразной цепной реакции при анализе на туберкулезное заражение достигается за счет особенного фрагмента, относящегося к конкретному возбудителю, в данном случае микобактериям туберкулеза.
  10. Гарантия стопроцентного результата благодаря чувствительности анализа ПЦР, которая составляет от десяти до тысячи клеток в исследуемом образце, в биологическом материале реально выявить даже единственную клетку туберкулезной микобактерии.
  11. Самое срочное получение результатов обследования всего лишь в течение 3,5–5,5 часов с момента сдачи анализа ПЦР на микобактерии туберкулеза.
  12. Анализ ПЦР при туберкулезе несомненный прорыв в области постановки ранних и точных диагнозов. С момента появления молекулярно-генетического метода диагностики стало возможным обнаружить туберкулез и другие смертельно опасные инфекции на самой ранней стадии, спустя дни или максимум несколько недель после заражения. Когда возбудители только начинают атаку на организм, их еще можно уничтожить без последствий для органов и систем тела человека.

    Микобактерии туберкулеза обладают характерной особенностью, значительно усложняющей излечение этого заболевания, ? способность приспосабливаться к медикаментозному воздействию некоторыми препаратами. Анализ ПЦР при туберкулезе дает возможность выяснить восприимчивость микобактерий туберкулеза к назначенному препарату и тем самым установить эффективность терапии. При проведении исследования ПЦР с целью определения устойчивости микобактерий туберкулеза к лекарственным препаратам используют способность генов возбудителя «запоминать» невосприимчивость к конкретному препарату. Результат исследования генов на устойчивость к лекарствам можно получить уже через два дня после сдачи анализа ПЦР.

    Как выполняется метод ПЦР при туберкулезе

    Сущность диагностики путем полимеразной цепной реакции состоит в выделении из биологических жидкостей пациента часиц ДНК возбудителя и последующей классификации его по типу микроорганизма. Для обнаружения возбудителя достаточно даже самого микроскопического его фрагмента цепочки ДНК. К длинному списку достоинств анализа на туберкулез посредством ПЦР можно добавить и абсолютную простоту данного исследования.

    Этапы диагностики туберкулеза при помощи полимеразной цепной реакции:

  13. В качестве исследуемых образцов используют кровь, мокроту, промывные жидкости бронхов.
  14. Далее, биологический материал в течение нескольких минут подвергают воздействию высоких температур, доходящих до 97 градусов по Цельсию. За счет чего происходит разрушение (денатурация) первоначальной структуры ДНК возбудителя, состоящей из пары цепей.
  15. Следующей операцией является отжиг, при котором температура снижается, чтобы дать праймеру соединиться с одной из разъединенных во время предыдущей процедуры цепей ДНК.
  16. Завершающим этапом выступает элонгация, во время которой осуществляется биологический синтез необходимых молекул.
  17. Понадобится около 25–30 циклов, чтобы получить требующееся количество копий ДНК возбудителя, которые уже можно классифицировать в зависимости от принадлежности к определенному штамму. Для выполнения исследования посредством полимеразной цепной реакции требуется специальное дорогостоящее оборудование. Установка подобных приспособлений не везде возможна.

    Поэтому анализы ПЦР при подозрении на туберкулез нельзя назвать самыми доступными по финансам. Но в некоторых обстоятельствах, когда дорога каждая минута, в силу возраста или каких-то особенностей организма противопоказаны иные методы диагностики, ПЦР анализу нет равных, так как он абсолютно безопасен. Диагностика ПЦР при туберкулезной патологии назначается в случае спорной ситуации, если отсутствует яркая клиническая картина, а другие способы исследования показывают противоречивые результаты.

    Эффективно подобное обследование крови или других биологических жидкостей при рецидиве туберкулеза.

    Помимо отсутствия или наличия штамма конкретной микобактерии туберкулеза. При помощи полимеразной цепной реакции существует возможность определить на какой стадии находится заболевание. Но необходимо учитывать, что если анализ ПЦР будет проводиться у лиц, прошедших курс терапии от туберкулезного поражения. Тогда в крови и иных исследуемых образцах может оставаться незначительное количество погибших или еще на стадии умерщвления микобактерий туберкулеза и ответ может быть ложноположительным.

    Анализ ПЦР на выявление туберкулезного инфицирования ? это частичное решение проблемы, в дополнение к массовой вакцинации, в борьбе со смертельными исходами в случае заболевания туберкулезом. Теперь не нужно ждать обнаружения красноречивых симптомов или появления характерных для туберкулеза очагов на снимке после флюорографии. При любом подозрении на возможное инфицирование дабы полностью исключить страшные последствия всегда есть возможность провести анализ на ПЦР.

    krov.expert

    Имеются противопоказания к пробе Манту? Подойдет анализ ПЦР на туберкулез

    Туберкулез — опасное заболевание, которое успешно лечится при своевременной диагностике.

    Одно из наиболее информативных исследований, позволяющих выявить недуг на ранней стадии, носит название метод ПЦР (полимеразной цепной реакции).

    Анализ ПЦР — не только самое информативное, но и одно из самых доступных исследований, которое позволяет выявить туберкулез на ранних стадиях.

    Что такое анализ ПЦР?

    Все живые микроорганизмы, включая вирусы и бактерии, содержат в своей структуре молекулы РНК и ДНК. Выделив эти кислоты, можно с большой достоверностью сказать, какие чужеродные агенты присутствуют в крови человека, и поставить точный диагноз.

    Суть метода ПЦР заключается в особой обработке образцов биологических жидкостей, в результате чего можно определить, к какому виду относятся присутствующие в нем микроорганизмы.

    Анализ ПЦР на туберкулез: показания, преимущества и недостатки

    Методика ПЦР применяется у людей с тяжелыми поражениями легких в тех случаях и респираторными проявлениями (сильный кашель, кровохаркание), когда точно диагностировать болезнь по клиническим симптомам невозможно.

    Рекомендуется пройти исследование и после непосредственного контакта с носителем заболевания. В число преимуществ, которыми он обладает, входят:

  18. скорость выполнения — для получения результата не нужно выращивать культуру возбудителя или проводить другие сложные процедуры;
  19. высокая информативность — при диагностике туберкулеза точность анализа достигает 90% и выше;
  20. высокая чувствительность и специфичность — для выявления возбудителей болезни в материале может содержаться всего одна клетка вируса;
  21. универсальность — для анализа подходят практически любые биологические жидкости: мокрота, кровь, смывы бронхов.
  22. Для сравнения: точность микроскопии мазков мокроты, которая используется для выявления туберкулеза, составляет всего 40-50%, а при низком количестве возбудителей снижается до 10% и меньше. Культуральные исследования мокроты более информативны, но для получения результатов требуется от 2 до 8 недель.

    Можно использовать ПЦР на туберкулез вместо Манту, если у человека имеются какие-либо противопоказания к пробе.

    К недостаткам методики относится риск получения ложноотрицательного результата. Иными словами, отсутствие в мокроте, крови или моче специфического ДНК еще не говорит об отсутствии туберкулеза у больного.

    Важно. При диагностике туберкулеза у детей чувствительность анализа ПЦР ниже, чем у взрослых, и составляет около 25-83%.

    Фото 1. Делать ПЦР вместо Манту ребенку, это хороший вариант, если он аллергик или часто болеет.

    Порядок проведения анализа ПЦР

    Процедура проведения анализа ПЦР проводится посредством специального прибора под названием амплификатор, и состоит из четырех этапов. Для проведения исследования необходимы участки ДНК, с которых начинается синтез молекул, нуклеотиды (основы молекул ДНК), а также полимераза, или фермент, ускоряющий проведение процедуры.

  23. Забор биологического материала (мокрота, кровь, смывы бронхов).
  24. Прогревание образца до температуры около 98% для разрушения первичной структуры цепочки ДНК.
  25. Отжиг, или снижение температуры на несколько градусов, чтобы связать праймер с нитью ДНК.
  26. Синтез молекул, необходимых для получения результата.
  27. После проведения 25-30 подобных циклов образуется определенное количество копий ДНК вирусов, по которым легко определить возбудителя заболевания.

    Внимание: анализ ПЦР не отличает «мертвые» микроорганизмы от «живых», поэтому результат может быть положительным в течение определенного времени после проведенного лечения.

    Подготовка к анализу

    Если сдается анализ крови ПЦР на туберкулез, то нет необходимости в специальной подготовке, но больным рекомендуется придерживаться общих правил: воздержаться от приема пищи не менее чем на 8 часов, исключить алкоголь и прием медикаментозных препаратов, не курить в течение часа перед забором материала.

    Мокроту собирают в утреннее время после чистки зубов и тщательного полоскания полости рта.

    Если экссудат выделяется плохо, накануне вечером следует принять отхаркивающий препарат или сделать ингаляцию. Диагностическую ценность имеет мокрота со слизью, гноем, белыми или желтоватыми вкраплениями.

