Пцр анализ что это такое как делают у мужчин


Пцр анализ что это такое как делают у мужчин

Главная » Разное » Пцр анализ что это такое как делают у мужчин

Вирус папилломы человека присутствует у многих людей. Чтобы обнаружить его, необходимо сдать ПЦР на ВПЧ. С помощью этого исследования возможно выявить наличие вируса, количество и генотип. Этот метод считается точным и надежным, так как исследование с помощью полимеразной цепной реакции дает достоверный результат. Вирус папилломы иногда находится в неактивном состоянии, поэтому при наличии хоть одного симптома такого заболевания для подтверждения диагноза проводят исследование методом ПЦР.

ПЦР-тест позволяет узнать наличие вируса папилломы, а так же его тип и степень угрозы здоровью.

Общие сведения

ПЦР метод предполагает выделение в ДНК пациента чужеродной ДНК. Дело в том, что эти клетки состоят из объединенных четырех нуклеотидов. Согласно основному правилу генетики, они располагаются в определенном порядке. ДНК инородного микроорганизма нарушает этот порядок, что позволяет выявить его даже малейшую частицу. Анализ на ПЦР проводится с присоединением возбудителя ВПЧ к ДНК обследуемого, что, приводит к стремительному делению клеток. ПЦР является достаточно распространенным анализом. Этот метод очень точен и способен определить наличие ВПЧ даже в инкубационный период. При помощи ПЦР можно выяснить:

  • есть ли у человека папилломавирус;
  • какой штамм инфекции;
  • какое количество ВПЧ в крови.

В норме считается, что небольшое количество вируса папилломы человека присутствует, поэтому его обнаружение не количественным способом не результативно. Диагностическое значение имеет определение количества ВПЧ, а также его подтипа, который бывает как безопасным для здоровья, так и онкогенным. Чтобы обезопасить себя от возможных негативных последствий, важно вовремя сделать исследование ПЦР на вирус папилломы человека, проконсультироваться с врачом и начать необходимое лечение.

Вернуться к оглавлению

Показания

Наличие бородавок — повод пройти тест ПЦР.

Заразиться ВПЧ возможно только от другого человека. Патогенный микроорганизм, попадая в кровь, размножается в верхних слоях кожных покровов, что приводит к характерным проявлениям — образованию папиллом или кондилом. Так как заболевание очень распространено и наблюдается практически у 80% населения, вероятность заразиться им высока. Папилломавирус передается при помощи таких путей:

  • незащищенный половой акт;
  • во время поцелуя;
  • ребенку от мамы при родах;
  • бытовым путем;
  • при тесных соприкосновениях кожи.

В основном показаниями для проведения ПЦР ВПЧ являются кожные признаки заболевания, которые выглядят как бородавки на тонкой нитеобразной ножке. Даже если характерных кондилом на коже не наблюдается, вирус все равно может присутствовать в крови, но протекать бессимптомно. Если обнаруживаются папилломавирусные инфекции 16-го и 18-го подтипов, необходимо регулярно посещать гинеколога или уролога, проходить диагностическое обследование и сдавать анализ на ВПЧ. Только благодаря своевременному обращению к врачу имеется возможность не дать развиться этой коварной болезни.

Вернуться к оглавлению

Как сдавать: подготовка к обследованию

Специальной схемы подготовки к ПЦР исследованию нет. Такая диагностика предполагает взятие соскоба из уретры у мужчин. Женщины с целью определения ВПЧ сдают мазки, которые в последующем отправляют на ПЦР исследование. В связи с этим, единственной подготовкой к обследованию с помощью ПЦР является то, что перед прохождением анализа следует постараться не мочиться в течение двух часов. К особенностям такой диагностики относят то, что в течение трех дней перед ее прохождением важно воздержаться от половых контактов и принятий алкогольных напитков. Кроме основных пунктов подготовки, делая скрининг на ВПЧ, не следует забывать об интимной гигиене, впрочем, как при подготовке к любым гинекологическим манипуляциям.

Вернуться к оглавлению

Взятие биоматериала

От того, насколько качественно взят биоматериал, зависят результаты обследования ПЦР. Ведь если нарушится стерильность, в материал попадут инородные вещества или при заборе будет взято недостаточное количество анализируемых клеток, исследование будет проведено с нарушениями. Поэтому чистота, внимательность и качественное проведение анализа — это залог достоверности показателей.

Вернуться к оглавлению
Процедура у женщин

Перед тем как сделать соскоб, женщине с помощью стерильного раствора обрабатывают шейку метки. После этого, специальной щеточкой берут мазок из внутреннего канала. Делают это с помощью специального зонда или щеточки. У женщин это приспособление вводится на глубину 1-го сантиметра, после чего в течение 3-х секунд врач вращает его, совершая соскоб со стенок шейки матки. Потом аккуратно, не задевая стенок влагалища, доктор достает щеточку и помещает в заранее подготовленную пробирку. В течение 15-ти секунд она находится там, потом осторожно обтирается об стенки пробирки и извлекается. Пробирка закрывается и направляется на последующее проведение исследования.

Вернуться к оглавлению
Процедура у мужчин

Процедура у мужчин схожа. Прежде всего врач обрабатывает при помощи физиологического раствора головку полового члена вместе с отверстием мочеиспускательного канала. Щеточка вставляется на большую глубину, около 4-х сантиметров. Потом проводящий анализ вращает зонд, собирая биоматериал со стенок уретры. После неприятной процедуры щеточка помещается в пробирку и передается далее на лабораторное исследование. Готовый биоматериал имеет срок годности хранения при комнатной температуре, который составляет двое суток. Существует показатель контроля взятия материала, который обязательно указывается в бланке и подразумевает правильность и качественность проведения урогенитального соскоба.

Показатель контроля взятия биоматериала должен быть не менее 4-х единиц, если же он ниже — анализ нельзя считать достоверным и его нужно сдать еще раз.

Разработаны четыре методики проведения ПЦР тестирования на ВПЧ.Вернуться к оглавлению

Виды методик

Анализ ПЦР проводится с помощью разных способов определения ВПЧ. Каждый из них характеризуется своими особенностями и отличается точностью проводимого исследования. Среди таких выделяют 4 метода:

  • качественный метод;
  • генотипирование;
  • комбинированный способ;
  • количественный.
Вернуться к оглавлению
Качественный способ

Такой метод ПЦР характеризуется выявлением высокого канцерогенного риска ВПЧ. Практикуется использование его вместе с другими способами определения вируса. Главным недостатком качественного метода определения ВПЧ является то, что с его помощью нельзя установить тип возбудителя, а возможно лишь подтвердить факт заражения. Качественный метод способен показать наличие вируса от 14-го до 21-го генотипа. В бланке указывается две оценки: «обнаружено» и «не обнаружено». В первом варианте подразумевается, что в анализируемом биоматериале было найдено ДНК ВПЧ, во втором — эти же клетки отсутствуют.

Вернуться к оглавлению
Методика с генотипированием
Методика ПЦР с генотипированием позволяет выявить опасный тип ВПЧ и возможный рецидив.

Следующий способ ПЦР, метод с генотипированием, способен определить тип вируса. Это важно для прогнозирования и последующего лечения, так как 16 и 18 тип папилломавируса может стать причиной развития онкологических заболеваний. Если обнаруживаются такие типы, в обязательном порядке проводят кольпоскопию и цитологию урогенитальных клеток.

