Пцр днк диагностика что это

ДНК-диагностика методом ПЦР

ДНК-диагностика подразумевает выявление и идентификацию генетического материала микроорганизмов в исследуемом материале.

Данный вид диагностики проводится с использованием различных методик исследования.

В практической медицине наибольшее распространение получила ПЦР (полимеразная цепная реакция).

ПЦР позволяет выявить патогенный микроорганизм методом амплификации нуклеиновых кислот.

Принцип методики ПЦР ДНК

Все живые организмы содержат индивидуальную видовую информацию, закодированную определенной, уникальной для каждого вида последовательностью нуклеотидных оснований.

При помощи ПЦР проводится выявление молекул носителя данной информации ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) или РНК (рибонуклеиновая кислота),

Также расшифровывается последовательность нуклеотидных оснований с определением видовой принадлежности.

Данная реакция является ферментативной.

Ее суть заключается в многократном копировании (амплификации) выявленного участка генетического материала.

Благодаря автоматизации процесса, методика получила широкое распространение в практической медицине для диагностики различной инфекционной патологии.

Какие заболевания диагностируются при помощи ПЦР?

ДНК ПЦР анализы применяются для диагностики большинства инфекций с половым путем передачи.

Это дает возможность достоверной верификации патогенных (болезнетворных) микроорганизмов с последующим установлением диагноза.

И назначением соответствующей этиотропной терапии, направленной на уничтожение возбудителя.

В венерологии, урологии, гинекологии ПЦР применяется для диагностики нескольких групп возбудителей половых инфекций, к которым относятся:

Поговорим о каждой группе.

ДНК-диагностика: ПЦР-анализ :: что это,расшифровка,результаты,значение,отзывы

47MEDPORTAL.RU

Главная » Статьи » ДНК-диагностика » ДНК-диагностика: ПЦР-анализ :: что это,расшифровка,результаты,значение,отзывы

ДНК-диагностика: ПЦР-анализ :: что это,расшифровка,результаты,значение,отзывыСредняя оценка: 5 Всего голосов: 1

Что это за анализ?

ДНК-диагностика — это один из наиболее современных высокотехнологичных методов исследования. ДНК-анализы широко применяются в диагностике инфекционных заболеваний, позволяя обнаруживать даже единичные микроорганизмы в организме человека.

ДНК-диагностика объединяет несколько методов исследования, самый распространенный из них — метод ПЦР (полимеразной цепной реакции).

ПЦР диагностика

Что такое ПЦР?

ПЦР — (Polymerase chain reaction, PCR diagnostics) — расшифровывается как полимеразная цепная реакция.

ПЦР диагностика — это метод лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, в частности, этот метод широко применяется и для диагностики ЗППП — заболеваний, передающихся половым путем.

Анализ методом ПЦР основан на обнаружении в материале исследования небольшого фрагмента ДНК возбудителя той инфекции, которую подозревает врач. «Небольшой фрагмент ДНК» — это несколько сотен пар оснований ДНК — кирпичиков, расположенных в строго определенной последовательности, и потому образующих неповторимый узор. Для ПЦР-диагностики инфекций достаточно небольшого фрагмента, поскольку любая ДНК включает в себя не менее нескольких тысяч оснований.

При проведении ПЦР-анализа ведется поиск такого фрагмента ДНК инфекции, который специфичен только для данного микроорганизма. Это значит, что этот фрагмент ДНК «особенный» — он встречается только у этого микроба (или группы родственных микробов), но не встречается ни у одного другого микроба.

Сама полимеразная цепная реакция (пцр диагностика) используется для того, чтобы найденный фрагмент размножить, клонировать: чтобы однозначно «увидеть» эти фрагменты ДНК, к окончанию реакции их должно быть не мене 1012 штук.