    Если взять мокроту на анализ невозможно, для выявления возбудителей заболевания используются смывы из бронхов. Такой анализ не требует подготовки, а забор материала выполняется следующим образом. С помощью гортанного шприца больному вливают в трахею раствор хлорида натрия, который вызывает сильный кашель — выкашлянная жидкость используется для исследования.

    Внимание. Результат анализа искажают антибиотики, гепарин и другие препараты, использующиеся для местного лечения, поэтому исследование рекомендуется проводить через 10-14 дней после приема.

    no-tuberculosis.ru

    Анализ крови на туберкулез: особенности, виды и расшифровка

    Многие интересуются тем, как берется и делается анализ крови на туберкулез. Данная процедура довольно распространена. Это современный ответ прежним типам диагностики заболевания. Но какими бывают анализы крови? Что за особенности они включают в себя? И как гражданин по результатам должен понять, есть ли у него заболевание, или нет? Разобраться во всем этом не так трудно, как кажется. Не нужно иметь медицинское образование, чтобы по готовым результатам сделать вывод. Так какими знаниями должен обладать гражданин в отношении анализов на туберкулез?

    Для начала разберем, о какой болезни идет речь? Дело все в том, что туберкулез — это тяжелое хроническое заболевание, крайне опасное и заразное. Передается воздушно-капельным путем или через бытовые приборы. Оно весьма распространено в мире, но на начальных стадиях туберкулез довольно трудно выявить.

    Данное заболевание способно поразить все человеческие органы. Поэтому нельзя точно предсказать, каким будет исход. Чтобы вовремя распознать болезнь, требуется провести комплекс исследований. Например, сделать анализ крови на туберкулез.

    Самым распространенным типом болезни является тот, что поражает легкие. Именно с ним у многих складывается ассоциация. Довольно часто проявление болезни можно спутать с обычной простудой. Туберкулез сам по себе никак серьезно не проявляется. Особенно на начальных этапах развития.

    Типы диагностики заболевания

    Многие интересуются, как называется анализ крови на туберкулез. Знать это важно. Ведь при своевременном лечении заболевание отступает, и человек не сталкивается с серьезными негативными последствиями болезни. Важно знать, что на данный момент в мире есть несколько типов диагностики.

    Какие именно? Можно выделить следующие:

    В некоторых случаях проводится общий анализ крови. Обычно это делается на начальных этапах, чтобы выявить вероятность наличия заболевания. А подтверждение происходит только посредством указанных ранее методов. Сейчас придумали еще один способ, который заменяет анализ крови на туберкулез — диаскинтест. Он не контактирует с кровью, но помогает при этом обнаружить туберкулезную палочку в организме человека. Он имеет ряд своих преимуществ и недостатков. В России был введен в 2016 году.

    Теперь немного об анализах крови. Ведь именно они считаются наиболее информативными. Чаще всего под данным термином подразумевают ИФА-исследование. Такой анализ крови на туберкулез позволяет выявить наличие антител к туберкулезным палочкам.

    В принципе, не самый худший вариант. Все, что должен сделать пациент, — это сдать кровь на анализ. Обычно берут венозную, она предоставляет более точный результат. К сожалению, сейчас принято считать ИФА не слишком информативным. Ведь по данному исследованию нельзя будет сказать, на какой стадии находится заболевание, если оно имеется. Зато подобная процедура помогает, как уже было сказано, выявить наличие антител к заболеванию в организме.

    К счастью, медицина не стоит на месте и существуют иные способы выявления недуга. Причем, связанные с кровью. Какие плюсы и минусы у них есть? Как они проводятся? Каким образом можно понять, что человек болен?

    Куда более информативным и эффективным является анализ крови ПЦР на туберкулез. Это современный способ, который позволяет определить наличие туберкулезной палочки. Крайне информативен, если на исследование берется не кровь, а мокрота.

    Как правило, ПЦР-диагностика назначается при подозрительных симптомах, которые чем-то напоминают туберкулез. Тем не менее, как говорят врачи, данное исследование в случае с кровью не дает 100% результата. Он возможен только тогда, когда пациент болен туберкулезным сепсисом. В противном случае ПЦР-диагностика крови не имеет высокой результативности.

    На что еще следует обратить внимание? Анализ крови при туберкулезе у детей, как правило, не проводится. Чаще всего им назначают так называемую реакцию Манту. Данная технология позволяет с высокой, но не 100% точностью выявить наличие заболевания.

    Как проводится анализ? Ребенку подкожным методом вводят специальный препарат. Далее несколько дней нужно наблюдать за местом укола. Если туберкулеза нет, то данная область останется без изменений. Можно заметить лишь небольшую припухлость и изменение цвета кожи — она станет более розовой.

    При наличии туберкулеза место укола отекает, опухает, опухоль начинает разрастаться. Иногда может приобретать синюшный цвет. В данной ситуации ребенку повторно назначают Манту. Либо делается анализ крови на туберкулез (ИФА или ПЦР), который подтверждает или опровергает результат пробы.

    Манту иногда ошибается

    Тем не менее следует обратить внимание на то, что реакция Манту — это далеко не самый лучший способ диагностики туберкулеза в организме. Дело все в том, что данный анализ нередко ошибается.

    Как еще можно интерпретировать полученный анализ? Расшифровка положительной реакции Манту проста. Она может наблюдаться при:

  28. обострении обычных хронических заболеваний;
  29. астме;
  30. аллергии;
  31. инфекционных болезнях;
  32. ослабленном иммунитете;
  33. эпилепсии.
  34. Соответственно, даже положительный результат пробы не дает точных указаний на наличие болезни. Поэтому анализ крови на туберкулез вместо Манту оказывается более эффективным и информативным. Нужно исключить все ранее перечисленные варианты развития событий. Только тогда можно будет судить о наличии заболевания.

    Если Манту оказалась положительной, не следует поднимать панику. Уже было сказано, что данный способ диагностики не самый лучший. Нужно сдать анализ крови. При туберкулезе легких (и не только) происходят некоторые изменения в организме. Какие именно?

    Дело все в том, что на начальных стадиях кровь остается без изменений. Поэтому общий или клинический анализ не имеет смысла. В зависимости от «запущенности» болезни, будут меняться те или иные показатели. Общий анализ крови при туберкулезе иногда действительно помогает удостовериться в наличии или отсутствии заболевания.

    Тем не менее только на него полагаться не стоит. Ведь кровь и ее состав меняются, в зависимости от множества факторов. Поэтому рекомендуется либо ИФА-диагностика, либо ПЦР. Но и об общем анализе крови тоже не следует забывать.

    Расшифровка по общему анализу

    На какие показатели нужно обратить внимание, если есть вероятность туберкулезного заражения? При активной стадии заболевания общий анализ крови действительно поможет понять, что в крови находится возбудитель.

    Как именно? Основополагающей является СОЭ. В норме у человека данный показатель будет зависеть от возраста. Следует опираться на следующие данные:

  35. дети до 10 лет — до 10 мм/ч;
  36. женщины до 50 лет — до 20 мм/ч;
  37. женщины после 50 — до 30 мм/ч;
  38. мужчины до 50 лет — 15 мм/ч максимум;
  39. после 50 — до 20 мм/ч.
  40. Тем не менее СОЭ у беременных и больных людей может повышаться. При туберкулезе, как правило, данный показатель возрастает приблизительно до 50 единиц и больше. Поэтому следует обратить внимание на него. Если скорость оседания эритроцитов в крови превосходит значительно норму, можно сделать вывод о высокой вероятности заражения.

    Особенности анализа крови

    Какие особенности нужно учитывать, если решено провести дополнительное исследование на наличие изучаемого заболевания? Анализ крови на туберкулез вместо Манту назначается довольно часто. Но при этом ИФА и ПЦР часто не достаточно для окончательной постановки диагноза. Общий анализ крови тоже не полностью показывает картину происходящего в организме.

    Следует обратить внимание на то, что врач при подозрениях на наличие туберкулезной палочки в организме назначает биохимический анализ крови. Также можно сделать отдельно исследование на наличие белка. Это позволит удостовериться в результатах.

    Если туберкулез есть, но только в неактивной форме, то показатель белка окажется в переделах нормы. Острая форма заболевания повышает холестерин, мочевину и лизоцим. При этом альбумин окажется пониженным.

    Заболевание, которое поражает печень, увеличивает такие показатели, как АСТ, АЛТ и билирубин. Все это выявляется по анализу крови, в то время как реакция Манту не дает подобной информации. Этот факт нужно учитывать.

    Теперь понятно, что если есть какие-то опасения по поводу наличия изучаемого заболевания в организме, можно сдать анализ крови на туберкулез. Также дополнительно назначается биохимия и общее исследование. Все это помогает комплексно оценить ситуацию и сделать вывод о наличии болезни в организме.