Генотипирование проводят тогда, когда важно отличить, произошло повторное заражение вирусом или он остался. Считают, что ВПЧ выжил после проведенного лечения, если в анализе ПЦР повторно определяется тот же генотип. Но если в исследовании обнаруживается другой тип вируса, то это говорит о повторном инфицировании ВПЧ. У семейной пары иногда определяют разные типы ВПЧ, что возможно в том случае, когда два организма по-разному освобождаются от вируса. В готовом бланке по каждому генотипу ВПЧ указывается ответ: «обнаружено» или «не обнаружено».

Вернуться к оглавлению
Комбинированный метод

Комбинированный способ состоит из качественного определения 16-го типа папилломавируса вместе с генотипированием. Ответ возможен в таких 3-х вариантах:

  • не обнаружено;
  • обнаружено, в том числе вирус папилломы человека 16-го типа;
  • обнаружено 16 тип папилломавируса.

В первом варианте — ДНК ВПЧ указанного типа не было найдено в биоматериале. Второй вариант означает, что кроме 16-го типа присутствуют еще другие генотипы ВПЧ. И последний вариант указывает на присутствие только 16-го типа ВПЧ. Комбинированный способ ПЦР очень важен в диагностике, так как определяет наличие одного из самых опасных подтипов папилломавируса, который приводит к развитию раковых опухолей.

Вернуться к оглавлению
Количественное определение без генотипирования
Методика ПЦР без генотипирования даёт возможность увидеть развитие раковых новообразований.

С помощью такого метода определяют количество ВПЧ в анализируемом биоматериале. Полученная информация свидетельствует о тяжести инфицирования, помогает сделать прогноз и подобрать схему лечения. Определить количество возможно 16-го и 18-го генотипа ВПЧ, что немаловажно в медицинской диагностике. Такой вид ПЦР указывает на количество клеток вируса среди взятых 100 тысяч. Если в бланке пишется, что найдено более 5-ти клеток в поле зрения, то это говорит о повышенной концентрации ВПЧ и риске развития злокачественных образований. При малозначимом количестве ВПЧ указывается значение менее 3-х.

Вернуться к оглавлению

Расшифровка ПЦР

Расшифровывать результаты анализов должен врач. Но пациенту тоже важно знать о структуре бланка результатов и как правильно интерпретировать показатели. Однако помните, что найденная информация в интернете — ознакомительная. Ставить самостоятельно диагноз с его помощью не нужно. Если в анализе указано «ДНК не обнаружено», значит папилломавирус в крови отсутствует. Если показатель Lg 5 и больше, это свидетельствует о его высокой концентрации в крови, Lg 3−5 — о значимом количестве, менее 3-х — о незначительном. Подробную информацию о типе ВПЧ и схему лечения дает лечащий доктор.

ВПЧ способен вызвать рак шейки матки у женщины и другие злокачественные образования. Для мужчин этот микроорганизм тоже опасен, вплоть до развития онкологии. Папилломы, которые вырастают в мочеиспускательном канале способны привести к перекрытию просвета и вызвать импотенцию и бесплодие. Врачи заметили, что до 30-ти лет заболевания, которые вызваны ВПЧ, спонтанно регрессируют. Однако в пожилом возрасте обратное развитие происходит редко. Поэтому важно вовремя сдать анализы, правильно их расшифровать и начать лечение.

Вернуться к оглавлению

Преимущества и недостатки

ПЦР диагностика ВПЧ является одним из самых востребованных в медицине способом обнаружения папилломавируса в крови у человека. Полимеразная цепная реакция используется не только для обнаружения ВПЧ и определения его генотипа, но и при диагностике других заболеваний. Этот метод обладает множеством преимуществ перед другими при наличии всего нескольких недостатков.

Преимущества и недостатки ПЦР
ПреимуществаНедостатки
  • Высокая специфичность.
  • Обладает высокой чувствительностью.
  • Автоматизированный процесс диагностики.
  • Исследование проводится быстро.
  • Подходит любой биологический субстрат.
  • Показывает наличие вируса и его количество.
  • Результат может быть ложноположительным.
  • Требует высокое оснащение лаборатории.
ПЦР показывает наличие ВПЧ и его тип, но оно может дать ложный результат при проведении процедуры у человека, уже болевшего данным заболеванием.

ПЦР чувствителен к живым и мертвым бактериям. Это означает, что у человека, который раннее болел ВПЧ и излечился, все равно присутствует ДНК погибших микроорганизмов. Из-за такой повышенной чувствительности возможен ложный положительный результат. Чтобы анализы были качественными и достоверными, лаборатория нуждается в квалифицированном персонале и обязательной сертификации.

stoprodinkam.ru

Что выявляет ПЦР анализ?

Полимеразная цепная реакция – это усовершенствованный, современный метод в области диагностики всевозможных инфекций, патологий наследственного характера, вирусных заболеваний. ПЦР исследование основано на принципе амплификации (или удвоения): создание определенного количества копий из одиночного участка ДНК человека. Медицинская ПЦР диагностика — это быстрый и очень точный анализ, для проведения которого требуется крайне малое количество биологического вещества (крови, каловых масс, спермы, слюны, мочи, соскоба эпителиальных тканей пациента). Результаты будут получены даже в том случае, если в собранном материале обнаружится всего один вредоносный микроорганизм.

Молекулярная диагностика методом ПЦР широко используется в следующих областях:

  1. определение генетических, онкологических отклонений, инфекций на ранних стадиях.
  2. при проведении судебно-медицинской экспертизы (если в наличии крайне малое количество ДНК).
  3. в генетике молекулярного уровня, ветеринарии, биологии и фармацевтике.
  4. для установления отцовства и определения личности по анализу ДНК.

Для чего проводят диагностику

Анализ ПЦР выявляет инфекционные заболевания и всевозможные патологии почти со 100% достоверностью. Поэтому его назначают и в тех случаях, когда при диагностике возникли спорные моменты или некоторые сложности с определением конкретного типа возбудителя.

Обследование ПЦР применяют:

  • для уточнения диагноза (повторной проверки) ВИЧ на ранней стадии заболевания, если при первичном анализе результат вызывал сомнения (например, у новорожденного, родители которого инфицированы);
  • для выявления злокачественных новообразований или текущей коррекции схем лечения, которые были назначены ранее конкретному пациенту;
  • в качестве метода обнаружения болезнетворных микроорганизмов, поражающих половые и мочевыводящие органы, если идентифицировать их другими способами не представляется возможным;
  • с целью диагностирования и устранения наследственных патологий и отклонений;
  • для проверки плода на предмет патологий (ДНК диагностика выполняется на отдельных клетках эмбриона);
  • для определения степени совместимости органов и тканей перед операцией по трансплантации;
  • для полной диагностики крови донора на предмет вредоносных организмов;
  • для оценки эффективности и динамики антибиотикотерапии.

С помощью данного метода можно определить присутствие следующих инфекций:

  1. связанных с наружными и внутренними половыми органами – гонорею, уреаплазмоз, хламидиоз, микоплазмоз, гарднереллез;
  2. грибковую инфекцию – кандидоз;
  3. туберкулез на любой стадии болезни;
  4. гепатит типа A, B, C, G, вирус иммунодефицита;
  5. рино- и аденовирусы;
  6. холеру;
  7. инфекционную краснуху;
  8. вирусы онкогенного характера;
  9. золотистый стафилококк;
  10. папилломавирус человека;
  11. патогенные разновидности кишечной палочки;
  12. острый или хронический менингит.

Этот список далеко не полный, поэтому в современных клинических лабораториях используют анализ комплексного типа. Анализ ПЦР 12 (13, 14, 15 и пр.) — это исследования на комплекс инфекций (их будет, соответственно, 12, 13, 14 или 15).