Материал для сдачи анализа ПЦР

Материалом для проведения ПЦР-диагностики может служить:

соскоб эпителиальных клеток (соскоб из уретры у мужчин и у женщин, соскоб из цервикального канала)
кровь, плазма, сыворотка крови
биологические жидкости (сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкости, слюна)
моча (используется первая порция утренней мочи)
мокрота
биопаты желудка и двенадцатиперстной кишки
слизь и другие биологические выделения

Результаты/Норма/Расшифровка анализа

Подготовка к сдаче анализа

Достоверность результатов лабораторной диагностики пцр зависит не только от опыта и профессионализма врача-лаборанта, возможностей данной лаборатории, но и от того, соблюдал ли пациент рекомендации врача, насколько правильной была его подготовка к проведению анализа. На самом деле ничего сложного в правильной подготовке нет. При сдаче анализа методом ПЦР врачи рекомендуют соблюдать следующие правила:

За сутки до проведения анализа не жить половой жизнью
Сдача ПЦР анализа крови проводится натощак, т. е. необходимо ничего не есть, не пить и не жевать жвачку
Для ПЦР-анализа мочи используется первая утренняя порция, собранная в чистый, стерильный контейнер

Срок проведения анализа ПЦР

Результат ПЦР-диагностики обычно можно получить через 1,5—2 суток после сдачи анализа. Возможно получение результатов ПЦР-теста в течение одного дня.

Отзывы/Мнения об анализе

— смотрите ниже в КОММЕНТАРИЯХ

Если Вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter

Поделитесь в социальных сетях

Смотрите также:

Новости партнеров

Ваши отзывы очень важны – по ним ориентируются другие пользователи. Обязательно поделитесь мнением и оставьте отзыв в комментариях к материалу

Что представляет собой диагностика методом ПЦР? Какие болезни определяет?

Современные высокотехнологичные методы лабораторного исследования позволяют определить болезни на начальной стадии. Инфекционные заболевания развиваются и эволюционируют, их становится все больше, а выявить их все сложнее. Диагностика методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) является одной из самых новейших и высокоточных. За ее разработку ученый Кэри Мюллис был награжден Нобелевской премией.

Полимеразная цепная реакция – метод молекулярно-генетической диагностики, позволяющий найти у людей разные виды инфекционных и наследственных патологий, как в острой и хронической форме, так и задолго до того, как патология начинает себя проявлять. Большинство врачей сталкиваются с этим анализом ежедневно и уже не представляют, как без него возможно поставить правильный диагноз и стадию болезни.

Диагностика методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) является одной из самых новейших и высокоточных

Суть ПЦР-диагностики

При анализе ПЦР используются принципы молекулярной биологии. При его проведении используются специальные ферменты, многократно копирующие фрагменты РНК и ДНК, а также микроорганизмы, возбуждающие заболевания и находящиеся в биологических материалах человека. Копирование происходит в несколько этапов, поэтому образуется цепная реакция. После этого специалисты лаборатории делают сверку полученных данных с общей базой и выявляют возбудителей заболевания, а также их концентрацию. Диагностику проводят в специальном приборе, который производит охлаждение и нагревание пробирки с биоматериалом и называется амплификатор. Соблюдение температурного режима влияет на правдивость результатов анализа.

Фрагменты ДНК микроорганизмов могут содержаться в следующих биологических материалах:

биологические жидкости;
кровь и ее производные;
соскоб эпителиальных клеток или мазок;
моча;
мокрота;
слизь и другие биологические выделения;
биопаты слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта.

Где применяется диагностика методом ПЦР

Возможности диагностики инфекционных заболеваний с применением полимеразной цепной реакции велики, с ее помощью можно определить самые разнообразные вирусы, вызывающие такие инфекции как:

ВИЧ – ПЦР-диагностика ВИЧ очень эффективна для обнаружения вируса, который вызывают эту болезнь, блокирует защитные функции и открывает путь в организм человека всевозможным патологиям;

герпес – диагностика герпеса методом ПЦР может обнаружить вирус у человека только во время рецидива, этот способ позволяет установить какого он типа;
мочеполовые инфекции – ПЦР-диагностика урогенитальных инфекций (хламидиоз, уреаплазмоз, гарднереллез, микоплазмоз, трихомониаз, кандидоз и прочие) на сегодняшний день активно применяется, так как определить возбудителей ИППП с помощью традиционных анализов сложно, а диагностика инфекций методом ПЦР позволяет в минимальной пробе выявить наличие патогенных микроорганизмов и вовремя начать терапию;
гепатит – диагностика гепатита методом ПЦР является одним из важнейших шагов для определения причин его появления и назначения адекватной схемы лечения, без использования современных молекулярно-биологических методов поставить адекватный диагноз данной патологии невозможно;