    Тем не менее сейчас многие говорят о новом типе диагностики туберкулеза, который позволяет не контактировать реагенту с кровью. Речь идет об упомянутом ранее диаскинтесте. Это замена Манту. Стоит ли верить данному исследованию? Какие плюсы и минусы у него есть?

    Данный способ диагностики позволяет не контактировать с кровью — это уже было подчеркнуто неоднократно. А значит, при ослабленном организме нет вероятности заражения болезнью. Для пациента диаскинтест напоминает Манту. Исследование требуется проводить ежегодно. Обычно раз в 12 месяцев для людей от 8 до 17 лет.

    Правда, многие указывают на то, что данный тип проверки организма на наличие туберкулеза не отличается точностью. Все это из-за того, что, как и при реакции Манту, некоторые факторы могут дать ложноположительный результат. И человеку назначат либо повторное исследование, либо анализ крови на туберкулез.

    Теперь понятно, как можно выявить наличие изучаемого заболевания при помощи тех или иных анализов. QuantiFERON-TB Gold и IGRA — это редко встречающиеся на практике методики исследования крови. Собой представляют скриннинги, которые указывают на содержание антител и наличие болезни. В России практически не применяются.

    Можно заметить, что даже общий и биохимический анализы крови помогут выявить туберкулез в том или ином случае. Достаточно обратить внимание на некоторые показатели. Они будут нарушены. СОЭ при туберкулезе обязательно повышается. Вообще, только врач может на основании нескольких исследований сделать точное заключение. Для подтверждения диагноза можно брать на анализ не кровь, а мокроту.

    fb.ru

radea-linia.ru

Пцр на туберкулез

Туберкулёз — специфическая инфекция, его очаг может находиться в тканях человека годами, а после чего распространиться в течение нескольких месяцев. Это хроническое заболевание, оптимальные схемы лечения которого сложно подобрать. Одна из причин этого — запоздавшая диагностика, когда микобактерии, находясь в организме человека, уже адаптировались ко многим препаратам.

Какие современные методы постановки диагноза существуют? ПЦР диагностика — что это такое? Как проводится это исследование? В каких случаях туберкулёз диагностируется этим методом и в чём его суть?

Что такое ПЦР диагностика

Это один из самых современных методов диагностики не только заболеваний, но и обнаружения биологического материала. ПЦР диагностика была изобретена относительно недавно.

Около 30 лет назад в 1983 году американский биохимик Кэри Бэнкс Муллис предложил сложную схему восстановления биологического материала микроорганизмов по одному краткому сегменту.

Благодаря своему открытию учёный был удостоен наивысшей награды — Нобелевской премии.

Что это такое — ПЦР диагностика инфекций? Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это диагностика выявления вирусных заболеваний, основанная на методах генной инженерии.

Она широко применяется в медицинской микробиологии, иммунологии и вирусологии. Метод универсальный и помогает поставить диагноз при малом количестве материала.

Выявить инфекцию можно буквально в первые часы заражения ею, задолго до того, как проявятся первые симптомы заболевания.

Суть метода заключается в получении из материала от больного человека не самого возбудителя, а фрагментов генома (частиц ДНК), его биосинтезе с последующим определением к какому классу микроорганизмов принадлежит полученный генетический материал с помощью молекулярно-генетических методов.

Несмотря на то что это сложный процесс, он занимает намного меньше времени, чем многие биологические способы обнаружения возбудителей инфекций. В течение всего нескольких часов с помощью ПЦР удаётся обнаружить микроорганизм.

Для этого нет необходимости выделять его из среды (крови, спинномозговой жидкости, мокроты) и долго выращивать на искусственных питательных средах.

Достаточно чтобы в исследуемом материале присутствовал небольшой фрагмент нити ДНК возбудителя инфекции.

В основе реакции лежит возможность в искусственных условиях (в пробирке) создать синтез молекул нуклеиновых кислот возбудителя инфекции.

Что необходимо для проведения ПЦР?

  1. Праймеры — участки ДНК, с которых и начинается биосинтез или создание.
  2. Нуклеотиды или сложные соединения, которые являются основой молекулы ДНК либо РНК.
  3. Полимеразная цепная реакция невозможна без присутствия полимеразы, которая представляет собой фермент ускоряющий ход ПЦР.

Этапы ПЦР диагностики

Как проводится молекулярная диагностика методом ПЦР? Процедура несложная и занимает короткий промежуток времени с учётом сбора материала.

  1. Перед началом исследования берут необходимый биологический материал — это промывные воды бронхов, кровь, желудочное содержимое, мокрота. Тип биологического материала зависит от предполагаемого возбудителя.
  2. Денатурация или разрушение первичной структуры ДНК, которая состоит из двух цепочек. Суть этого этапа — разъединить две цепи под воздействием высокой температуры (максимальная — 98 ºC, которая действует не более двух минут).
  3. На следующей стадии ПЦР, под названием — отжиг, температуру снижают на несколько градусов, чтобы праймер связался с нитью ДНК.
  4. Элонгация, в процессе которой происходит непосредственно синтез нужных молекул.

В результате всего 25–30 таких циклов получают нужное количество копий ДНК микроорганизмов, которые легко распознать.

Нет возможности абсолютно всем людям с подозрением на туберкулёз проводить ПЦР, так как метод требует наличия дорогостоящего оборудования. Не все государственные поликлиники могут себе позволить купить его. Кроме этого, так сложилось, что привычные методы диагностики инфекции в большинстве случаев тоже себя оправдывают.

К ним относятся:

  • опрос пациента, сбор анамнеза;
  • полноценный осмотр человека;
  • исследование с помощью туберкулиновой пробы Манту;
  • рентгенография или флюорография;
  • компьютерная диагностика при необходимости;
  • микробиологические методы исследования: микроскопия мазка и бактериологическое исследование мокроты.

ПЦР на туберкулёз проводится в особых случаях, когда сложно поставить диагноз или нет возможности провести другие инструментальные методы.

Несмотря на изобилие способов диагностики заболеваемость туберкулёзом продолжает расти. В настоящее время отмечается не только её рост, но и другие особенности:

  • болезнь часто протекает в тяжёлой форме;
  • повышается количество летальных случаев;
  • всё чаще диагностируются устойчивые к современным химиопрепаратам формы заболевания.

Нежелание самих людей ежегодно проходить обычные профосмотры, отказ от вакцинации приводит к распространению туберкулёза. В таких условиях нужны быстрые, информативные и эффективные методы исследования, которые должны быть доступны для детей и взрослых. Все вышеперечисленные методы диагностики во многом уступают ПЦР.

Преимущества диагностики туберкулёза с помощью ПЦР

Это исследование хоть и новое, но хорошо себя зарекомендовало, особенно в спорных случаях, когда диагноз поставить невозможно по ряду причин.

Благодаря ПЦР намного легче обнаружить в исследуемом материале ДНК возбудителя туберкулёза.

Преимущества ПЦР диагностики в следующем.

  1. Это быстрый анализ. По небольшому фрагменту молекулы ДНК можно установить диагноз всего за несколько часов (около пяти), что успешно используется в экстренных ситуациях, когда, например, перед операцией нужно установить не болен ли человек туберкулёзом.
  2. Анализ ПЦР допускается в случае, когда другие методы недоступны или запрещены (для обнаружения туберкулёза лёгких иногда приходится сделать несколько рентгенографических снимков, что составит большую дозу облучения).
  3. С помощью ПЦР проводится исследование любой биологической среды на присутствие в ней возбудителя. К примеру, можно провести исследование спинномозговой жидкости, если есть подозрение на туберкулёзный менингит.
  4. Разрешена ПЦР диагностика инфекционных заболеваний в детском возрасте, так как метод безопасен.
  5. Позволяет выявить возбудителя на любой стадии развития болезни.
  6. Высокая чувствительность ПЦР позволяет обнаружить микобактерии туберкулёза, даже если в биологическом материале всего несколько микроорганизмов.
  7. Хорошо его проводить для диагностики рецидива заболевания.

После всего прочитанного ПЦР кажется практически идеальным методом диагностики, который должны делать всем с подозрением на туберкулёз. Но и здесь есть свои минусы, их необходимо учитывать.

Недостатки ПЦР при диагностике туберкулёза

В наше время такая диагностика скорее редкость, чем закономерность. И для этого есть основания.

  1. Это дорогой метод исследования. Во многих поликлиниках оборудование для проведения ПЦР отсутствует из-за высокой его стоимости, но в платных лабораториях анализ всё-таки можно сделать.
  2. Сразу после проведённого лечения мёртвые микобактерии или живые в незначительном количестве могут ещё присутствовать в организме человека (при проведении ПЦР диагностики результат будет положительным), поэтому в это время метод будет недостоверным, проводить его нет смысла.
  3. Мутации микобактерий приводят к неэффективности ПЦР — не может синтезироваться нормальная последовательность нити ДНК.
  4. Нужно правильно выбирать среду для исследования, кровь берут только при подозрении на её заражение (сепсис), нет необходимости брать мокроту если под вопросом стоит туберкулёз органов нервной системы. В таком случае ПЦР не сможет обнаружить возбудителя и диагностика будет неинформативной.