Особенности проведения забора материала

В качестве материала для исследования ПЦР подходит любая жидкость биологического характера, выделения или ткани организма больного. Вид биоматериала и особенности его взятия будут зависеть от того, какую именно инфекцию или патологию нужно диагностировать. Для этого врач проанализирует все симптомы, присутствующие у человека.

  • Для выполнения ПЦР на ВИЧ, гепатит или таксоплазмоз в клинической лаборатории берут венозную кровь.
  • Анализ ПЦР на ИППП осуществляется посредством исследования забора выделений из внутренних половых органов, мазка из уретральной области, мочи (андроскрин).
  • Для диагностики методом ПЦР на вирусы типа мононуклеоза, герпеса или цитомегаловируса биоматериалом служит моча или мазок из зева на инфекции.
  • Забор жидкости из спинномозгового канала выполняется в случае необходимости анализа поражений, которые произошли в нервной системе пациента.
  • Пульмонологическая диагностика использует скрининг плевральной жидкости и мокроты.
  • Во время ПЦР анализа вероятных внутриутробных патологий и инфекций при беременности собирают фрагменты околоплодных вод или клетки плаценты.

Правила забора крови (плазмы)

Забор крови на ПЦР выполняют не раньше, чем через 3 часа после последнего приема пищи. Идеальным вариантом для точности анализа станет взятие материала натощак из локтевой вены. Врач должен использовать одноразовую иглу, а собранный материал поместить в специальную вакуумную пробирку. Порцию взятой крови в пробирку следует несколько раз перевернуть, чтобы она полностью смешалась с антикоагулянтом. Взятая таким образом кровь может храниться не более суток при соблюдении температурного режима от +2 до +8 °С. Образцы цельной крови запрещено замораживать.

Процедура забора мочи на ПЦР

Для данного анализа подходит только порция мочи, собранная после утреннего пробуждения. Подготовка пациента заключается в тщательной гигиенической обработке наружных половых органов. Затем следует вытереть их насухо и приготовить специальный (стерильный) контейнер. Такой можно найти в любом аптечном пункте. В контейнер не должна попасть вода или выделения из влагалища. Поэтому, если мочу берут у женщины, то во влагалище рекомендуется ввести тампон. Подготовка мужчин к ПЦР заключается еще и в исключении сексуальных контактов за 2-3 дня до сбора мочи. Необходимый объем жидкости – 20-30 мл. При температуре не выше +8 °С собранный материал можно хранить в течение суток, а при -20 °С – до 7 дней.

Процедура забора мокроты

Анализу подлежит мокрота, которая выделяется утром во время первого приступа кашля. Перед откашливанием пациент должен тщательно очистить поверхность зубов и прополоскать ротовую полость теплой кипяченой водой для удаления всех возможных остатков пищи. Мокроту собирают в стерильную емкость (контейнер). Если у человека насморк, то нужно следить, чтобы в емкость не попали выделения из носоглотки. При отрицательных температурах материал можно хранить в течение 7 дней, при комнатной – не более 6 часов.

Забор соскоба у женщин

Соскоб для анализа выполняется из трех разных зон: уретры, канала цервикального и заднего свода влагалища. Соскоб на ПЦР у женщин осуществляется с помощью ложки Фолькмана или зонда универсального. Если анализ берется зондом, то его рабочая зона с материалом отрезается специальным инструментом и помещается в стерильную (одноразовую) пробирку с раствором для консервации. В случае использования ложки ее рабочие поверхности ополаскиваются этим же консервирующим раствором, который уже находится в одноразовой пробирке. Максимальный термин хранения – 1 сутки. Перед забором материала для исследования женщине нужно отказаться от половых контактов и дождаться окончания менструации. Соскоб на ПЦР берется после прекращения курса антибиотикотерапии, иначе результат может быть ошибочным.

Процедура взятия мазка (соскоба) у мужчин

Соскоб у мужчин на различные инфекции берется из уретры или генитальных язв (если есть такая необходимость). Инструментом служит стандартный зонд, рабочая часть которого после отрезания помещается в стерильную емкость с раствором-консервантом. Биоматериал можно хранить в холодильнике не дольше 24 часов.

Забор слюны для анализа

Выполнение этой процедуры требует некоторой подготовки. Следует воздержаться от приема пищи за несколько часов до манипуляции. Непосредственно перед забором нужно прополоскать полость рта физиологическим раствором. Анализ слюны на инфекции выполняется после помещения ее в одноразовую пробирку. Для диагностики достаточно 3-5 мл выделений. Такой материал хранить нельзя, поэтому собранную слюну необходимо сразу доставить в лабораторию. Если у вас нет такой возможности, то биоматериал замораживается. На основе проверки данных типов материала устанавливается диагноз и назначается лечение пациента.

Средняя стоимость в Инвитро каждого анализа может колебаться в зависимости от типа биоматериала, способа его взятия, сложности определения возбудителя, вида исследования (количественный анализ или качественный).

Расшифровка результатов исследования

Для каждого пациента результаты анализа ПЦР могут быть положительными («+») или отрицательными («-»). Достоверность ответа будет зависеть от квалификации медперсонала клиники, правильности взятия биоматериала и выполнения всех требований по подготовке.

Расшифровка качественного анализа выглядит так:

  1. Отрицательный анализ говорит о том, что в изученном материале не обнаружено присутствие возбудителей определенной инфекции. Это норма для здорового человека.
  2. Положительный ответ означает, что в собранном биологическом образце были выявлены патогенные бактерии или вирусы. Пациенту требуется срочное лечение.

Нередко бывают случаи, что пациент получает положительный результат анализа, но при этом не чувствует никаких признаков или симптомов заболевания. Это не ложноположительный результат, а свидетельство того, что заболевание находится на ранней стадии. Будут назначены дополнительные анализы и исследования. Чем раньше пациент приступит к лечебной терапии, тем быстрее справится с недугом.

Существует еще и количественная диагностика. Ее используют для конкретного типа инфекции. На основании результатов врач сможет оценить степень заражения, стадию заболевания и выбрать наиболее эффективное лечение.

Преимущества метода ПЦР

В современной медицине существует много видов диагностики биологического материала. Но почему гинекология, онкология и другие медицинские направления чаще всего прибегают именно к ПЦР исследованию? Все дело в его многочисленных преимуществах. К ним относят высокую точность полученного результата: выявить инфекцию можно даже при наличии всего нескольких молекул патологических вирусов в собранном материале. Диагностика выполняется быстро, вы сможете получить ответ уже на следующий день. Методика не дает ложноположительных результатов, а для ее осуществления можно взять практически любой биологический образец из организма человека.

brulant.ru

Анализы и диагностика

При подозрении на воспалительные заболевания мочеполовой сферы врачом урологом-андрологом проводятся различные исследования для определения возбудителя заболевания и дальнейшего подбора соответствующего антибактериального лечения.

Мазок на флору: врач определяет возбудителя инфекции (например, передаваемой половым путем)при помощи микроскопа.

Если проводится микроскопия с подсветкой, то метод называется иммунофлюоресцентным.

Бактериологическийпосев – основан на исследовании биологического материала пациента (моча, кровь, кал), который помещается в специальную среду. В результате размножения микроорганизмов можно легко обнаружить возбудителя инфекции. Такой способ очень удобен для выявления бактерий и грибов. Но в данном случае срок получения результата довольно большой – до 5-7 дней. К тому же есть вероятность, что микроорганизм не вырастет в созданных условиях, что также повлияет на результат анализа.

ДНК-диагностика(ПЦР) – самый точный из методов биологической диагностики.

Особенно актуален при диагностике инфекций, передаваемых половым путем (ИППП).