Возможности диагностики инфекционных заболеваний с применением полимеразной цепной реакции велики, с ее помощью можно определить самые разнообразные вирусы, вызывающие различные инфекции

листериоз – ПЦР-диагностика позволяет выявить даже единичных возбудителей данного заболевания в кратчайшие сроки;
цитомегаловирус – ПЦР-диагностика этого заболевания считается прогрессивной, но не дает возможность определить является ли инфекция первичной или повторной, другими словами не различает активный вирус от спящего;
туберкулез – ПЦР-диагностика туберкулеза помогает выявить наличие активной формы патологии в несколько раз оперативнее, чем другие исследования, также с помощью этого анализа можно осуществлять эпидемиологический контроль за бактериовыделителями на фоне кажущейся стабилизации состояния больного. Для диагностики туберкулеза у детей делают пробу Манту, если она положительная, то метод ПЦР позволяет с высокой точностью подтвердить установленный диагноз и определить не только туберкулез легких, но и поражение этим вирусом кожи, почек, кишечника и других органов;
вирус папилломы человека – ПЦР-диагностика ВПЧ используется для определения его типа и помогает определить количественные и качественные характеристики вируса;
клещевой энцефалит – результаты ПЦР при определении хронической формы заболевания являются самыми надежными;
глистная инвазия – диагностика паразитов помогает выявить инвазии простейшими, а также внутриклеточными паразитами, но он не позволяет определить степень тяжести заражения и количество вредителей в организме;
хеликобактерная инфекция – с помощью метода ПЦР возможно определение высокопатогенных и низкопатогенных штампов Хеликобактер Пилори, это важно для прогноза заболевания и эффективной терапии.

Это не полный список заболеваний, которые выявляются с помощью анализа ПЦР. Большинство этих патологий на ранней стадии практически незаметны, но последствия от их воздействия на организм крайне негативные и часто опасные для здоровья и жизни человека.

Беременным женщинам назначают анализ ПЦРК, чтобы выявить инфекции, передающиеся половым путем, значительно увеличивающие риск появления рака шейки матки, пагубно влияющие на протекание беременности и здоровье ребенка. Поэтому крайне важна диагностика ЗППП, чтобы не допустить заражение плода патогенными микроорганизмами.

Исходя из всего вышеперечисленного можно сделать вывод, что лабораторная диагностика с применением метода ПЦР помогает врачу установить точный диагноз и назначить эффективную терапию в каждом индивидуальном случае.

Это интересно! Помимо медицины метод ПЦР применяется и в других сферах, например, в криминалистике, когда необходимо выявить кому принадлежит найденный на месте преступления биоматериал, а иногда ПЦР используется для определения отцовства, для проведения опытов с мутацией ДНК и других экспериментов.

Плюсы и минусы метода

Преимуществами диагностики методом ПЦР являются:

большая чувствительность теста позволяет определить даже единичные агенты возбудителя, что дает возможность выявить патологию на ранней стадии, при хронической и скрытой форме;
универсальность метода позволяет использовать почти любой биоматериал для исследования от слюны до клеток кожи;
большой охват – при исследовании одного образца возможно определить наличие нескольких разных возбудителей заболеваний;
точность – высокий уровень этого метода обследования позволяет не выдавать ложных показателей;
скорость – результат готов в среднем за пять часов, то есть пациент на другой день после сдачи биоматериала уже может забрать заключение;
относительно невысокая цена – данный метод диагностики по стоимости не отличается от других лабораторных анализов крови;
используя этот метод, можно сделать доклиническую и ретроспективную диагностику. Первая выявляет патогенные микроорганизмы еще до проявления заболевания, а вторая проводится после перенесенной патологии, что позволяет не дать патологии развиться и вовремя ее вылечить, а также определить латентную форму заболевания, протекающую без явных симптомов.

Но совершенных методов диагностики не существует, поэтому и у ПЦР есть минусы:

высокие требования к соблюдению технологического процесса;
высокие требования к профессионализму лаборантов.

Совет! Проводить подобный анализ лучше только в самых хороших и профессиональных лабораториях, где внедрены строгие системы контроля за качеством работы.