Показания для выявления туберкулёза с помощью ПЦР анализа

Пцр диагностика туберкулёза проводится чаще всего в спорных случаях. Когда врачи направляют на это исследование?

  1. Если сложно поставить диагноз обычными доступными методами, но был контакт с больным туберкулёзом.
  2. В случае, когда человека невозможно доставить на исследование в поликлинику для прохождения рутинных привычных исследований на туберкулёз, его легче обследовать с помощью ПЦР, так как мокроту для исследования можно доставить в баночке, а диагноз подтверждается в течение нескольких часов.
  3. Если человеку предстоит экстренная операция и нужно срочно выяснить болен ли он туберкулёзом.
  4. При необходимости беременную женщину тоже лучше обследовать на туберкулёз с помощью ПЦР, так как метод безопасен.
  5. На платной основе диагностику может пройти каждый, у кого туберкулёз не был подтверждён с помощью бактериологических методов и рентгеноскопии. Такое бывает, когда очаг в лёгких незаметен на прямом снимке, а человек при сдаче мокроты на исследование не смог соблюсти рекомендации по правильному забору материала. При этом человека беспокоят все симптомы, характерные для туберкулёза лёгких.
  6. Когда есть сомнения в результатах пробы Манту.
  7. Предпочтительнее делать ПЦР диагностику туберкулёза у детей. Процедура безопасна, не создаёт дополнительную лучевую нагрузку, эффективна в отношении обнаружения сложных для диагностики форм заболевания.

Своевременная диагностика туберкулёза — это залог правильно назначенного лечения и снижения распространения заболевания. Часто знакомые методы выявления болезни не всегда эффективны. Поэтому ПЦР на сегодня является одним из самых достоверных и безопасных способов обнаружения инфекции на ранних этапах её развития.

Источник:

Анализ крови на туберкулез методом ПЦР

ПЦР на туберкулез необходимо сдать всем, кто хочет знать нюансы своего состояния при данном недуге.

Для изъятия посева при подозрении на туберкулезную форму поражения легких оптимальным вариантом будет использовать то, что является содержимым желудка (это определяет такие показатели, как иммуноглобулин, СОЭ, микобактерии и лейкоциты).

Читайте также:  Повышенные эритроциты в крови у ребёнка

Кроме того, для подтверждения полученного диагноза или при подозрении на туберкулез, может использоваться томография, проба Манту, ИФА.

Общая информация

ПЦР рекомендуется проводить в утреннее время.

Это настоятельно рекомендуется проводить до того, как содержимое области желудка опустошится от всего массива мокроты, которая была проглочена за ночь (последний проведенный День борьбы с туберкулезом регламентировал это).

В связи с этим, ПЦР на наличие туберкулеза необходимы, как и томография, ИФА и Манту. Они позволяют выявлять микобактерии и состояние мочи, СОЭ, общий иммуноглобулин и определять актуальное состояние легких.

Следует отметить, что анализ на туберкулез должен осуществляться при соблюдении дополнительных норм и учете некоторых нюансов:

  • посев осуществляется в течение трех раз, однако аспирацию всего, что находится в желудке, необходимо осуществлять в условиях стационара;
  • посев наличествующих масс в желудке выявляет микобактерии менее чем в 50% диагнозов, даже при самых оптимальных условиях – вместо них рекомендовано УЗИ;
  • результат отрицательного характера не может исключать вероятности развития туберкулеза, при котором изменяется СОЭ, иммуноглобулин и другие показатели;
  • еще менее восприимчив посев материалов при ПЦР на патологическое состояние, полученного в рамках бронхоскопического обследования, исключающий подозрения на туберкулез легких у детей.

Дополнительно о ПЦР

Если анализ крови на туберкулез и аналогичная проба положительны (это подтверждает Манту, томография, ИФА и дополнительная диагностика), требуется назначение противотуберкулезной терапии. Это необходимо и в других случаях, а именно при контакте с человеком с вирусом туберкулеза, что подтверждает рентген легких и общая симптоматика.

Для выявления алгоритма лечения, при идентификации крови на туберкулез, применяются результаты идентификации восприимчивость к специфическим средствам возбудителя.

Он должен быть получен в рамках обследования больного, который контактировал с пациентом. В этом случае диагностика тоже должна включать такие меры, как Манту, томография, анализы мочи и по отношению к микобактериям.

Не менее важным критерием являются антитела к туберкулезу у детей и людей постарше.

Если больной и источник его заражения неизвестны, а также, если у него идентифицируется присутствие устойчивого штамма туберкулеза, осуществляется посев материала (мочи, мокроты), полученного от человека. Результаты в плане состояния легких, на которые опиралась диагностика, важны для взрослых и при назначении лечения ребенку.

Преимущества метода

Анализ крови на туберкулез, как и ПЦР, имеет свои преимущества.

Последний из представленных способов является основной методикой, основанной на идентификации соотношении нуклеиновых кислот по отношению к микобактериям, который используется у больных при туберкулезе.

В качестве идентификаторов компонентов туберкулеза применяются специальные последовательности ДНК нуклеотидного типа, которые следует сдать и сделать общий анализ у детей.

Следует отметить, что диагностика при туберкулезе легких у взрослых и при осуществлении ребенку, выявляет специфичность и восприимчивость различных вариантов. При этом точность ПЦР более 90% (для посева мокроты и мочи представленные результаты следует принимать за 100% по отношению к микобактериям).

Вместо них рекомендованы инструментальные методики.

В сравнении с клинической диагностикой туберкулеза легочной системы у детей, следует отметить, что специфичность ПЦР может колебаться от 80 до 100%. Восприимчивость же составляет от 25 до 83% у детей и людей постарше.

Проба Манту (которая называется туберкулинодиагностика), а также томография и общий сбор могут демонстрировать более точные итоговые результаты. В связи с этим рекомендована дополнительная диагностика с их помощью.

Наиболее это необходимо для идентификации соотношения мочи и иммуноглобулина применительно к ребенку и другим лицам, для которых требуется наиболее тщательная диагностика.

Недостатки ПЦР

Рассказывая о преимуществах ПЦР при идентификации поражения легочной системы, нельзя не отметить недостатки представленной методики, в частности, то, что:

  • отрицательные итоги ПЦР не могут являться 100% фактором, указывающим на отсутствие заболевания и патологии вместо других типов;
  • ПЦР не всегда может применяться у людей с усугубленным поражением легочной системы и в ситуациях, при которых по определенным данным диагноз не получается определить;
  • наименее полезна ПЦР в идентификации туберкулеза у людей с иммунодефицитами, а также в диагностике заболевания внелегочного типа.

Другие методы диагностики и всемирный день борьбы с туберкулезом указывают на то, что микобактерии правильнее всего идентифицировать, когда осуществляется томография, проба Манту и другие мероприятия у детей и людей постарше.

Другие методики диагностики

Множество руководств, как и всемирный день борьбы с туберкулезом, указывают на то, что наиболее показательна диагностика будет при использовании различных методик: томография, проба Манту, анализ мочи и дополнительные методы идентификации микобактерии. Важным критерием при осуществлении диагностики является ее последовательность и частотность.

Пульмонологи рекомендуют провести целостный анализ и Манту при подозрении на заболевание, перед началом лечения, 2-3 раза в рамках восстановительного цикла и через месяц после него.

Кроме того, показаны дополнительные способы, отвечающие на вопрос, как провериться на туберкулез.

Речь идет о флюорографии, пункции, бронхоскопии и даже УЗИ (информативно далеко не во всех ситуациях, сопряженных с туберкулезом, поэтому дополнительно следует осуществить анализ крови и мокроты, Манту).

Вместо них недопустимо осуществлять другие тесты, потому что они не окажутся на 100% результативными.

Дополнительные сведения

Для того чтобы всемирный день борьбы с туберкулезом оказался менее востребованным днем, следует учитывать дополнительные характеристики при диагностике по отношению к микобактериям. Одной из целей ПЦР является исключение формирования осложнений и возможность исключения воспаления.

В связи с этим следует уделять внимание пункции, как методике удаления излишнего соотношения мокроты. Способ может применяться не во всех ситуациях, однако многими пульмонологами он воспринимается не только как диагностическое мероприятие, но и как терапевтическое. Поэтому перед ее применением следует проконсультироваться со специалистом и делать это на каждом этапе развития заболевания.

Учитывая преимущества и недостатки ПЦР, можно утверждать, что для наиболее точной постановки диагноза правильно будет использовать дополнительные методики. Это позволит с максимальной точностью установить степень поражения организма и вероятность развития осложнений. Именно при таком подходе к диагностике можно говорить об эффективном лечении заболевания.

загрузка…

Источник:

Пцр на туберкулез — диагностика туберкулеза

ПЦР на туберкулез или полимеразная цепная реакция – наиболее современный и продвинутый способ диагностики заболевания. В чем его преимущество по сравнению с другими методами, и оправдывает ли он себя на самом деле?