ДНК-диагностику проводят методом полимеразной цепной реакции или ПЦР. Для этого из биологического материала извлекается часть ДНК микроба. Риск ошибки при использовании данного метода составляет не более 3%. Кроме того, этот способ диагностики не только точен, но и позволяет быстро получить результаты в течение 1-3 дней. К тому же, этот метод применим к более широкому спектру микробов и подходит для выявления вялотекущих и скрытых инфекций.

Чаще всего этот метод используют урологи и гинекологи для определения наличия хламидий, гонококков, различных видов микоплазм, уреаплазм, трихомонад, вируса герпеса, цитомегаловируса, вируса папилломы и прочих инфекций.

ПЦР – это полимеразная цепная реакция. Позволяет лабораторным методом определить наличие половых инфекций у мужчин и женщин, даже если концентрация возбудителя минимальна. Достоверность метода 97-99%.

В качестве материала для обследования используют чаще всего соскоб из уретры (мочеиспускательный канал). Также определяют микроорганизм из физиологических жидкостей: кровь, эякулят (сперма), секрет простаты. После забора материала он в кратчайшие сроки доставляется в лабораторию. Там лаборант выделяет все ДНК (генетический материал) и сравнивает с нормальной ДНК пациента и микроорганизмов, вызывающих половые инфекции.

Выявить заболевание уже можно при наличии 100-105 клеток в 1 мл материала.

Однако результат может быть не только положительный и отрицательный.

Ложноположительный результат бывает при несоблюдении стерильности при заборе материала и при его исследовании, а также при уже пройденном лечении, когда ДНК микроорганизмов еще не вывелась, а сами возбудители уже не жизнеспособны.

А ложноотрицательный результат встречается в том случае, если концентрация микроорганизмов очень мала и тест-системы не способны почувствовать их наличие.

Микроорганизмы, к которым чувствителен метод ПЦР диагностики:

  • трихомонада,
  • хламидия,
  • микоплазма,
  • гонококк,
  • гарднерелла,
  • уреаплазма,
  • ВПЧ (вирус папилломы человека),
  • вирус Эшптейн-Барра,
  • вирус герпеса,
  • цитомегаловирус,
  • токсоплазма.

Состояния, когда проводится ПЦР диагностика:

  • Обследование на заболевания передающиеся половым путем,
  • Профилактическое обследование после случайного полового контакта,
  • Наличие выделений из половых путей,
  • Обнаружение инфекций у полового партнера,
  • Планирование беременности,
  • Зуд, дискомфорт, жжение в уретре,
  • Выделения из уретры,
  • Бесплодие,
  • Положительный результат посева и его микроскопии.

Как подготовиться к исследованию?

  • 1-2 суток перед визитом к врачу для сдачи анализов воздержаться от половых контактов;
  • Перед сдачей мазка на половые инфекции рекомендуется не мочиться в течение 2 часов.
  • Накануне анализа рекомендуется провести провокацию. Самым простым и наиболее надежным методом считается алиментарная провокация (алкоголь, соленое, острое).
  • Накануне анализа употребляется алкоголь и острая пища – например, одна-две бутылки пива с чем-нибудь солененьким или копченым.

Как проводится взятие мазка на ЗППП?

Во время осмотра врач уролог-андролог с помощью специальной небольшой одноразовой щеточки (зонда) берет материал для исследования у мужчин  из мочеиспускательного канала.  В определенных случаях на ПЦР берется секрет простаты или эякулят (сперма).

Сколько дней готовиться забор ПЦР на половые инфекции?

Один рабочий день (если анализ сдан до с 8.30 до 11.00).

Как оценивается результат мазка на ЗППП?

У здорового человека все инфекции должны отсутствовать.

Что делать, если в анализе мазка на половые инфекции выявлены положительные результаты?

С результатами анализа обратиться к лечащему врачу (урологу-андрологу).

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Суть иммуноферментного анализа (ИФА) заключается в выявлении специфических (индивидуальных для каждого микроорганизма) антител.

Антитела (иммуноглобулины, Ig) — специфические белки-защитники, вырабатываемые лейкоцитами (белыми кровяными тельцами) в ответ на появление в организме чужеродного генетического материала (вирусов, бактерий, простейших).

Иными словами, данные иммуноферментного анализа (ИФА) показывают не факт наличия инфекционного агента (инфекции) в организме, а состояние иммунитета к этому инфекционному агенту, т.е на основании данных ИФА можно лишь опосредованно (косвенно) судить о наличии /отсутствии инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) по ответной реакции на него иммунной (защитной) системы организма.

В зависимости от срока давности существования в организме человека вирусов, бактерий, простейших вырабатываются антитела классов А, M, G (IgА, IgM, IgG).

Иммунноферментный анализ (ИФА) в урологии и андрологии широко используют для диагностики микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомоноза, гарднереллеза, гонореи, TORCH-инфекций (токсоплазмы, краснухи, цитомегаловирусной инфекции и герпеса).

В случае низкой иммуногенности инфекционного агента (инфекции) либо недостаточной активности иммунной системы выработка антител (иммуноглобулинов классов А, M, G) может отсутствовать или быть диагностически незначимой при фактическом (реальном) наличии инфекционного агента (инфекции) в организме по данным полимеразной цепной реакции (ПЦР). Слабой иммуногенностью (способностью существовать незаметно для иммунной системы) обладают микоплазмы, уреаплазмы, трихомонада.

В ряде случаев данные иммуноферментного анализа (ИФА) могут быть ложноположительными, т.е. при фактическом отсутствии инфекционного агента (инфекции) в организме иммуноферментный анализ (ИФА) определяет наличие антител к нему. Высокая частота ложноположительных реакций часто отмечается при диагностике методом ИФА трихомоноза (трихомониаза).

Низкой иммуногенностью инфекционного агента (бактерий, вирусов, простейших) и индивидуальными особенностями иммунитета человека объясняется кажущееся противоречие данных ИФА и ПЦР, при котором исследование методом ИФА не находит инфекцию, а метод ПЦР свидетельствует о наличии инфекции в организме.

Таким образом, диагностика инфекционных заболеваний, включая инфекции, передаваемые половым путем, требует комплексной (совокупной) оценки данных всех диагностических методов.

Как сдать кровь на ИФА

  • Кровь сдается в процедурном кабинете больницы утром натощак. Между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8–12 часов. За 1–2 дня исключить из рациона жареное, жирное, алкоголь.
  • Накануне исследования (в течение 24 часов) исключить физические нагрузки.
  • За час до взятия крови воздержаться от курения.

ПСА – PSA

Простатический специфический антиген

Простатический специфический антиген (ПСА, PSA) – это один из важнейших диагностических признаков заболеваний предстательной железы. Он представляет собой вещество белковой природы, которое выделяется клетками предстательной железы.

Функция ПСА (PSA) в норме заключается в разжижении спермы после семяизвержения. Большая часть ПСА (PSA) выводится из организма мужчины спермой, однако очень незначительная часть его попадает в кровь, что определяется с помощью особых тестов. Ввиду крайне малых концентраций этого вещества в крови, для его определения применяются очень чувствительные методы – техника моноклональных антител.

Пса может находится в крови как в свободном виде, так и в связанном. Общая концентрация ПСА (PSA) определяется путем суммирования свободного и общего ПСА (PSA) . В норме содержание ПСА (PSA) в крови составляет около 4 нг/мл. Однако, в связи с тем, что предстательная железа с возрастом увеличивается и продуцирует тем самым больше ПСА (PSA) , обычно уровень его у молодых бывает ниже, а у пожилых мужчин – выше. Так, возрастные характеристики концентрации ПСА (PSA) таковы: (40 — 49, 2.5), (50 — 59, 3.5), (60 — 69, 4.5), (70 — 79, 6.5).

medi-art.kz

ПЦР - диагностика в процедуре искусственного оплодотворения

вторник, апреля 16, 2013 - 08:11

ПЦР - полимеразная цепная реакция. ПЦР в реальном времени - самый точный и быстрый на данный момент метод микробиологических исследований для выявления различных заболеваний.

