Определение с реактивного белка в сыворотке крови


Методы определения с реактивного белка

М. Д. Балябина, кандидат медицинских наук

В. В. Слепышева, кандидат медицинских наук

А. В. Козлов, доктор медицинских наук

Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования

Оглавление:

В обзоре представлен анализ литературы, посвященной методам определения С-реактивного белка. Результаты проведенных популяционных исследований позволили по-новому оценить нормативные значения концентрации С-реактивного белка при определении высокочувствительным методом.

С-реактивный белок (С-РБ) был впервые обнаружен в 1930 г. в сыворотке крови больных с пневмококковой пневмонией [1]. Позднее было отмечено, что в присутствии ионов кальция данный белок способен образовывать комплексы с C-полисахаридным компонентом мембраны пневмококка в виде флокулятов. Само название «C-reactive protein» белок получил исходя из сути данной реакции [2].

С-РБ синтезируется гепатоцитами в виде белка с относительной молекулярной массой 118 кДа, состоящего из пяти идентичных субъединиц, образующих циклический пентамер. Основными стимулирующими факторами его синтеза являются интерлейкин-6 (Ил-6), а также Ил-1β, фактор некроза опухолей-α (ФНО-α), интерферон-γ, трансформирующий фактор роста-β [3].

Основные функции С-РБ окончательно не выяснены. Установлено, что он связывается с бактериями и мембранами тканей и ускоряет фагоцитоз. Кроме того, действие С-РБ направлено на активацию системы комплемента [4]. К определению концентрации С-РБ в крови в лабораторной практике приступили в 1940-х гг. В следующем десятилетии определение С-РБ превратилось в один из самых популярных клинических лабораторных тестов для оценки состояния пациентов с различными воспалительными заболеваниями [5].

Достоинства С-РБ как маркера различных заболеваний заключаются в следующем:

1. Он обладает определенным преимуществом по сравнению с СОЭ, поскольку на величину СОЭ оказывают влияние многие факторы на преаналитическом и аналитическом этапе.

2. Скорость синтеза может возрастать в 1000 раз и более.

3. Заметное повышение концентрации можно выявить через 6–10 часов после начала заболевания, нормализация уровня происходит достаточно быстро.

4. На результаты определения концентрации С-РБ в крови не оказывают влияние лекарственные препараты, анемия и гипопротеинемия.

5. Концентрация С-РБ в крови повышается раньше, чем титр антител и СОЭ, снижается быстрее по сравнению с СОЭ.

6. Простота выполнения, возможность получения ответа через несколько минут.

Различные стимулы, включая вирусную и бактериальную инфекцию, тяжелую травму, повреждение тканей (инфаркт миокарда, хирургические вмешательства), хронические воспалительные заболевания, аутоиммунные процессы (ревматоидный артрит, системная красная волчанка), отторжение трансплантированного органа, злокачественные новообразования, могут привести к значительному повышению концентрации С-РБ в крови [6].

В ответ на стимуляцию концентрация С-РБ в сыворотке крови существенно повышается в течение часа, удваиваясь каждые 5–8 ч [5]. Период полужизни С-РБ составляет около 12–24 ч [7]. Принимая во внимание, что увеличение концентрации в плазме крови большинства других острофазовых белков может быть 10-кратным, концентрация С-РБ может увеличиться в 100–1000 раз по сравнению с нормой. Концентрация С-РБ крови в так называемом клиническом интервале (выше 10 мг/л) достоверно указывает на наличие воспалительного процесса. Повышение содержания С-РБ в острой фазе воспаления является существенно более выраженным по сравнению с другими «острофазными» белками: α1-антихимотрипсином, α1-антитрипсином, α1-кислым гликопротеином, гаптоглобином, фибриногеном. При сепсисе уровень С-РБ может быть повышен по сравнению с нормой в 100 раз и более. В течение 2–3 недель после острой инфекции концентрация С-РБ возвращается к исходному уровню [8].