Туберкулез – очень серьезное инфекционное заболевание, унесшее жизни миллионов людей. И сейчас этот коварный недуг разгуливает по планете, разоряя семьи и даже целые поселения.

В цивилизованных странах для диагностики инфекции на ранних сроках применяется множество инновационных методов, что позволяет противостоять натиску смертельной болезни. Одним из таких методов является ПЦР анализ крови на туберкулез.

Каким образом это работает, и почему разработчики данной методики гарантируют массу преимуществ своего творения?

Сущность способа диагностики

ПЦР, или по-другому полимеразная цепная реакция – относительно новый и по-своему инновационный метод, сделавший возможным выявление возбудителя инфекционного заболевания в считаные часы.

В качестве материала для исследования используется преимущественно кровь из вены, однако имеют место и другие биологические материалы, такие как:

  • слюна;
  • моча;
  • соскоб абсолютно любой части тела;
  • выделения из половых органов;
  • кал;
  • жидкость спинного мозга.

Таким образом, преимуществами ПЦР являются следующие факторы:

  • Абсолютное, 100-процентное обнаружение микобактерий в биологическом материале, если конечно искомые бактерии действительно присутствуют в организме человека.
  • Выдача информации не только о наличии, но и о количестве бацилл в исследуемом образце.
  • Высокая скорость проведения необходимых исследований. 4 часа и точный результат известен.
  • Обнаружение не только возбудителей туберкулеза, но и бактерий иного происхождения. Особенно стоит выделить тот момент, что таким методом выявляется даже ВИЧ-инфекция.
  • Детальное обследование легких, что не представляется возможным, если использовать другой анализ крови на микобактерии.
  • Функционирование на уровне ДНК, а значит, гарантированные точные результаты.

ПЦР диагностика туберкулеза позволяет выявить склонность к заражению данным заболеванием еще задолго до того, когда это станет известно из других исследований, например, флюорографии.

То есть, по сути, при помощи новой методики можно предсказать будущее – заболеет человек туберкулезом через какое-то время, или нет? Причем не важно, проводилась проверка у взрослого или у ребенка.

В то же время, на ранних стадиях заболевания можно точно определить происхождение микобактерий, вызвавших инфекцию, а также их свойства (устойчивость к препаратам конкретной группы, живучесть и т. д.).

Зная почти все о недуге, можно составить по максимуму действенный план борьбы с имеющейся болезнью. Также применяя анализ ПЦР, становится возможным своевременно оградить больного от здоровых людей, предотвратив тем самым дальнейшее распространение инфекции.

Читайте также:  Норма мочевины в крови

Как собирается биоматериал

ПЦР анализ – процедура очень сложная, хоть и занимает в среднем всего 4 часа. На точность результатов могут повлиять самые разнообразные факторы, которые простому обывателю могут показаться сущими пустяками. Одним из таких факторов является сбор образцов для исследования.

Действительно, может показаться, что здесь нет ничего сложного, и справиться с этим под силу любому, даже ребёнку.

На самом деле при сборе образцов для диагностики туберкулеза надо соблюдать одно очень важное правило – необходимо, чтобы все, с чем приходится взаимодействовать человеку при сборе анализов, было стерильно или по максимуму чисто.

Так например, при использовании крови из вены в качестве биоматериала анализ берет опытный специалист стерильным шприцом.

Проба собирается в пробирку и на протяжении всего исследования эксплуатируется в специальных условиях, предотвращающих свертывание крови.

Анализ мочи на микобактерии туберкулеза берется обычно утром, когда человек только проснулся и пошел в туалет. При этом емкость для сбора образца должна быть стерильной, а перед сбором необходимо пройти водные процедуры.

Соскоб с половых органов у мужчин и женщин производится соответствующими врачами в медицинском учреждении.

Сбор сложных анализов, например, жидкость спинного мозга, проводится квалифицированным специалистом в стационарных условиях.

Обычно ПЦР крови на туберкулез назначается в следующих случаях:

  • при получении спорных результатов после флюорографии;
  • при малейшем подозрении с целью заблаговременно обнаружить патологию и предпринять соответствующие меры;
  • если человек живет в окружении родственников, больных туберкулезом.

Направление на обследование методом полимеразной цепной реакции можно получить от таких врачей, как пульмонолог, фтизиатр или терапевт. Диагностика туберкулеза у детей методом ПЦР назначается, как правило, педиатром.

Как проводится ПЦР

Анализ крови на туберкулез – процедура отнюдь не простая. Это связано с многочисленными аспектами, соблюдение которых обязательно. Это во-первых. Во-вторых, технологический процесс анализирования крови на туберкулез включает в себя сложные действия и манипуляции с образцами.

Так как исследование предполагает тесную взаимосвязь с процессами на уровне ДНК, от специалиста требуется максимум концентрации при работе с биоматериалом.

Если коротко, то общая картина получения результатов выглядит так:

  1. Путем механических и химических манипуляций из образца выделяются нужные вещества.
  2. Затем диагностический процесс требует работы с ДНК возбудителей инфекции, а именно, необходимо запустить цепную реакцию удвоения ДНК.
  3. Впоследствии многократных реакций звенья ДНК-цепочки складываются в определенную последовательность, которая образует шифр.
  4. Последний этап дешифровка полученных данных и выдача результатов.

Следует отметить, что маркеры в итоге могут дать два типа вариантов ответа: простой или сложный. Простой – это либо положительно, либо отрицательно. Сложные результаты получаются путем тяжелой дешифровки элементов ДНК, зато помимо информации о присутствии или отсутствии в организме микобактерий туберкулеза можно получить дополнительные сведения.

Источник:

2 недостатка ПЦР на туберкулез: анализ крови для диагностики

Специфическая туберкулезная инфекция многие годы присутствует в тканях и структурах человека, а при определенных обстоятельствах быстро распространяется по организму за 2-3 месяца. Порой оптимальный курс лечения выбрать очень тяжело по причине запоздалой диагностики и адаптации возбудителя ко многим медикаментам.

Новейшая ПЦР диагностика туберкулеза помогает обнаружить не только развившуюся болезнь, но и сам возбудитель, когда первые признаки заболевания еще не появились.

Что такое ПЦР?

Диагностирование туберкулеза способом ПЦР появилось недавно. В 1983 году микробиолог из Америки Кэри Муллис изобрёл процедуру, при которой микроорганизмы стало возможно восстановить из биологического материала по короткому сегменту. Эта работа заслужила Нобелевскую премию.

ПЦР на туберкулез – это полимерный цепной процесс, при котором проходит диагностика и выявление вирусных возбудителей способом генной инженерии. Методика используется в иммунологических, микробиологических, вирусологических и биохимических лабораториях.

Универсальный метод помогает докторам при диагностике и выявляет инфекционный процесс даже после первых часов заражения, задолго до появления симптомов. Исследование возможно даже при маленьком количестве биоматериала.

Что нужно для проведения анализа?

  • Несколько отрезков ДНК (праймеров), с них начинается биологический синтез;
  • Нуклеотидные соединения, основа молекулы ДНК или же РНК;
  • Фермент полимераза, которая ускоряет анализ ПЦР.

В чём основа метода?

Сначала из биоматериала от заразившегося человека выделяется сегмент ДНК, при помощи генно-молекулярных способов биосинтеза дальше определяется тип микроорганизмов, которому принадлежит биофрагмент.

Эта сложная реакция занимает меньше времени, чем некоторые биометоды. ПЦР определяет возбудителя за несколько часов, при этом не существует надобности выделять его из биологической жидкости (мокроты, спинномозговой или кровяной среды), не нужно долго растить его на питательной среде. Достаточно, чтобы исследуемый материал содержал нить ДНК инфекционного возбудителя.

При проведении анализа крови ПЦР на туберкулез в пробирке искусственны путем создается синтез рибонуклеиновых кислот туберкулезной микобактерии.

Ступени диагностирования

Молекулярная реакция способом ПЦР – это несложная манипуляция, занимающая мало времени. Берется необходимый биоматериал: для определения tbc используется кровь, мокрота, промывная жидкость бронхов.

  1. Сначала разрушается первичная форма ДНК, разъединяются 2 цепочки при высокой температуре (максимум 98ОС не больше 2 минут);
  2. Затем производится отжиг, первичная температура понижается на несколько делений, возникает связь нити ДНК с праймером;
  3. Следующая стадия называется элонгация, при этом происходит биосинтез необходимых молекулярных структур.

Для получения нужного количества копий ДНК должно пройти от 25 до 30 таких циклов, при этом получившееся количество микобактерий легко распознаётся.

Обязательно ли делать ПЦР при туберкулезе?

Непосредственно всем пациентам с подозрением на ТВЦ проведение цепной диагностики не делается, так как процедура требует использования дорогого оборудования. Не все лечебные государственные учреждения позволяют его приобрести, тем более, что привычные методики диагностирования на микобактерии туберкулеза тоже информативны.