Метод ПЦР у мужчин и у женщин способен обнаружить наличие возбудителя инфекции даже в том случае, когда другими методами (бактериологическими, иммунологическими, микроскопическими) может быть ничего не обнаружено.

Суть диагностики заключена в трех основных процедурах:

  • подготовке исследуемой пробы - выделении ДНК или РНК объекта исследований;
  • полимеразной цепной реакции;
  • детекции продукта ПЦР.

Чужеродный генетический материал, являющийся объектом для анализа, в ходе процедуры многократно копируется с помощью ДНК-полимеразы, чтобы потом миллионные количества его копий можно было регистрировать визуально.

Именно это и позволяет ПЦР в реальном времени обнаруживать фрагменты или единичные клетки вирусов и бактерий даже в сложных ситуациях, когда необходимо выявить возбудителя с высокой изменчивостью к антигенам либо паразитирующего внутри клетки, что практически невозможно сделать другими методами.

Какие инфекции можно диагностировать

ПЦР в реальном времени может выявлять возбудителей различных заболеваний. Причем эта методика эффективно определяет и вирусы, и бактерии, и грибки. Как правило, исследование назначают для выявления заболеваний, передающихся половым путем - ПЦР на ЗППП. Регулярно назначают ПЦР на ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), ПЦР на ВПЧ (вирус папилломы человека), а также ПЦР на гепатит С и ПЦР на туберкулез.

Нередко это обследование назначают, чтобы выявить инфекции, передаваемые половым путем - ПЦР на ИППП.

Кроме того, метод полимеразной цепной реакции применяется в пренатальных обследованиях, выявляющих «нежелательные» гены плода в утробе матери. Им определяются любые болезни, которые обусловлены особенностями нашего генотипа. Сегодня с помощью ПЦР в реальном времени выявляется более ста заболеваний, закрепившихся в человеческих генах.

Причем, с помощью ПЦР, возбудитель болезни не только выявляется, но и определяется его эффективное лечение. Как сдавать биоматериал для исследования

Данный метод позволяет обнаруживать чужеродные ДНК бактерий и вирусов в различных биологических средах. Материалом исследования для ПЦР у мужчин и женщин могут служить:

  • моча;
  • слизь;
  • кровь;
  • мокрота;
  • эпителиальный соскоб;
  • ткани плаценты.

Вид клинического материала для исследования определяется врачом на основе наиболее вероятного места локализации возбудителя. Для проведения процедуры искусственного оплодотворения одним из условий является ПРЦ в реальном времени на урогенитальные инфекции.

Поэтому для ПЦР на хламидии или ureaplasma, как и для всех остальных инфекций и заболеваний с половым путем передачи, назначают соскоб слизистой половых органов. У женщин на исследование берется содержимое влагалища, а также цервикального канала матки и уретры (для девственниц и беременных). Материалом для ПЦР у мужчин служит соскоб из уретры.

Наиболее адекватным инструментарием взятия соскобов или мазков для анализа считается одноразовый урогенитальный зонд (специальная щеточка), который способен собрать необходимое количество эпителиальной ткани, не травмируя слизистую. Он почти не впитывает отобранный образец и хорошо отдает биоматериал в транспортную среду.

Подготовка к сдаче ПЦР-анализов

Когда ЗППП протекает остро, выявить его не составляет особого труда любым из методов диагностики ИППП. Но в большинстве случаев такие инфекции протекают почти бессимптомно. Поэтому ПЦР в реальном времени зачастую назначается человеку, которого не беспокоит практически ничего. Это и есть, тот случай, когда в организме «в свободном плавании» находится весьма небольшое количество микробов и существует риск, что в лабораторную пробирку не попадет ни один из них и результатом исследования станет: ПЦР не обнаружено.

Чтобы ваши анализы на половые инфекции показали достоверные результаты, перед их сдачей проводят небольшую подготовку. Она абсолютно проста, но повышает точность результатов анализа в разы.

1. Перед сдачей биоматериала для анализов на трое суток воздержитесь от половых контактов. Такого времени достаточно, чтобы инфекционная микрофлора в большом количестве скопились в предстательной железе мужчин и во влагалище женщин.

2. Перед забором материала для ПЦР у мужчин, им не рекомендуют мочиться в течение двух часов до процедуры. Так как вместе с мочой вымывается большая часть бактерий, поэтому мочеиспускание до сдачи биоматериала снижает точность анализа.

3. Накануне анализа ПЦР в реальном времени показано проведение провокации. Провокацию проводят для кратковременного снижения иммунитета, что позволяет добиться усиления воспалительного процесса и увеличения в организме бактерий.

Самым простым и надежным методом является алиментарная провокация, которая включает в себя употребление алкоголя, соленого, острого. Накануне анализа желательно выпить алкоголь и поесть соленой пищи (например, бутылка пива с копченой рыбой). Анализы для ПЦР после такой провокации берут спустя 24, 48, 72 ч. реального времени.

4. Если существует такая возможность: у женщин забор биоматериала для данной диагностики должен проводиться сразу по окончании менструации, когда еще остаются небольшие мажущие выделения. Как правило, это 4 или 5 день цикла.

5. Непосредственно перед процедурой сдачи анализа ПЦР у мужчин и женщин требуют не проводить санацию половых органов с использованием антибактериальных средств.

6. За 10 дней до назначенной процедуры анализа необходимо прекратить принимать любые сильнодействующие лекарственные средства (по согласованию с лечащим врачом). В противном случае, можно получить искаженные результаты ПЦР. Не обнаружено - не лучший итог исследования, если инфекция все же присутствует в организме.

Результаты исследования

Как правило, результат ПЦР-анализов можно забрать через 1,5 или 2 дня после сдачи.

Однако существует и экспресс-диагностика, результаты которой, становятся известны в течение суток либо нескольких часов.

Отрицательный результат анализов, обозначаемый знаком «-», говорит о том, что в результатах ПЦР не обнаружено следов искомой инфекции.

Положительный результат, обозначающийся знаком «+», указывает на выявление в организме искомой инфекции, причем, чем больше таких плюсов (от одного до четырех) присутствует в результатах исследования, тем большее количество инфекционных составляющих было обнаружено.

ПЦР, диагностика, ЗППП, мужское бесплодие, женское бесплодие

www.probirka.org

www.medhelp-home.ru

Как правильно берут анализ ПЦР у мужчин

В настоящее время для диагностики различных заболеваний создано огромное количество методов. Все они имеют свои как положительные, так и отрицательные стороны. Некоторые из них хорошо подходят для определения одних маркеров или микроорганизмов, в то же время их бесполезно проводить при диагностике других заболеваний. В силу этого была создана одна методика, которая имеет довольно высокую чувствительность ко многим возбудителям и к различным молекулам. Для такой точной диагностики используется полимеразная цепная реакция.

Дождитесь окончания поиска во всех базах.По завершению появится ссылка для доступа к найденным материалам.

Данную реакцию можно проводить всем без исключения людям. Для проведения этой реакции необходим биологический материал для исследования. Мужские анализы:

  • кровь;
  • мужской мазок слюны;
  • мужской мазок спермы.

У женщин же для исследования чаще всего забирают, помимо крови и слюны, выделения из половых путей. И у тех, и у других для исследования можно использовать специальные мазки-слепки с поверхности слизистых оболочек различных органов.