Особый интерес в настоящее время представляет подход к трактовке диагностической значимости повышения концентрации С-РБ в крови в интервале «субклинических» значений, т. е. до 10 мг/л. Примером может служить определение концентрации С-РБ в крови как маркера острого гипоксического повреждения миокарда при ИБС [9]. Оказалось, что у больных с нестабильной стенокардией и высоким уровнем С-РБ в крови прогноз был хуже [10, 11].

Методы определения концентрации С-реактивного белка в крови

Ранние методы, предназначенные для определения концентрации С-РБ в крови, были полуколичественными. В их основе лежало осаждение, или агглютинация, латексных частиц под влиянием С-реактивного белка. О его концентрации в исследуемом материале судили по характеру образующихся в реакции агрегатов, которые оценивали по балльной шкале от +1 до +4. Эти методы не обладали достаточной чувствительностью и специфичностью, что затрудняло соотнесение концентрации С-РБ с тяжестью заболевания. В связи с этим вместо С-РБ как маркера активности воспалительного процесса определяли другие белки «острой» фазы и скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Позднее для определения концентрации С-РБ стали применять реакцию латекс-агглютинации с использованием специфичных антител. Хотя данный метод и относится к разряду полуколичественных, так как результаты реакции оценивают визуальным способом, и не обладает высокой чувствительностью, он продолжает широко использоваться до сих пор [12].

В конце 1970-х гг. использование метода аффинной хроматографии позволило получить антитела, которые нашли применение для высокочувствительных количественных методов определения концентрации С-РБ в крови, включая нефелометрию, турбидиметрию и различные варианты иммунохимического анализа [13]. Широкое распространение получили разработанные в 1980–90-е гг. методы, позволяющие выявлять концентрацию С-РБ в крови на уровне 3–5 мг/л. Одним из наиболее популярных количественных лабораторных методов в настоящее время является иммунонефелометрия. Метод обладает высокой чувствительностью (0,4 мг/л), полностью автоматизирован и позволяет получать результаты практически немедленно [14].

К другим не менее популярным методам определения концентрации С-РБ в сыворотке крови относится иммунотурбидиметрия. Результаты, полученные указанными методами, хорошо коррелируют с результатами других количественных методов [15, 16]. Для количественного определения концентрации С-РБ продолжают использовать иммунофлуоресцентный метод. Данный метод полностью автоматизирован, обладает достаточной чувствительностью и специфичностью.

По данным Колледжа американских патологов (КАП), в 2001 г. для количественного определения С-РБ в крови в лабораториях США использовали: хемилюминесценцию (5%), иммунохимический анализ (13%), латекс-агглютинацию (25%), нефелометрию (19%) и турбидиметрию (38%) [40].

С точки зрения чувствительности, методы определения концентрации С-РБ можно разделить на две группы. В первую группу включены методы, позволяющие определять концентрацию С-РБ в диапазоне от 3 до 20 мг/л. Этот интервал позволяет охватить колебания уровня С-РБ у больных с острыми инфекционными заболеваниями.

Для решения других задач требовались методы со значительно большей чувствительностью, позволяющие выявить более низкую концентрацию С-РБ.

Производители ответили на этот вызов выпуском высокочувствительных, или «ультрачувствительных», методов определения концентрации С-РБ (hsCRP, или вчС-РБ). Более низкие пределы чувствительности для большинства тест-систем изменяются от 0,05 до 0,20 мг/л. Повышение чувствительности методов определения С-РБ было достигнуто при использовании латексных микрочастиц с адсорбированными на их поверхность моноклональными антителами к человеческому С-реактивному белку. Добавление исследуемого образца сыворотки, содержащего С-РБ, к суспензии микрочастиц приводит к образованию сложно организованной пространственной структуры. Величину светорассеяния или светопоглощения оценивают количественно с помощью соответствующих анализаторов. Такой технологический прием получил название «латексное усиление» (Latex enhanced turbidimetry). В настоящее время освоен выпуск тест-систем, предназначенных для количественного определения концентрации С-РБ. В частности, при использовании нефелометра «BN II Dade/Behring» средние значения концентрации С-РБ в крови здоровых людей в 90% наблюдений не превышают 1,69 мг/л, в 95% — 2,87 мг/л. Коэффициент вариации (CV) составляет 3,1% при концентрации С-РБ 0,5 мг/л и 5,7% — при концентрации 56 мг/л [16].