Универсальность метода диагностики ПРЦ позволяет использовать почти любой биоматериал для исследования от слюны до клеток кожи

Расшифровка анализа

Анализ может показать положительный или отрицательный результат. Отрицательный значит, что в организме предполагаемые инфекции отсутствуют и человек здоров. Положительный говорит, что пациент болен и ему необходимо лечение. Любые показатели должен расшифровывать и озвучивать врач. Не стоит расстраиваться и пугаться плохих результатов, на основании них назначается терапия, главное не затягивать процесс и не заниматься самолечением.

Главная » Диагностика » Что представляет собой диагностика методом ПЦР? Какие болезни определяет?

Метод ПЦР (полимеразной цепной реакции), или охота на чуждую ДНК

ПЦР. Расшифровка этой аббревиатуры из трёх букв – это годы неустанных исканий и исследований Нобелевского лауреата 1993 года Кэри Муллиса, подарившего миру открытие, сделанное в области молекулярной биологии.Что же за метод анализа предложил он человечеству и чем тот стал так полезен медицине?

ДНК и РНК: сердце всего живого

Исследования показали: содержащиеся в ядре клетки нуклеиновые кислоты – ДНК и РНК – это не только хранилища генетической информации. Это ещё и матрицы – программы, способные копировать самих себя в сколь угодно больших количествах и объёмах. Благодаря такому свойству живые организмы способны размножаться.

Высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики это Полимеразная цепная реакция(ПЦР)

Чем мельче размеры живой субстанции, тем быстрее идёт нарастание общей массы. Наибольшей же стремительностью размножения обладают вирусы и микробы, среди которых – возбудители болезней человека.

При возникновении заболевания необходимо как можно быстрее ответить на два главных вопроса:

Есть ли в организме именно тот возбудитель, который вызывает наиболее сильное подозрение развитием именно данных клинических проявлений?
Если это – не он, то какое другое болезнетворное начало стало причиной явления?

Общепринято считать: для установления вида возбудителя болезни необходима идентификация всех звеньев бесконечно длинной цепи являющейся его основой ДНК, что требует затраты большого количества времени.

Сейчас этот вопрос перестал быть актуальным – необходимости такой громоздкой и медленной методики отныне не существует. Потому что появился и работает метод ПЦР. Он основан на том, что ДНК копирует только саму себя.

Несмотря на то, что число нуклеотидов, составляющих генетическую цепь любой степени сложности, ограничено четырьмя, а вариантов их сочетаний – множество, для каждой единицы живой материи это сочетание строго индивидуально.

Поэтому ДНК холерного вибриона отличается от РНК вируса гриппа, а комбинация нуклеотидов ДНК туберкулёзной палочки совсем не похожа на присущую вирусу бешенства. Это и позволяет идентифицировать одну обнаруженную генетическую матрицу от другой, к тому же – быстро.

Метод «ключа в замке»

На помощь здесь приходит метод ПЦР – анализ ДНК возбудителя. Он похож на процедуру открытия замка методом подбора ключей. Поскольку для каждого замка ключ – свой, имея ключ, можно легко выяснить конструкцию замка.

Точно так же обладание эталонным фрагментом ДНК – «ключом», совпадающим с уникальной конструкцией «замком» в ДНК (РНК) микроорганизма – позволяет выяснить «конструкцию» обладателя данного типа ДНК.

Но ПЦР не только обнаруживает «ключевой» участок нуклеотидной цепи – она запускает копирование данного фрагмента нуклеиновой кислоты, подобное по принципу цепной реакции ядерного распада. Изобилие полученного таким способом генетического материала обеспечивает 100% успеха при установлении вида исследуемого возбудителя.

РНК — одна из трёх основных макромолекул (две другие — ДНК и белки) , которые содержатся в клетках всех живых организмов

Имеющегося арсенала подобных «ключей» уже достаточно для идентификации микроорганизмов, являющихся причиной самых разнообразных болезней и состояний организма.

ПЦР подходит не только для установления сути микробов-возбудителей – она пригодна для исследования любого живого материала: среза или обрывка ткани, фрагмента отдельной клетки, клеточного состава биологической жидкости или содержимого кишечника в виде кала.

Генетический детектор всего живого

Учитывая единый принцип строения любой живой субстанции, исследование с применением ПЦР позволяет осуществить:

проведение генетической экспертизы (выявление наследственных болезней и факта отцовства);
клонирование организма на основе считывания его генома;
создание ранее неосуществимых генных комбинаций.