Как берут анализ ПЦР у мужчин: особенности методики

Конечным результатом, получаемым в результате этой процедуры, являются определенные участки ДНК. Для того чтобы их получить, необходим определенный минимальный набор компонентов:

  1. Исследуемый материал или мазок на ПЦР. Как было сказано выше, для проведения полимеразной цепной реакции необходимо наличие биологического материала или мазка у мужчин, в котором будут содержаться участки ДНК нужного нам возбудителя. Поэтому и используются для исследования мазки и соскобы, кровь (чаще всего используется венозная). Немного реже для исследования берут содержимое различных гнойников или новообразований.
  2. Праймеры. Под праймерами понимают определенные точки (стартовые и конечные), которые необходимы для синтеза нужной ДНК в определенных условиях. Для исследования обычно берут 2 праймера, действие которых — достраивание нуклеотидов к цепям.
  3. ДНК-полимераза. Этот фермент является решающим в проведении ПЦР. Его действие направлено на образование необходимой для исследования и уточнения цепи ДНК. Фермент работает в определенных условиях (крайне важным и необходимым является то, что он должен быть устойчив к воздействию высоких температур, из-за чего его получают от бактерий, активных только при такой окружающей среде).
  4. Ионы магния. Они нужны для нормальной активности фермента, т.е. они выступают в роли катализатора химической реакции синтеза ДНК на полученных участках.
  5. Среда, в которой будут проходить необходимые реакции. Чаще всего используется буферный раствор с определенной плотностью, кислотностью и ионным составом.
  6. Некоторые физические факторы, такие как: давление, температура раствора и окружающей среды, влажность.

Как проходит реакция

Под действием практически всех вышеперечисленных компонентов реакции из биологического материала (мужской анализ) выделяются интересующие нас компоненты ДНК (если таковые имеются). При их наличии реакция продолжается; если же их нет, результат реакции считается отрицательным. Если в биологическом материале присутствует ДНК микроорганизма, начинается реакция амплификации. Как известно, нить ДНК состоит из двух цепей, идущих параллельно друг другу.

Во время реакции амплификации происходит разделение данных цепей на 2 параллельно идущие цепочки нуклеотидов.

На каждую из них садится праймер, основная цель которого под действием имеющейся ДНК-полимеразы образовать еще одну, идентичную той, что была в растворе сначала, нить ДНК. Таких нитей, синтезируемых в реакции, может образовываться крайне много; единственное же условие их образования — соответствие определенным условиям.

Условно протекание ПЦР-реакции можно разделить на несколько периодов. В первом периоде денатурации происходит разделение ДНК под действием высокой температуры (чаще всего выше 95 градусов). После того как цепи ДНК станут одноцепочечными, начинается вторая стадия — стадия отжига. Суть данной стадии заключается в понижении температуры среды для того, чтобы праймеры могли присоединиться к нитям ДНК и начать синтез. Чаще всего эта стадия занимает не более 30 секунд, хотя доказано, что за это время успевает синтезироваться довольно большое количество нуклеотидов.

На третьей стадии, элонгации, происходит полная достройка нужных компонентов каждой из цепей. В конце реакции наступает фаза плато, которая обуславливается снижением скорости синтеза всех цепей, достройкой всех одно цепочечных фрагментов. Время ее наступления, а также длительность фазы элонгации обусловлены количеством имеющихся реагентов.

http://youtu.be/I3khKM2ZE_Q

Для чего же проводится эта реакция

Областей, в которых чаще всего используют данную реакцию, довольно много. Она получила свое распространение в таких сферах, как:

  • криминалистика (установление наличия следов преступления и доказательство вины преступника, взяв мужской анализ ПЦР или женский);
  • генетика (проведение тестов на отцовство, исследование и установление родственных связей);
  • сфера инфекционных заболеваний (выявление в исследуемом материале частиц микроорганизмов либо продуктов их жизнедеятельности и активности);
  • персонализационная медицина (позволяет выявить наличие у человека непереносимости различных лекарств непосредственно еще до их применения и частично исследовать чувствительность организма человека и содержащихся у него бактерий к действию тех или иных антибиотиков);
  • научная деятельность (становится возможным исследование роста различных образований в условиях invitro, что в дальнейшем способствует уточнению различных данных относительно роста и функциональной способности опухолей).

Когда используют этот метод

Уникальность реакции ПЦР состоит в том, что прямых непосредственных противопоказаний к ее проведению нет. Сама же реакция проводится в таких случаях:

  1. Отрицательные или неправильные результаты, полученные при исследовании другими методами. Многие реакции не могут дать полного и развернутого ответа на все интересующие вопросы, а некоторые так и вовсе бесполезны (например, при диагностике атипичных форм малярии, когда возбудитель есть, а клиника неявная или отсутствует). В таком случае и прибегают к проведению ПЦР.
  2. Использование для диагностики различных частиц и фрагментов, взятых после антибиотикотерапии. Часто в результате лечения антибиотиками в организме может оставаться некоторое количество микроорганизмов. Так как их мало, то реакции они могут и не вызывать, однако наличие подобного “контейнера” способствует увеличению риска развития рецидивов заболевания. После лечения низко чувствительными методами такие микроорганизмы не всегда удается обнаружить, и тогда на помощь и приходит ПЦР.
  3. Замена более дорогостоящих процедур. ПЦР сама по себе является довольно затратной процедурой, однако иногда ее проведения достаточно для уточнения диагноза того или иного заболевания без использования еще более дорогих, а часто и более бесполезных методов.
  4. Выявление многих заболеваний, передающихся от партнера к партнеру во время половых сношений. Обуславливается использование ПЦР при диагностике венерических заболеваний тем, что многие возбудители ИППП довольно долгое время себя не проявляют. Исследование мазков-отпечатков со слизистых половых путей и мочеиспускательного канала позволяют выявить их еще до развития клинической картины и начать необходимое лечение как можно раньше.
  5. Уточнение онкологической составляющей. У многих пациентов с онкологией не всегда удается определить наличие тех или иных онкомаркеров. ПЦР позволяет выявить наличие либо онкомаркеров, либо дефектных клеток, что значительно повышает точность диагностики опухолей.

http://youtu.be/AVU37fmZR48

Анализ на ПЦР является универсальным методом диагностики. Высокая чувствительность и точность данной реакции делают ее использование необходимой при многих заболеваниях и состояниях. Единственным ее минусом может считаться довольно высокая затратность. Поэтому не каждый мужчина по собственному желанию может себе ее позволить. Для наиболее правильных результатов и точной их интерпретации необходимо строго соблюдать все необходимые условия для данной реакции, так как тогда существенно возрастает риск получения неправильных цепей ДНК и как следствие всего — неправильная интерпретация результатов, которые покажет анализ.

kakbik.info

Зачем мужчинам проводится анализ ПЦР

Часто для диагностики какой-либо урологической патологии у мужчины необходимо взять на анализ мазок из мочеиспускательного канала. Многие уже сталкивались с подобной процедурой, другие даже не подозревают, как берут анализ ПЦР и зачем он, собственно, нужен. А ведь подобное исследование обладает важным диагностическим значением, потому как сообщает специалисту о состоянии мочеполовых органов и их функционировании, о наличии воспалительных процессов или патогенной микрофлоры вроде трихомонад, различных кокков и пр.

Суть и назначение методики

Современные диагностические методики довольно многочисленны, но у каждой имеется определенная сфера деятельности. Одни методы предназначены для диагностики раковых патологий, другие применяются с целью обнаружить какие-либо инфекции и т. д. Существует и такая методика, которая обладает повышенной чувствительностью к специфическим молекулярным веществам и возбудителям – полимерная цепная реакция или ПЦР.