Подобная высокая разрешающая способность методов определения концентрации С-РБ в крови послужила основой для изучения роли хронического воспалительного процесса при атеросклерозе [16]. Использование высокочувствительного метода позволяет оценить риск развития инфаркта миокарда у больных с острым коронарным синдромом.

В проведенных исследованиях было показано, что концентрация С-РБ в пределах общепринятого «нормального диапазона» является независимым прогностическим фактором риска развития коронарных событий в будущем [17, 18]. Были разработаны алгоритмы для оценки риска на основе С-РБ и других маркеров [19, 20]. Поскольку у большинства больных, относящихся к данной категории, концентрация С-РБ в крови находится в пределах референтных значений, используемые методы должны позволять точно измерять концентрацию С-реактивного белка в пределах от 0,15 до 10 мг/л [21].

Данная методология обеспечивает метод такой высокой чувствительностью, что позволяет выделять различные группы внутри общепринятых границ нормы. Это позволяет использовать С-РБ в качестве маркера в эпидемиологических и научных исследованиях и ранжировать группы больных по степени риска возникновения сосудистых осложнений при ИБС [3].

В настоящее время нет универсального референтного материала и не разработан референтный метод для определения концентрации С-РБ в крови. Причиной различий результатов, полученных с использованием различных тест-систем, служит материал, использованный в качестве калибратора. В связи с этим каждый производитель тест-систем стремится установить собственные референтные значения в методе. В то же время имеются признанные образцы для определения концентрации С-РБ: 1) референтный образец C-Reactive protein (85/506), введенный в практику в 1986 г. и одобренный экспертами ВОЗ; 2) сертифицированный референтный материал 470 (CRM 470), доступен с 1993–94 гг.

Референтный материал — RPPHS (Preparation for Proteins in Human Serum). Концентрация С-РБ в образце 470 соответствует образцу 85/506.

Метод радиальной иммунодиффузии (РИД) является недорогим и относительно простым, но он не подходит для ситуаций, когда требуется быстро получить результаты анализа. Радиоиммунный анализ (РИА) позволяет обнаружить низкие количества С-РБ — 1–5 нг/мл. Несмотря на высокую чувствительность, его перестали использовать благодаря доступности других автоматизированных методов.

Появление специфичных антител к С-РБ привело к развитию полуколичественных латексных методов. Получаемые этим методом результаты хорошо сравнимы с результатами количественных методов. Разработка высокочувствительных методов определения С-РБ и рассмотрение его в качестве прогностического маркера привели к резкому всплеску интереса к этому белку. В большинстве высокочувствительных методов для повышения чувствительности используют феномен латекс-усиления.

При выборе метода следует согласовать с клиницистами необходимость использования конкретной методологии, в частности, полуколичественного или количественного варианта. При необходимости быстрого получения результатов требуются высокопроизводительные анализаторы. Однако если рабочая нагрузка является небольшой и результат необходимо получить быстрее, то латекс-агглютинация может быть методом выбора.

Были обнаружены различия в результатах определения концентрации С-РБ в сыворотке крови по сравнению с плазмой, полученной с использованием ЭДТУК или цитрата. В сыворотке значения выше, чем в плазме крови, на 8–16% [22, 23]. Не было выявлено влияния приема пищи на концентрацию С-РБ в крови [24]. Концентрация С-РБ в сыворотке крови не меняется в течение 1 недели при хранении при 4° C или в течение более длительного периода при –70° C. В случае хилезной сыворотки у больного (гипертриглицеридемия свыше 16 г/л) определение следует отложить. В то же время гемолиз (гемоглобин до 10 мг/л), гипербилирубинемия (до 600 мг/л) не являются препятствием, так как не отражаются на точности результата. Повторного оттаивания/замораживания исследуемых образцов следует избегать из-за возможной диссоциации пентамеров С-РБ до субъединиц или промежуточных форм, типа тримеров.