Сюда относят:

  • Тщательное собирание анамнеза, опрашивание больного;
  • Внешний осмотр;
  • Туберкулиновая проба Манту;
  • Рентгенографическое либо флюорографическое обследование;
  • По надобности компьютерное диагностирование;
  • Микроскопическое или бактериологическое исследование маска с мокротой.

ПЦР на туберкулез делается исключительно тогда, когда не имеется возможности сделать другой инструментальный анализ либо в сложных для диагностики обстоятельствах.

Несмотря на то, что изобрели великое множество методов диагностирования, количество больных туберкулезом продолжает расти. Кроме того заболеваемость приобрела некоторые особенности: нередко наблюдается тяжелая форма недуга, увеличивается число летальных исходов, возбудитель приобретает устойчивость имеющимся химиопрепаратам.

Многие люди не желают каждый год проходить профилактический осмотр, отказываются от вакцинации, что ведет к увеличению заболеваемости. Такие обстоятельства требуют эффективных и информативных способов исследования, доступных для взрослых и детей с диагнозом tbc. ПЦР имеет преимущества перед другими диагностическими методиками.

В чём ценность метода?

Это новейшее исследование отлично себя зарекомендовало. Если по ряду причин сложно поставить диагноз или в некоторых спорных случаях, ПЦР легче обнаруживает туберкулезную палочку в биологическом материале, чем другие методы.

  • Это быстрое исследование, небольшой отрезок молекулы дает возможность поставить точный диагноз за короткое время приблизительно за 5 часов, это применяется в экстренных случаях, например перед неотложным оперативным вмешательством;
  • Исследование крови на туберкулез возможно, когда другие методики недоступны или противопоказаны – иногда для обнаружения возбудителя tbc приходится делать множество Rg-снимков, облучающая доза при этом слишком большая;
  • Используя полимеразную реакцию можно исследовать любые биологические жидкости на присутствие микобактерии. К примеру, можно проводить изучение спинномозговой жидкости при туберкулезном менингите или мочи при мочеполовом туберкулезе;
  • Метод безопасен, диагностика туберкулеза у детей при помощи ПЦР не вызывает сложности;
  • Способ полимерной реакции выявляет туберкулезную палочку при любых формах и стадиях недуга;
  • Наличие в биоматериале всего нескольких бактерий позволяет увидеть присутствие микроорганизмов, так как это чувствительная реакция;
  • ПЦР легко диагностирует рецидив болезни.

Несмотря на огромное количество плюсов, всем больным с подозрением на tbc исследование не делается, так как существуют и минусы, их так же учитывают.

Видео

Видео — ранняя диагностика

В чем недостатки?

Этот метод диагностики является скорее исключительным, чем закономерным, для этого имеются причины. В первую очередь во внимание берётся дороговизна метода. Оборудование дорого стоит, государственные поликлиники не имеют возможности его приобрести из-за высокой цены, но большинство платных лабораторий оборудование имеют, анализ в них делается.

Существующие недостатки:

  • Метод обнаруживает убитые бактерии, которые погибли после лечения, при этом ПЦР показывает положительный результат. Сразу после химиотерапии проводить исследование нет смысла, так как результат будет недостоверным;
  • Туберкулезные микобактерии подвержены мутации, что приводит к неэффективности способа, при этом нить ДНК не может последовательно синтезироваться.

Среда для исследования должна тщательно выбираться, взятие крови или мочи происходит только в том случае, если есть подозрение на заражение. Нельзя взять мокроту для исследования, если подозревается туберкулез костей. В этой ситуации диагностика будет неверной.

Читайте также:  Как сдавать кровь на гормоны

Кровь и моча больного туберкулезом для изучения на ПЦР берется редко, выявление болезни таким способом сомнительно. В этих биосредах возбудитель определяется только при сепсисе, либо в случае диссеминированного туберкулеза. Локальные формы встречаются наиболее часто, при них кровь и моча могут оставаться без изменений. Чаще всего для изучения берется мокрота.

Кому показан анализ?

Большинство больных направляются на ПЦР диагностику в спорных и сложных случаях туберкулеза. Когда медицинские работники выдают направление на исследование?

  1. Если произошел контакт с человеком, у которого достоверно поставлен диагноз туберкулёза, но обычными способами диагностику сложно провести;
  2. При тех обстоятельствах, если больного предоставить в поликлинику невозможно для рентгенографии или других исследований. В такой ситуации его проще обследовать при помощи полимерного метода. Анализ мокроты просто доставляется в лабораторию в специальной таре, а результат становится известен спустя несколько часов;
  3. Перед операцией бывает необходимо срочно определить болен ли пациент туберкулезом, в этом случае показано проведение ПЦР;
  4. Из-за безопасности способа, можно проводить обследование беременной женщины или ребёнка, при этом не создается дополнительная рентген-нагрузка;
  5. Сомнительные результаты теста Манту.

Каждый желающий может пройти обследование платно, если туберкулез не подтвердился при помощи бактериологии и рентгеноскопии. Так случается, если очаг в лёгочной ткани невидим на Rg- снимке в прямой проекции, а пациент не смог собрать мокроту правильно, но признаки туберкулеза человека беспокоят.

Современная ПЦ реакция для диагностики – это залог успешного лечения, в результате которого распространенность заболевания снижается. Традиционные способы определения недугов не всегда дают желаемый эффект.

Источник:

Пцр диагностика при туберкулезе легких у детей и взрослых: что это такое и как проводиться?

Полимеразно-цепная реакция (ПЦР) представляет собой современный и эффективный метод диагностики многих заболеваний, в том числе и туберкулеза. Такая процедура позволяет достаточно быстро определить возбудителей различных заболеваний. В итоге ПЦР на туберкулез помогает пациенту и его лечащему врачу своевременно начать терапию выявленной патологии.

Методика исследования

ПЦР-диагностика туберкулеза потребует предварительного забора материала. В качестве него подойдут следующие биологические жидкости:

  • кровь;
  • моча;
  • кал;
  • мокрота;
  • соскоб с любых органов;
  • выделения половых органов;
  • спинномозговая жидкость.

При этом от того, какой именно материал был взят для исследования, будет зависеть достоверность полученного результата. Чаще всего такой анализ на туберкулез предполагает забор крови, мочи или мокроты у пациента. При этом наиболее достоверный результат можно получить в тех случаях, когда в качестве материала выступает мокрота.

Дело в том, что в таких биологических средах инфекция данного типа появляется либо при сепсисе, либо при диссеминированном туберкулезе. При локальных формах, которые встречаются значительно чаще в анализе крови и мочи могут отсутствовать какие бы то ни было изменения.

к оглавлению ↑

Как проводится сама ПЦР-диагностика

Для проведения подобного метода исследования необходимо сначала взять тот или иной материал. После этого он попадает в специальную камеру, называемую амплификатором. Названа она таким образом по той причине, что именно здесь происходит удвоение цепи ДНК, позволяющее в дальнейшем вынести положительный или отрицательный результат.

Современные аппараты не только выполняют полимеразную цепную реакцию, но также и выдают результаты проведенного обследования. В дальнейшем их расшифровкой занимается врач-фтизиатр. Пациент должен прийти к данному специалисту с выпиской, в которой указаны результаты проведенного исследования.

При этом доктор пользуется следующей системой оценки:

  • менее 0,9 относительных единиц говорят об отрицательном результате;
  • от 0,9 до 1,1 относительных единиц свидетельствуют о сомнительном результате;
  • более 1,1 относительных единиц говорят о положительном результате исследования, то есть о наличии туберкулеза.

В результате доктор получает возможность достаточно легко определить наличие или отсутствие возбудителя заболевания в исследуемом материале.

к оглавлению ↑

К кому обратиться за проведением анализа?

В настоящее время есть сразу несколько специалистов, которые могут назначать подобный вариант исследования.

Основными среди них являются следующие врачи:

  • пульмонолог;
  • фтизиатр;
  • терапевт;
  • педиатр.

Несмотря на то, что назначить ПЦР для диагностики туберкулеза может каждый из этих специалистов, однако оценить результаты такого анализа и установить окончательный диагноз может только врач-фтизиатр.

Помимо этого, он назначит необходимый курс лечения, установит, где именно он должен проходить (на дому или в специализированном стационаре), а также предоставит пациенту все необходимые рекомендации по изменению образа жизни.