Но наиболее востребованной является методика ПЦР для медицины, когда речь заходит о необходимости уничтожения посетившей тело человека чужой жизни.

Преимущества, даваемые методом

Уникальность разработанной методики – крайне высокая чувствительность: она указывает на наличие возбудителя, даже когда представительство его в материале (например, в кале) ограничено всего несколькими молекулами его ДНК.

К достоинствам анализа с помощью метода полимеразной цепной реакции, помимо универсальности (способности выявлять любые типы РНК и ДНК) и высокой специфичности (100% выявления как одного конкретного возбудителя, так и идентификация сразу нескольких различных возбудителей в одном и том же исследуемом материале: рвотных массах, кале, ликворе и прочем), следует отнести:

быстроту (реакция производится за несколько часов, а всё время анализа, включая расшифровку, занимает не более одного дня);
возможность идентификации болезнетворного начала даже в период инкубации, не дожидаясь реакции организма на начало его жизнедеятельности.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) — распространенный метод ДНК-исследования

Такое положительное качество данного метода анализа, как возможность обнаружения возбудителей, растущих сверхдолгое время, относится к заметным преимуществам по сравнению с другими методами диагностики. Сюда же можно причислить и возможность выявления болезнетворных агентов:

культивируемых трудно;
не культивируемых вообще;
существующих в скрытной форме.

А также доступность для диагностики случаев внутриклеточного паразитирования.

Методика в действии (некоторые области применения)

Среди наиболее востребованных областей применения анализа методом ПЦР особо следует выделить сферу:

урогенитальных (гинекологических и урологических);
бронхо-лёгочных;
желудочно-кишечных инфекций.

Гастроэнтерология использует методику для проведения изучения состояния развития патологической микрофлоры желудка (хеликобактериоз) и кишечника, для диагностики кала на яйца гельминтов, на содержание в нём:

аденовирусов;
энтеровирусов;
ротавирусов;
иерсинии псевдотуберкулёза;
патогенных штаммов кишечной палочки.

Анализ кала методом полимеразной цепной реакции позволяет также оценить уровень засеянности патогенной микрофлорой гепато-панкреатической системы, желчевыводящих протоков, состояние которых чувствительно сказывается на функциях этих важнейших пищеварительных желёз, диагностировать паразитоносительство (лямблиоз и иные случаи заражения простейшими, которые иные методики анализа кала диагностировать не способны).

ПЦР занимает почетное место среди других клинических лабораторных исследований

Преимущества ПЦР анализа:

непосредственное определение наличия болезнетворных начал по фрагментам их ДНК;
высокая специфичность метода;
его высокая чувствительность (способность выявить даже единственный вирус или бактериальную клетку);
высокая скорость (не более 4-5 часов) получения результата.

Возможность выявления степени распространённости в организме возбудителей СПИДа, гепатитов, хламидиоза, сифилиса также позволяет высоко оценить новую перспективную методику анализа кала, предлагаемую лабораторной службой.

Трактовка полученных данных

Оценка результата ПЦР-исследования (его расшифровка) должна производиться врачом, лечащим конкретного больного, ибо получение положительного ответа ещё не означает факта заболевания – погибший при лечении микроорганизм ещё долго будет сигнализировать о своём наличии в теле человека.

Отрицательно же выглядящий результат при выраженной клинике заболевания свидетельствует о случае неправильного забора материала для проведения реакции.

Такое состояние дел невозможно представить в случае, когда и забор образца материала, и его обработку, и расшифровку проводит квалифицированный врач, строго следующий инструкции по применению методики.

Если вы читаете эти строки, можно сделать вывод что все ваши попытки по борьбе с паразитами не увенчались успехом. Вы даже что-то читали о лекарствах, призванных победить заразу? И в этом нет ничего удивительного, ведь глисты смертельно опасны для человека – они способны очень быстро плодиться и долго жить, а болезни, которые они вызывают, проходят тяжело, с частыми рецидивами. Плохое настроение, отсутствие аппетита, бессонница, дисфункция иммунной системы, дисбактериоз кишечника и боль в животе... Наверняка вы знаете эти симптомы не понаслышке. Но можно ли победить заразу и при этом не навредить себе? Прочтите статью главного паразитолога РФ о действенных, современных способах эффективной борьбы с паразитами...

Читать интервью» >>