Диагностическую значимость, прежде всего, имеет определение концентрации С-РБ в сыворотке крови и спинномозговой жидкости (СМЖ). Данный белок также обнаружен в синовиальной, амниотической, плевральной, асцитической жидкости и в содержимом волдыря [22]. С-РБ не способен проникать через плацентарную мембрану. В связи с этим увеличение его концентрации у новорожденных указывает на необходимость исследования этого показателя для выявления возможной бактериальной инфекции [25].

Поскольку определение концентрации С-РБ и в сыворотке крови, и в СМЖ имеет диагностическое значение, следует учитывать возможность поглощения С-РБ в СМЖ, что может приводить к ложному занижению результатов [26].

Ревматоидный фактор в высоком титре может вмешиваться в иммунохимические методы определения концентрации С-РБ. Большинство производителей тест-систем включают в их состав дитиотреитол для разрушения ревматоидного фактора за счет уменьшения числа дисульфидных связей. Поскольку концентрация С-РБ может резко увеличиваться при воспалении, и его уровень может превысить 1000-кратный. Это может приводить к избытку антигена в реакционной среде. Был выявлен так называемый прозонный эффект у трети высокочувствительных (вчС-РБ) тест-систем [26].

Прием пищи не влияет на концентрацию С-РБ, тем не менее следует считаться с возможностью влияния постпрандиальной триглицеридемии и хиломикронемии на результаты иммунотубидиметрии и нефелометрии.

Среди факторов, которые могут повлиять на концентрацию С-РБ у практически здорового человека, нужно указать следующие [27, 28]:

— избыточная масса тела;

— очаговая инфекция. Умеренно выраженная воспалительная реакция или вирусная инфекция чаще всего вызывают повышение концентрации С-РБ в пределах 50–200 мг/л, более высокие показатели могут наблюдаться при тяжелой бактериальной инфекции или травме. Бактериальная контаминация внутренней среды, неизбежно возникающая при вялотекущей инфекции, требует повышенной выработки С-реактивного белка — фактора, необходимого для нейтрализации попавших в кровоток и межклеточное пространство фрагментов микроорганизмов. У людей, когда-либо лечившихся у стоматолога, или с нелечеными зубами, было обнаружено повышение концентрации С-РБ и фибриногена [29].

— Беременность. На поздних стадиях беременности концентрация С-РБ может повышаться [16]. В первые дни жизни у новорожденных наблюдается физиологическое увеличение концентрации С-РБ в крови. Такой физиологический процесс следует отличать от инфицированного состояния в постнатальном периоде. Высокое содержание С-РБ в пуповинной крови (более 6 мг/л) является тестом на неонатальную инфекцию. Корреляции между уровнем С-РБ в крови матери и плода не установлено [30].

— Физическая нагрузка. Физическая нагрузка может вызвать как повышение концентрации С-РБ, так и ее понижение. Чрезвычайно высокая нагрузка приводит к повышению концентрации С-РБ даже у практически здоровых людей. Однако под влиянием регулярных физических нагрузок через определенное время может наблюдаться снижение этого показателя. Показано, что даже легкая регулярная физическая нагрузка оказывает «противовоспалительное действие»: приводит к снижению концентрации С-РБ и количества лейкоцитов [31].

— Психический статус. У практически здоровых людей, имеющих психологические факторы риска, отмечена корреляция между концентрацией С-РБ в крови и показателями шкалы агрессивности [32]. У лиц с избыточной массой тела и депрессивной симптоматикой была выявлена связь между депрессивным настроением и концентрацией С-РБ, а у лиц без ожирения эта ассоциация не прослеживалась [33]. У здоровых взрослых людей уровень С-РБ в сыворотке крови обычно ниже 10 мг/л, хотя его концентрация постепенно увеличивается с возрастом. Поскольку не разработан первичный метод или референтный калибровочный материал, результаты определения концентрации С-РБ в сыворотке могут различаться при использовании разных анализаторов и тест-систем.

В настоящее время многие клиницисты продолжают считать, что клиническое значение имеет только концентрация С-РБ в сыворотке крови, превышающая соответствующие референтные значения, составляющие:

— ниже 8 мг/л — нефелометрический метод;

— 0,2–8,0 мг/л — иммунотурбидиметрический метод (вчС-РБ).