Для проведения подобного исследования у мужчины необходимо получить биоматериал, в качестве которого обычно используется кровь, мазок с уретры, спермы или слюны. Чаще всего ПЦР проводится с исследованием бактериологического мазка из мочеиспускательного канала. Подобное исследование помогает выявить половые инфекции вроде микоплазмоза или трихомониаза, хламидиоза либо уреаплазмоза, гонореи, а также простатита, уретрита и пр.

Посредством проведения полимеразной реакции можно выявить наличие вирусных гепатитов, мононуклеоза, ВИЧ-инфекции или папилломавирусной инфекции, туберкулеза, кандидоза, герпетического вируса либо клещевого энцефалита, цитомегаловирусной и хеликобактерной инфекции. Полимеразная цепная реакция отличается множеством преимуществ. Подобная диагностическая процедура обладает высокими показателями достоверности исследования, занимает короткий промежуток времени, способна одновременно обнаружить несколько патогенных микроорганизмов. Риск получить ошибочные результаты при проведении ПЦР минимален.

Подготовка к исследованию

Для высокой диагностической достоверности результатов необходимо предварительно подготовиться к анализу ПЦР. Для этого следует соблюсти некоторые условия:

  • Накануне вечером (лучше перед сном) необходимо тщательно подмыть гениталии;
  • За 2 дня до забора биоматериала следует прекратить сексуальные отношения;
  • При прохождении курса антибиотикотерапии необходимо уведомить об этом специалиста, который, скорее всего, отложит процедуру исследования на полмесяца;
  • Необходимо за несколько часов до забора биоматериала (примерно за 2-3) опустошить мочевой пузырь и больше в туалет ходить нельзя. Следующее мочеиспускание будет возможно лишь после проведения исследования.

Выполнение подобных условий необходимо для достоверности результатов, в противном случае полученная информация будет сильно искажена, что грозит неадекватным и неэффективным лечением. Особенное значение достоверность результатов имеет при развитии разного рода патогенной микрофлоры вроде трихомонад, разного рода кокков, гонореи и пр.

Течение процедуры

Забор биоматериала осуществляется медицинским зондом либо ватным тампоном, который вводится внутрь мочеиспускательного канала примерно сантиметра на 3. По утверждениям множества пациентов подобная процедура доставляет неприятный дискомфорт, а у некоторых мужчин она и вовсе сопровождалась болезненными ощущениями. После взятия мазка еще несколько часов может беспокоить некоторый дискомфорт в пенисе. Мужчина может ощущать некоторую зудящую болезненность либо жжение в уретре, преимущественно в области головки, могут беспокоить режущие боли при мочеиспускании.

Иногда для большей информативности анализа ПЦР необходимо предварительное проведение массажа уретры, который осуществляется посредством введения в мочеиспускательный канал медицинского зонда. При исследовании на простатические патологии до диагностики ПЦР может возникнуть необходимость в массаже предстательной железы, который проводят посредством введения в анальное отверстие указательного пальца.

Обычно процедура подобного исследования занимает не более 2 минут. После взятия материала для проведения полимеразной цепной реакции необходимы и дополнительные компоненты вроде ионов магния, которые выполняют катализаторные функции, ДНК-полимеразы – важнейшего ДНК-образующего фермента, праймеров, специальной среды и физических факторов. В сущности, ПЦР проводится для того, чтобы расплодить патогенный фрагмент, если таковой обнаружится в исследуемом биоматериале. Поэтому к окончанию процедуры обнаруженных фрагментов насчитывается более тысячи.

В качестве среды для полимеразной цепной реакции выступает буферный раствор, имеющий специальную кислотность и плотность, а также специфический ионный состав. Что касается факторов физического характера, то к ним относят необходимые температурные показатели окружающего воздуха и раствора, атмосферная влажность и пр. Под влиянием всех вышеуказанных условий и компонентов происходит реакция, при которой из мазка выделяются необходимые ДНК-компоненты. Если они имеются в биоматериале, то реакция продолжается, если же подобные компоненты отсутствуют, то полимеразная реакция считается отрицательной.

Сферы использования методики

Принципом подобного исследования является выявление в полученном биоматериале незначительного ДНК-фрагмента возбудителя предполагаемого инфекционного заболевания. ПЦР-диагностика уникальна отсутствием противопоказаний к проведению исследования. Обычно к подобной диагностической методике прибегают в следующих ситуациях:

  1. Для выявления ЗППП. ПЦР-исследование помогает выявить практически любую половую инфекцию, передающуюся посредством половой связи. Несомненным преимуществом подобной реакции в данном случае является тот факт, что многие возбудители половых инфекций могут длительное время бессимптомно размножаться в половых путях. Применение ПЦР-диагностики позволяет выявить подобные заболевания на самом начальном, бессимптомном этапе, когда лечение будет самым простым;
  2. При неправильных либо отрицательных данных, полученных вследствие проведения других диагностических методик. Многие исследования показывают неполную картину патологического процесса, а ПЦР сможет дать полный спектр патологических изменений;
  3. С целью уточнения онкологических процессов. К сожалению, часто невозможно выявить наличие того либо иного онкомаркера у больных раком. В данной ситуации полимеразная реакция без труда выявляет аномальные клеточные структуры и онкомаркеры, что повышает информативность опухолевой диагностики;
  4. В качестве альтернативной замены более дорогим диагностическим исследованиям. Хоть полимеразная реакция и является дорогостоящей, но иногда подобной диагностики бывает более чем достаточно для выявления заболевания, тогда как проводимые более дорогие исследования могут быть менее информативными либо вовсе бесполезными;
  5. Для выявления остаточных элементов после антибиотикотерапии. Часто случается, что после курса лечения препаратами антибиотической группы в организме остаются микроорганизмы, против которых и шла борьба. Их число может быть незначительным, отчего они неспособны сами по себе спровоцировать повторное возникновение болезни. Но подобный «резерв» может активироваться при снижении иммунитета и прочих благоприятных факторах, тогда рецидива не избежать. Выявить такие резервы поможет ПЦР-диагностика.

Подобная диагностическая методика относится к универсальным способам исследования, а ее высокочувствительность и высокоинформативность делают ПЦР незаменимой.

Расшифровка результатов

Обычно результаты сообщают пациентам уже через сутки, однако, не исключены варианты, когда реакция выдает результаты исследования по прошествии часа. Обычно подобное происходит при отрицательных результатах ПЦР-диагностики. Если же итоговые результаты носят положительный характер, то это говорит о присутствии определенного патогенного микроорганизма в мужских мочеполовых путях на момент сбора биоматериала.

Временами так случается, что, будучи носителем какой-либо серьезной инфекции, мужчина не наблюдает патологической симптоматики, но может распространять болезнь, заражая ею своих сексуальных партнерш. В подобной ситуации полимеразная реакция поможет обнаружить скрытое инфекционное носительство, степень активности патологии, стадию ее развития и прочие параметры.

Проведение ПЦР в режиме real time практически не способно дать ложный положительный результат, т. е. указать на наличие инфекционного процесса, тогда как таковой отсутствует. Подобное обычно происходит, когда инфекция пребывает в спящем состоянии и на момент проведения исследования не проявляет активности.