к оглавлению ↑

Преимущества и недостатки методики

ПЦР-анализ на туберкулез обладает целым рядом плюсов, которые привлекают, как пациентов, так и врачей-специалистов. Основными среди них являются следующие:

  1. Анализ обеспечивает практически 100% выявление возбудителя заболевания в собранном биологическом материале. Для того чтобы аппарат выдал положительный результат, достаточно наличие всего 10-100 клеток микобактерии туберкулеза.
  2. Результат после того, как выполнен анализ крови или мокроты, будет готов уже спустя 4-5 ч. Другие методики определения наличия микобактерии туберкулеза в биологических средах могут потребовать ожидания от нескольких недель до 1 месяца.
  3. Низкий риск ложного результата. Это обусловлено достаточно высокой специфичностью ДНК, которой обладает возбудитель туберкулеза.
  4. Появляется возможность выявить ДНК микобактерии при туберкулезе легких. При помощи прочих лабораторных методов исследования добиться подобных результатов практически невозможно.

Еще одним огромным преимуществом, которое предоставляет именно такой диагностический процесс, является возможность определения устойчивости бактерий к тем или иным антибиотиками. В результате, подобный анализ крови или мокроты позволяет установить, к каким именно медикаментозным препаратам наиболее чувствительна микобактерия туберкулеза.

Отзыв нашей читательницы — Анастасии Макаровой

Недавно я прочитала статью, в которой рассказывается о Монастырском сборе отца Георгия для лечения и профилактики туберкулеза. При помощи данного сбора можно не только НАВСЕГДА вылечить туберкулез, но и восстановить легкие в домашних условиях.

Я не привыкла доверять всякой информации, но решила проверить и заказала упаковку. Изменения я заметила уже через неделю: я ощутила прилив сил и энергии, улучшился аппетит, кашель и одышка — отступили, а через 2 недели пропали совсем. Мои анализы пришли в норму. Попробуйте и вы, а если кому интересно, то ниже ссылка на статью.

Читать статью —>

При этом такой вариант исследования позволяет установить подобную устойчивость всего-навсего за 2 дня. Прочие варианты обследования не предоставляют таких же возможностей. Срок установления восприимчивости к определенным антибактериальным лекарственным средствам, если берется обычный анализ крови, может достигать 1 месяца.

к оглавлению ↑

Кому проводится?

ПЦР туберкулеза хорош еще и тем, что может проводиться у следующих групп пациентов:

  • У детей;
  • У пациентов с иммунодефицитом.

Диагностика туберкулеза у детей при помощи данного метода исследования используется достаточно часто. При этом намного чаще для этих целей проводится именно анализ крови, а не мокроты. Это обусловлено тем, что далеко не всегда ребенок, особенно маленький, способен в точности выполнить указания специалиста для того, чтобы получить достаточное количество мокроты из дыхательной системы.

При острой необходимости для получения подобного биологического материала можно провести бронхоскопию. Ребенок, как, впрочем, и взрослый, достаточно тяжело переносит подобный вариант исследования, поэтому его проводят только в исключительных случаях.

Связано такое положение с тем, что у них значительно уменьшена выраженность иммунного ответа на проникновение инфекции. Кровь подобных пациентов содержит сравнительно небольшое количество антител. Кроме этого, детям с ослабленным иммунитетом не рекомендуется проводить обследование с использованием реакции Манту. ПЦР-диагностика для них становится отличным выходом из сложной ситуации.

к оглавлению ↑

Основные минусы

Помимо несомненных преимуществ, у подобного метода исследования имеются и свои недостатки. Основными среди них являются следующие:

  • если кровь не содержит ДНК микобактерии туберкулезис, то это абсолютно не свидетельствует об отсутствии заболевания;
  • при локальных формах туберкулеза при помощи полимеразной цепной реакции установить наличие ДНК в любых биологических средах обычно не удается;
  • на ранних стадиях болезни ДНК микобактерии туберкулезис в различных биологических средах обычно отсутствуют.

В результате, применимым данное исследование может быть для лиц с иммунодефицитом или же в случаях с пациентами, которые находятся в тяжелом состоянии.

Кроме этого, особенно ценной полимеразно-цепная реакция становится в диагностике туберкулеза легких для детей, которым противопоказаны другие методы диагностики.

В остальных случаях его проведение обязательно должно дополняться другими методами.

Дайте нам об этом знать — поставьте оценкуЗагрузка…

Источник:

__________________________________________

krovinushka.ru

Анализ крови на туберкулез методом ПЦР

ПЦР на туберкулез необходимо сдать всем, кто хочет знать нюансы своего состояния при данном недуге. Для изъятия посева при подозрении на туберкулезную форму поражения легких оптимальным вариантом будет использовать то, что является содержимым желудка (это определяет такие показатели, как иммуноглобулин, СОЭ, микобактерии и лейкоциты). Кроме того, для подтверждения полученного диагноза или при подозрении на туберкулез, может использоваться томография, проба Манту, ИФА.

Общая информация

ПЦР рекомендуется проводить в утреннее время. Это настоятельно рекомендуется проводить до того, как содержимое области желудка опустошится от всего массива мокроты, которая была проглочена за ночь (последний проведенный День борьбы с туберкулезом регламентировал это). В связи с этим, ПЦР на наличие туберкулеза необходимы, как и томография, ИФА и Манту. Они позволяют выявлять микобактерии и состояние мочи, СОЭ, общий иммуноглобулин и определять актуальное состояние легких.

Следует отметить, что анализ на туберкулез должен осуществляться при соблюдении дополнительных норм и учете некоторых нюансов:

  • посев осуществляется в течение трех раз, однако аспирацию всего, что находится в желудке, необходимо осуществлять в условиях стационара;
  • посев наличествующих масс в желудке выявляет микобактерии менее чем в 50% диагнозов, даже при самых оптимальных условиях – вместо них рекомендовано УЗИ;
  • результат отрицательного характера не может исключать вероятности развития туберкулеза, при котором изменяется СОЭ, иммуноглобулин и другие показатели;
  • еще менее восприимчив посев материалов при ПЦР на патологическое состояние, полученного в рамках бронхоскопического обследования, исключающий подозрения на туберкулез легких у детей.

Дополнительно о ПЦР

Если анализ крови на туберкулез и аналогичная проба положительны (это подтверждает Манту, томография, ИФА и дополнительная диагностика), требуется назначение противотуберкулезной терапии. Это необходимо и в других случаях, а именно при контакте с человеком с вирусом туберкулеза, что подтверждает рентген легких и общая симптоматика.

Для выявления алгоритма лечения, при идентификации крови на туберкулез, применяются результаты идентификации восприимчивость к специфическим средствам возбудителя. Он должен быть получен в рамках обследования больного, который контактировал с пациентом. В этом случае диагностика тоже должна включать такие меры, как Манту, томография, анализы мочи и по отношению к микобактериям. Не менее важным критерием являются антитела к туберкулезу у детей и людей постарше.

Если больной и источник его заражения неизвестны, а также, если у него идентифицируется присутствие устойчивого штамма туберкулеза, осуществляется посев материала (мочи, мокроты), полученного от человека. Результаты в плане состояния легких, на которые опиралась диагностика, важны для взрослых и при назначении лечения ребенку.

Преимущества метода

Анализ крови на туберкулез, как и ПЦР, имеет свои преимущества. Последний из представленных способов является основной методикой, основанной на идентификации соотношении нуклеиновых кислот по отношению к микобактериям, который используется у больных при туберкулезе. В качестве идентификаторов компонентов туберкулеза применяются специальные последовательности ДНК нуклеотидного типа, которые следует сдать и сделать общий анализ у детей.

Следует отметить, что диагностика при туберкулезе легких у взрослых и при осуществлении ребенку, выявляет специфичность и восприимчивость различных вариантов. При этом точность ПЦР более 90% (для посева мокроты и мочи представленные результаты следует принимать за 100% по отношению к микобактериям).

Диагностика туберкулеза легочной системы у детей при помощи ПЦР, однако, не настолько ценна.

Вместо них рекомендованы инструментальные методики.

В сравнении с клинической диагностикой туберкулеза легочной системы у детей, следует отметить, что специфичность ПЦР может колебаться от 80 до 100%. Восприимчивость же составляет от 25 до 83% у детей и людей постарше. Проба Манту (которая называется туберкулинодиагностика), а также томография и общий сбор могут демонстрировать более точные итоговые результаты. В связи с этим рекомендована дополнительная диагностика с их помощью.

Наиболее это необходимо для идентификации соотношения мочи и иммуноглобулина применительно к ребенку и другим лицам, для которых требуется наиболее тщательная диагностика.

Недостатки ПЦР

Рассказывая о преимуществах ПЦР при идентификации поражения легочной системы, нельзя не отметить недостатки представленной методики, в частности, то, что:

  • отрицательные итоги ПЦР не могут являться 100% фактором, указывающим на отсутствие заболевания и патологии вместо других типов;
  • ПЦР не всегда может применяться у людей с усугубленным поражением легочной системы и в ситуациях, при которых по определенным данным диагноз не получается определить;
  • наименее полезна ПЦР в идентификации туберкулеза у людей с иммунодефицитами, а также в диагностике заболевания внелегочного типа.

Другие методы диагностики и всемирный день борьбы с туберкулезом указывают на то, что микобактерии правильнее всего идентифицировать, когда осуществляется томография, проба Манту и другие мероприятия у детей и людей постарше.