Медиана распределения концентрации С-РБ в крови здоровых доноров располагается на уровне около 0,8 мг/л; в 90% исследованных образцов концентрация С-РБ не превышала 3,0 мг/л, в 9% образцов не превышала 10 мг/л [10]. Наименьшие значения концентрации обнаруживаются среди обследованных здоровых добровольцев; цифры несколько повышаются среди доноров из-за скрытых воспалительных процессов, они также увеличиваются с возрастом.

По данным многочисленных исследований, проведенных в США и Европе, концентрация С-РБ в крови здоровых мужчин и женщин не различается [28].

В крови практически здоровых лиц С-реактивный белок обнаруживается в низких концентрациях и отражает активность циркулирующих в плазме цитокинов. С-РБ обнаруживается у здоровых людей в концентрациях менее 1 мг/л.

Концентрация С-РБ в крови относится к достаточно стабильным лабораторным показателям при определении вне периода «острофазовой» реакции.

Полагают, что различия в концентрации С-РБ в плазме крови, наблюдаемые даже в пределах референтных значений при отсутствии острой воспалительной реакции, могут быть связаны с совокупным влиянием целого ряда факторов: курением, избыточной массой тела, ожирением, возрастом, генетически детерминированным базальным уровнем синтеза, а также с наличием малосимптомной инфекции, преходящей или хронической [34].

Сезонная или циркадная вариабельность не характерна для С-РБ [35, 36]. Сезонные колебания концентрации С-РБ признаны незначительными, а выявленные изменения не удавалось объяснить сезонными инфекциями.

Было обнаружено повышение концентрации С-РБ в плазме крови у жителей одного из центральноевропейских городов, связанное с эпизодом загрязнения воздушной среды диоксидом серы [37].

Одним из методических препятствий, затрудняющих оценку концентрации С-РБ в популяции, является связь показателя с курением. О влиянии курения на уровень С-РБ известно из ранних работ, в которых, однако, этот фактор риска напрямую не связывался с прогнозом заболевания. В работе J. T. Danesh и соавт. (2004) на материале проспективного исследования популяции г. Рейкьявик было показано, что люди, заболевшие ИБС, имели достоверные различия с контрольной группой по фактору курения, исходным значениям концентрации С-РБ и ряду других показателей [38].

В то же время накоплено достаточно данных, указывающих на то, что концентрация С-РБ в сыворотке крови взрослых в пределах референтных значений дает ценную информацию о субклинически протекающих воспалительных процессах. Полагают, что концентрация С-РБ (вчС-РБ) должна рассматриваться наряду с уровнем общего холестерина и холестерина ЛПВП.

Референтные интервалы концентрации С-РБ в крови в зависимости от возраста и пола представлены в таблице. Концентрация С-РБ у новорожденных чрезвычайно низкая. Увеличение его уровня, вызванное инфекцией или другими воспалительными процессами, может быть обнаружено только при использовании высокочувствительных тест-систем вчС-РБ [39].

Таблица. Референтные интервалы концентрации С-РБ в крови

в зависимости от пола и возраста (мг/л) [15, 42]

По данным Колледжа американских патологов (КАП) за 2001 г., величина коэффициента вариации (CV, %) при определении концентрации С-РБ колебалась в пределах от 50 до 130% при средней концентрации С-РБ около 2 мг/л.

Критерии CLIA-88 при определении концентрации требуют, чтобы лаборатории укладывались в пределы ±90% средней группы [40].

Аналитические критерии для выявления категории риска не установлены. Полагают, что значение внутрисерийнного коэффициента вариации (CV) при определении концентрации С-РБ высокочувствительным методом не должно превышать 10% при его концентрации 0,2 мг/л [41].

Результаты проведенных популяционных исследований позволили по-новому оценить нормативные значения концентрации С-РБ при определении высокочувствительным методом и за нижнюю границу серой зоны принять концентрацию 3,0 мг/л. Таким образом, значение нормы С-РБ стало существенно ниже.