ПЦР-диагностика сегодня считается безошибочным и высокоинформативным исследовательским методом, однако, не стоит прибегать к нему при каждом удобном случае. Ведь такая диагностика весьма дорогостоящая. А для обнаружения некоторых инфекционных патологий достаточно проведения и более доступных анализов. Поэтому о необходимости проведения данной диагностики нужно проконсультироваться с доктором.

doktorsos.com

Как правильно берут анализ пцр у мужчин

В настоящее время для диагностики различных заболеваний создано множество способов. Все они имеют свои как положительные, так и отрицательные стороны. Некоторые из них хорошо подходят для определения одних маркеров или микроорганизмов, в то же время их бесполезно проводить при диагностике других заболеваний. В силу этого была создана одна методика, которая имеет достаточно высокую чувствительность ко многим возбудителям и к различных молекул. Для такой точной диагностики используется полимеразная цепная реакция.

Данную реакцию можно проводить всем без исключения людям. Для проведения этой реакции необходим биологический материал для исследования. Мужские анализы:

  • кровь;
  • мужской мазок слюны;
  • мужской мазок спермы.

У женщин же для исследования чаще всего забирают, кроме крови и слюны, выделения из половых путей. И у тех, и у других для исследования можно использовать специальные мазки-слепки с поверхности слизистых оболочек различных органов.

Как берут анализ ПЦР у мужчин: особенности методики

Конечным результатом, полученным в результате этой процедуры, есть определенные участки ДНК. Для того чтобы их получить, необходим определенный минимальный набор компонентов:

  • Исследуемый материал или мазок на ПЦР. Как было сказано выше, для проведения полимеразной цепной реакции необходимо наличие биологического материала или мазка у мужчин, в котором будут находиться участки ДНК нужного нам возбудителя. Поэтому и используются для исследования мазки и соскобы, кровь (чаще всего используется венозная). Немного реже для исследования берут содержимое различных гнойничков или новообразований.
  • Праймеры. Под праймерами понимают определенные точки (стартовые и конечные), которые необходимы для синтеза нужной ДНК в определенных условиях. Для исследования обычно берут 2 праймера, действие которых — достройка нуклеотидов в цепи.
  • ДНК-полимераза. Этот фермент является решающим в проведении ПЦР. Его действие направлено на образование необходимой для исследования и уточнения цепи ДНК. Фермент работает в определенных условиях (крайне важным и необходимым является то, что он должен быть устойчив к воздействию высоких температур, за что его получают от бактерий, активных только при таком окружающей среде).
  • Ионы магния. Они нужны для нормальной активности фермента, то есть они выступают в роли катализатора химической реакции синтеза ДНК на полученных участках.
  • Среда, в которой будут проходить необходимые реакции. Чаще всего используется буферный раствор с определенной плотностью, кислотностью и ионным составом.
  • Некоторые физические факторы, такие как: давление, температура раствора и окружающей среды, влажность.
  • Как проходит реакция

    Под действием практически всех перечисленных выше компонентов реакции из биологического материала (мужской анализ) выделяются интересующие нас компоненты ДНК (если таковые имеются). При их наличии реакция продолжается — если же их нет, результат реакции считается отрицательным. Если в биологическом материале присутствует ДНК микроорганизма, начинается реакция амплификации. Как известно, нить ДНК состоит из двух цепей, идущих параллельно друг другу.

    Во время реакции амплификации происходит разделение данных цепей на 2 параллельно идущие цепочки нуклеотидов.

    На каждую из них садится праймер, основная цель которого под действием имеющейся ДНК-полимеразы образовать еще одну, идентичную той, что была в растворе сначала, нить ДНК. Таких нитей, синтезированных в реакции, может образовываться крайне много — единственное условие их образования — соответствие определенным условиям.

    Условно протекание ПЦР-реакции можно разделить на несколько периодов. В первом периоде денатурации происходит разделение ДНК под действием высокой температуры (чаще не выше 95 градусов). После того как цепи ДНК станут одноланцюжковий, начинается вторая стадия — стадия отжига. Суть данной стадии заключается в снижении температуры среды для того, чтобы праймеры могли присоединиться к нитям ДНК и начать синтез. Чаще всего эта стадия занимает не более 30 секунд, хотя доказано, что за это время успевает синтезироваться достаточно большое количество нуклеотидов.

    На третьей стадии элонгации происходит полная достройка нужных компонентов каждой из цепей. В конце реакции наступает фаза плато, которая обуславливается снижением скорости синтеза всех цепей, достройкой всех одно цепочечных фрагментов. Время ее наступления, а также продолжительность фазы элонгации обусловлены количеством имеющихся реагентов.

    Для чего же проводится эта реакция

    Областей, в которых чаще всего используют данную реакцию, довольно много. Она получила свое распространение в таких сферах, как:

    • криминалистика (установление наличия следов преступления и доказывания вины преступника, взяв мужской анализ ПЦР или женский);
    • генетика (проведение тестов на отцовство, исследование и установление родственных связей);
    • сфера инфекционных заболеваний (выявление в исследуемом материале частиц микроорганизмов или продуктов их жизнедеятельности и активности);
    • персонализацийного медицина (позволяет выявить наличие у человека непереносимости различных лекарств непосредственно еще до их применения и частично исследовать чувствительность организма человека и содержащихся в нем бактерий к действию тех или иных антибиотиков);
    • научная деятельность (становится возможным исследование роста различных образований в условиях invitro, что в дальнейшем способствует уточнению различных данных относительно роста и функциональной способности опухолей).

    Когда используют этот метод

    Уникальность реакции ПЦР заключается в том, что прямых непосредственных противопоказаний к ее проведению нет. Сама же реакция проводится в таких случаях:

  • Негативные или неправильные результаты, полученные при исследовании другими методами. Многие реакции не могут дать полного и развернутого ответа на все вопросы, что интересуют, а некоторые так и вовсе бесполезны (например, при диагностике атипичных форм малярии, когда возбудитель есть, а клиника неявная или отсутствует). В таком случае и прибегают к проведению ПЦР.
  • Использование для диагностики разных частиц и фрагментов, взятых после антибиотикотерапии. Часто в результате лечения антибиотиками в организме может оставаться определенное количество микроорганизмов. Так как их мало, то реакции они могут и не вызвать, однако наличие подобного «контейнера» способствует увеличению риска развития рецидивов заболевания. После лечения низко чувствительными методами такие микроорганизмы не всегда удается обнаружить, и тогда на помощь приходит ПЦР.
  • Замена более дорогостоящих процедур. ПЦР сама по себе является достаточно затратной процедурой, однако иногда ее проведения достаточно для уточнения диагноза того или иного заболевания без использования еще более дорогих, а часто и более бесполезных методов.
  • Выявления многих заболеваний, что передаются от партнера к партнеру во время половых сношений. Обуславливается использование ПЦР при диагностике венерических заболеваний тем, что многие возбудители ИППП достаточно долгое время себя не проявляют. Исследование мазков-отпечатков со слизистых половых путей и мочеиспускательного канала позволяют выявить их еще до развития клинической картины и начать необходимое лечение как можно раньше.
  • Уточнения онкологической составляющей. У многих пациентов с онкологией не всегда удается определить наличие тех или иных онкомаркеров. ПЦР позволяет выявить наличие или онкомаркеров, или дефектных клеток, что значительно повышает точность диагностики опухолей.
  • Анализ на ПЦР является универсальным методом диагностики. Высокая чувствительность и точность данной реакции делают ее использование необходимой при многих заболеваниях и состояниях. Единственным ее минусом может считаться довольно высокая затратность. Поэтому не каждый человек по собственному желанию может себе ее позволить. Для наиболее правильных результатов и точной их интерпретации необходимо строго соблюдать все необходимые условия для данной реакции, так как тогда существенно возрастает риск получения неправильных цепей ДНК и как следствие всего — неправильная интерпретация результатов, которые покажет анализ.

    ok-doctor.xyz


    Смотрите также