Другие методики диагностики

Множество руководств, как и всемирный день борьбы с туберкулезом, указывают на то, что наиболее показательна диагностика будет при использовании различных методик: томография, проба Манту, анализ мочи и дополнительные методы идентификации микобактерии. Важным критерием при осуществлении диагностики является ее последовательность и частотность.

Пульмонологи рекомендуют провести целостный анализ и Манту при подозрении на заболевание, перед началом лечения, 2-3 раза в рамках восстановительного цикла и через месяц после него.

Кроме того, показаны дополнительные способы, отвечающие на вопрос, как провериться на туберкулез. Речь идет о флюорографии, пункции, бронхоскопии и даже УЗИ (информативно далеко не во всех ситуациях, сопряженных с туберкулезом, поэтому дополнительно следует осуществить анализ крови и мокроты, Манту). Вместо них недопустимо осуществлять другие тесты, потому что они не окажутся на 100% результативными.

Дополнительные сведения

Для того чтобы всемирный день борьбы с туберкулезом оказался менее востребованным днем, следует учитывать дополнительные характеристики при диагностике по отношению к микобактериям. Одной из целей ПЦР является исключение формирования осложнений и возможность исключения воспаления.

В связи с этим следует уделять внимание пункции, как методике удаления излишнего соотношения мокроты. Способ может применяться не во всех ситуациях, однако многими пульмонологами он воспринимается не только как диагностическое мероприятие, но и как терапевтическое. Поэтому перед ее применением следует проконсультироваться со специалистом и делать это на каждом этапе развития заболевания.

Учитывая преимущества и недостатки ПЦР, можно утверждать, что для наиболее точной постановки диагноза правильно будет использовать дополнительные методики. Это позволит с максимальной точностью установить степень поражения организма и вероятность развития осложнений. Именно при таком подходе к диагностике можно говорить об эффективном лечении заболевания.

yadishu.com

Расшифровка результатов ПЦР на туберкулез

  • Дата: 06-03-2015
  • Просмотров: 176
  • Рейтинг: 38

Оглавление: [скрыть]

  • Что такое ПЦР диагностика
  • Ответственность перед сдачей анализов
  • Процесс сбора анализов
  • Как расшифровываются результаты

В последнее время ПЦР на туберкулез считается наиболее точным анализом, хотя и существуют другие методы. Данное заболевание набирает обороты, поэтому специалисты стараются изобрести новые технологии по выявлению палочки Коха в организме. Всем известно, что туберкулез является инфекционной болезнью, которая может передаваться как воздушно-капельным путем, так и через насекомых и т.д. поэтому крайне важно проводить периодические обследования.

Что такое ПЦР диагностика

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет всего в течение нескольких часов обнаружить возбудителя инфекции, причем выявить можно даже 1-2 молекулы среди огромного количества. Данный тест имеет массу достоинств, которые проявляются в следующем:

  • 100%-ное выявление, так как в биологической пробе определяется от 10 до 100 клеток;
  • специфичность ДНК МБТ является очень высокой;
  • скорость анализ имеет от 4 до 4,5 часа;
  • диагностика туберкулеза легких, что практически нереально для других методов;
  • выявляется особенный фрагмент, который имеется только в конкретном возбудителе.

С помощью этой диагностики можно своевременно не только обнаружить инфекцию, но и изолировать человека и назначить ему соответствующее лечение. Особенно это касается туберкулеза, потому что точное расположение палочки Коха выявить проблематично. Кроме того, данный анализ способен исследовать устойчивость микобактерий к определенному медицинскому препарату, тем самым определяется метод лечения. Чтобы провести полимеразную цепную реакцию на устойчивость, используют гены, запоминающие невосприимчивость к некоторым лекарствам, после чего через двое суток можно получить результат. Это благотворно сказывается на профилактике заболевания.

Вернуться к оглавлению

Следует отметить, что ПЦР выявляет возбудителей не только туберкулезной палочки, но и многих других заболеваний и даже ВИЧ. Анализ проводится с любой биологической жидкостью. Это могут быть:

  • кровь;
  • моча;
  • кал;
  • выделения половых органов;
  • мокрота;
  • жидкость спинномозговая;
  • соскоб со всех органов.

Собранный материал помещается в специальный амплификатор, то есть реактор, где находятся некоторые ферменты, благодаря которым идет цепная реакция по удвоению ДНК инфекции. После этого производится расшифровка. Результат, как правило, бывает либо положительный, либо отрицательный.

Назначается диагностика туберкулеза в тех случаях, когда, во-первых, существуют основные симптомы болезни, во-вторых, человек очень длительное время болеет острыми заболеваниями дыхательных путей и, в-третьих, люди контактируют с больными туберкулезом. Но врач может провести данный анализ и при наличии сомнительных снимков после рентгенологического обследования.

На полимеразную цепную реакцию могут направить такие специалисты, как пульмонолог, фтизиатр, терапевт, а детей – педиатр. Конечно, есть правила, которые необходимо соблюдать пациенту перед сдачей, например, крови на туберкулез. Прежде всего, нельзя употреблять пищу за 4-5 часов до сдачи, а за сутки до этого нужно исключить из своего рациона жирные и аллергенные продукты. Также желательно не использовать антибиотики и личные средства гигиены в виде гелей.

Вернуться к оглавлению

Но не только больной обязан соблюдать необходимые условия. То же относится и к врачам. Чтобы забор анализов на туберкулез был проведен правильно, нужно делать это только в стерильных условиях, иначе в жидкую среду могут попасть другие микроорганизмы, следовательно, интерпретация будет неверной. Все инструменты, приборы и контейнеры тоже должны быть в стерильном виде.

Итак, материал собирается в специальные контейнеры, которые при необходимости специалист дает пациенту. Например, моча собирается только первая после пробуждения человека утром. Но при этом необходимо провести утренние водные процедуры в соответствующих местах. Мочи для сбора достаточно от 20 до 30 мл. А вот синовиальную жидкость из спинного мозга и прочие сложные анализы берет только высококвалифицированный специалист, находящийся в стационарных условиях.

У женской половины человечества мазок берет только гинеколог на специализированном кресле, а у мужчин соскоб или мазок забирается из мочеиспускательного канала (из наружной части). Из зева мазок берет врач специальной лопаткой или другими инструментами. Кровь берется непосредственно из вены стерильными шприцами.

На последнем этапе сбора доктор с учетом всех требований транспортировки и хранения направляет образец в специальную лабораторию для дальнейшего исследования. Для этого персонал лаборатории помещает кровь или прочие мазки в пробирку, в которую заблаговременно добавлено вещество, препятствующее преждевременному старению образца.

В случае с кровью, что особенно важно, данное вещество не позволяет ей свернуться, следовательно, наличие сгустков исключено. Пробирки при этом не встряхиваются, так как можно повредить состояние эритроцитов. Это все нужно для того, чтобы легче и быстрее было определить все компоненты крови.

Потом кровь на туберкулез центрифугируют, чем отделяют от плазмы клеточный осадок, который и изучается под микроскопом. Изучив первоначальные данные, добавляют фермент (транскриптазу) и при определенном температурном режиме проводят следующую цепную реакцию. Благодаря этому образуются фрагменты генетического материала, которые и подвергаются расшифровке.

Вернуться к оглавлению

Не всегда анализ бывает правдивым. Ложноположительный результат бывает только в том случае, если не соблюдены все требования по подготовке и сдаче мазков и т.д. Именно поэтому следует как пациенту, так и врачам строго придерживаться всех правил, о которых говорилось выше.

Расшифровка может быть как простой, так и сложной. К первой относится определение «отрицательно» или «положительно», что свидетельствует о том, что при отрицательной расшифровке пациенту не о чем беспокоиться, т.к. инфекций не обнаружено.

https://www.youtube.com/watch?v=YvCKmuC4aB4

При положительных результатах простой формы количество содержащихся возбудителей является ничтожно малым. Дело в том, что в медицине существуют определенные нормы, благодаря которым можно определить степень устойчивости к заболеваниям.

Но в сложной расшифровке теста определяется конкретное содержание тех или иных микроорганизмов, что позволяет сделать самые точные выводы. Естественно, ни один пациент не сможет самостоятельно расшифровать все эти цифры, а врач способен подробно объяснить больному.

Именно эти цифры показывают, где расположены очаги, на какой стадии находятся и что является причиной возникновения заболевания туберкулезом.

http://www.youtube.com/watch?v=dPAZht8tFBE

На основании расшифровки специалисты назначают метод лечения и пр. Никогда не стоит забывать о том, что малейшее наличие возбудителей свидетельствует об их присутствии в организме. Поэтому рано или поздно инфекция может распространиться дальше и стадия туберкулеза увеличится. Не следует безответственно относиться к собственному здоровью, всегда следуйте рекомендациям специалистов.

1tuberkulez.ru


Смотрите также