При рассмотрении степени риска возникновения сердечно-сосудистого заболевания к разряду низкого риска рекомендуется относить случаи со значением концентрации в плазме вчС-РБ менее 1,0 мг/л; среднее значение риска следует признать при концентрации в пределах 1,0–3,0 мг/л; высокий риск сердечно-сосудистых заболеваний рекомендуется связывать со значениями свыше 3,0 мг/л [43].

Определение с-реактивного белка как важный метод исследования

С-реактивный белок (СРБ) — это белковое вещество, гликопротеин, которое находится в плазме крови и относится к острофазовым показателям, указывающим на воспалительный процесс в организме. По сути, его нахождение при помощи определенных методик, в практической медицине является индикатором воспаления, некроза или травмы, так как он выявляется быстрее, чем повышение СОЭ.

Его появление в крови играет защитную роль, поскольку он обладает способностью к связыванию стрептококкового бактериального полисахарида, что является ранней реакцией организма на внедрение инфекции.

С-реактивный белок относится по своей биохимической структуре к семейству пентраксинов, для которого характерной особенностью является реакция на острые иммунологические процессы, но только СРБ считается основным компонентом, осуществляющим связь между адаптивными и врожденными звеньями иммунитета. Его задачей в организме является определение микроорганизмов и участие в их поглощении фагоцитами, во взаимодействии Т и В лимфоцитов.

Синтез данного белка, происходящий в гепатоцитах, инициируется при внедрении в организм патогенной флоры, грибка, паразитов, возникновении повреждения тканей при травме. Во время затихания остроты процесса показатели этого белка снижаются до нормальных цифр, и снова повышаются при очередном обострении. Процесс его повышения в послеоперационный период при отсутствии присоединения инфекции быстро приходит к норме и резко возрастает при нагноительных раневых процессах.

Когда необходимо определять СРБ?

Что значит с-реактивный белок, если он обнаруживается в крови? Использование в диагностических целях определение этого белка помогает выявлению следующих отклонений в организме:

  1. инфекционных процессов любого происхождения;
  2. аутоиммунных болезней;
  3. проверка состояния больного после проведения операции;
  4. динамика течения некоторых заболеваний;
  5. оценка степени риска возникновения сосудистых патологий.

Синтез этого белка производится в печени, и при условии отсутствия воспалительной реакции его норма в крови составляет 0,5 мкг/мл. От возраста человека этот показатель не зависит.

В каких случаях может повышаться с-реактивный белок?

При возникновении острой инфекции с-реактивный белок в крови повышен будет только спустя 6 часов, но уже через двое суток его концентрация может повышаться в 100 раз.

Данное вещество считается неспецифическим маркером воспалительных явлений, поскольку его значительное отклонение от нормы в сторону повышения наблюдается при любых процессах, которые происходят в организме, в том числе онкопатологии и некрозе.

Но особенно показательным является, когда с-реактивный белок повышен при бактериальных инфекционных процессах.

Это явление также может иметь место при следующих патологических состояниях:

  • острый инфаркт миокарда;
  • обострение хронических заболеваний (связанных с иммунитетом);
  • травмы, ожоги, операции;
  • патологические изменения сердечной мышцы под влиянием инфекционных процессов;
  • ревматоидный артрит;
  • острая форма панкретита, в том числе с развитием некроза поджелудочной железы;
  • онкопатология и метастазы;
  • сахарный диабет;
  • нарушение гормонального фона у женщин;
  • гипертония;
  • активное ревматическое поражение суставов.
Иногда повышение с-реактивного белка может сопровождать некоторые состояния, не связанные с патологическими отклонениями. Это — интенсивные физические нагрузки, беременность, лечение заместительными гормональными средствами.

С-реактивный белок в крови может быть снижен при использовании во время лечения нестероидных противовоспалительных препаратов, бета-блокаторов, глюкокортикоидов, статиновой терапии.

Важность определения этого показателя состоит еще и в том, что его изменение может возникать у людей с нормальными холестериновыми показателями и полным отсутствием клинических проявлений, но при этом указывать на высокую вероятность развития гипертонической болезни, инсульта или инфаркта и других заболеваний, которые приводят к внезапной смерти.

Использование препаратов, снижающих холестерин и нормализующих реологические показатели крови, а также регулярные упражнения, нормальное питание снижают количество с-реактивного белка, а значит, способствуют уменьшению вероятности развития патологии сосудов.

С какой целью используется данное исследование?

Определение в крови с-реактивного белка помогает оценить риск развития сердечной и сосудистой патологии, в совокупности с другими методами исследования. Эти данные позволяют оценить вероятность развития разнообразных осложнений у людей, которые перенесли в недавнем прошлом инфаркт или инсульт.

Некоторые специалисты используют значения показателя для оценки эффективности назначенного лечения и динамики выздоровления. Так, при назначении антибактериальной терапии, повышенные или увеличивающиеся со временем показатели этого белка, говорит о ее неэффективности и необходимости срочного пересмотра вида и способа введения препарата.

Исследуется с-реактивный белок и для дифференциального диагноза вирусной инфекции и бактериальной. При вирусном заражении его цифры повышаются незначительно или не отличаются от нормы.

Повышение этого показателя у новорожденных до 12 мг/л, говорит о развитии сепсиса, и требует принятия неотложных мер.

Во время инфаркта уже через 18−36 часов происходит повышение СРБ, затем приблизительно к 20 дню он несколько снижается, а через месяц или 40 дней становится нормальным. При рецидивах ИМ снова определяется высокий с-реактивный белок, стенокардитические приступы не провоцируют его повышение, что служит дополнительным признаком при дифференциальной диагностике.

После тяжелой травмы, ожоговом поражении тканей, септическом осложнении, СРБ может повышаться до невероятно высоких цифр — 300 г/л и более. Успешность лечения определяется его снижением до нормальных показателей на 6−10 сутки после начала терапии.

/ БХлабы / Определение СРБ

Определение концентрации С-реактивного белка в сыворотке крови иммунотурбидиметрическим методом

Принцип метода: С-реактивный белок (СРБ) сыворотки взаимодействует с моноспецифическими антителами, присутствующими в избытке в реакционной смеси с образованием преципитата, усиленного ПЭГ.

Турбидиметрическое определение концентрации СРБ основано на регистрации оптической плотности анализируемой пробы при длине волны 340 нм.

Диапазон измерения метода:мг/л.

Норма: до 10 мг/л (37С);

СРБ в сыворотке сохраняет стабильность при замораживании (-20С) в течение 6 месяцев.

Оборудование и реагенты:

Спектрофотометр с термостатированной кюветой, длина волны 340 нм, длина оптического пути 1 см; температура реакции 37С;

Автоматические пипетки на 75 мкл, 200 мкл и 1000 мкл;

Сыворотка крови негемолизированная / плазма;

СРБ-буфер (ТРИС-буфер 0,01 моль/л, содержащий 5% ПЭГ);

Антисыворотка против СРБ;

Калибровочные растворы №№ 1-5 с указанной на этикетках концентрацией СРБ;

Физиологический раствор (хлорид натрия 0,9%).

Антисыворотка разводится в 3 раза (1:2) СРБ буфером с ПЭГ (полиэтиленгликолем). Разведенная антисыворотка годна для применения при условии хранения его при температуре 2-8С в течение 30 дней.

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до температуры измерения (37С).

Добавить в кювету

3. Буфер для СРБ

Перемешать в течение 15 с. Инкубировать 10 минут при температуре 37С. Измерить оптическую плотность холостой пробы.

4. Антисыворотка против СРБ

Перемешивать содержимое пробирок в течение 15 секунд. Измерить оптическую плотность проб при длине 340 нм ровно через 5 минут после добавления антисыворотки.

Расчет концентрации СРБ проводят по нелинейной калибровочной кривой:

Оптическая плотность при 340 нм

Оптическая плотность при 340 нм

Если концентрация СРБ пробы выше самой высокой концентрации стандартного раствора СРБ(точка вне рабочей зоны калибровочного графика), анализируемую сыворотку следует развести 1:4 физиологическим раствором и повторить измерение, а полученный результат умножить на 5.

Клинико-диагностическое значение:СРБ – это2-глобулин и компонент неспецифического иммунного ответа на ранних стадиях проникновения антигена в организм. СРБ способствует удалению из крови эндогенных веществ, образующихся в результате разрушения клеток организма (полисахариды, гликопротеины, нуклеиновые кислоты, фосфатидилхолин и пр.).

СРБ относится к белкам острой фазы. При тяжелых воспалениях синтез его в печени возрастает более, чем в тысячу раз. Уровень СРБ в крови увеличивается в течение 6-10 часов в реакциях острой фазы (разрушение тканей, воспаление).

Концентрация СРБ у курильщиков может достигать 25 мг/л. После хирургического вмешательства (если нет осложнений) СРБ держится в течение 2 дней на уровне до 150 мг/л, а затем возвращается в норму.

Плохим прогностическим признаком является СРБ 200 мг/л на протяжении 10 дней и более после хирургического вмешательства. За 1-2 дня до летального исхода СРБ заметно увеличивается.

Определение концентрации СРБ используют для отличия бактериальных инфекций от вирусных. Концентрация СРБ до 50 мг/л обычно наблюдается при легких вирусных инфекциях и местных бактериальных инфекциях;мг/л – в основном при бактериальных инфекциях и в отдельных случаях при тяжелых вирусных инфекциях; 150 мг/л – при тяжелых бактериальных инфекциях.

Максимальная концентрация СРБ может доходить до 400 мг/л у новорожденных и примерно до 850 мг/л у взрослых.

C-реактивный белок, количественно (метод с нормальной чувствительностью)

Белок острой фазы, высокочувствительный и неспецифический маркер активного воспаления и повреждения тканей.

C-reactive protein (CRP), quantitative.

Мг/л (миллиграмм на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не принимать пищу в течение 12 часов перед исследованием.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

С-реактивный белок – это гликопротеин, вырабатываемый печенью и относящийся к белкам острой фазы воспаления. Под действием противовоспалительных цитокинов (интерлейкина-1, фактора некроза опухолей – альфа и в особенности интерлейкина-6) его синтез увеличивается уже через 6 часов, а концентрация в крови возрастает враз в течениечасов после начала воспаления. Наиболее высокие уровни СРБ (более 100 мг/л) наблюдаются при бактериальной инфекции. При вирусной инфекции уровень СРБ, как правило, не превышает 20 мг/л. Концентрация СРБ также повышается при некрозе тканей (в том числе при инфаркте миокарда, опухолевых некрозах).

СРБ участвует в активации комплемента (группы белков, являющихся частью иммунитета), моноцитов, стимулировании экспрессии молекул адгезии ICAM-1, VCAM-1, Е-селектина на поверхности эндотелия (они обеспечивают взаимодействие клеток), связывании и модификации липидов низкой плотности (ЛПНП), то есть способствует развитию атеросклероза.

Прогрессивное увеличение СРБ связано с активностью воспалительного процесса и степенью повреждения тканей. Причем СРБ является более чувствительным показателем активного воспаления, чем скорость оседания эритроцитов (СОЭ), однако повышается и исчезает раньше, чем изменяется СОЭ.

Повышение СРБ может предшествовать появлению лихорадки, боли и других признаков болезни. Некоторые специалисты определяют длительность антибактериальной терапии в зависимости от сроков снижения СРБ.

В неосложненном послеоперационном периоде СРБ достигает максимальных значений на третий день и в течение недели снижается до нормального уровня. Сохранение высоких значений СРБ и отсутствие его постепенного снижения указывает на присоединение инфекции.

В отдельности определение СРБ не позволяет уточнить диагноз и характер заболевания, но с высокой чувствительностью дает возможность установить факт активного воспаления или повреждения ткани. Результаты анализа должны интерпретироваться с учетом показателей других лабораторных тестов, клинической картины болезни и заключений инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики различных воспалительных заболеваний, обусловленных инфекцией или аутоиммунными процессами, и для оценки эффективности их лечения.
  • Для дифференциальной диагностики бактериальной и вирусной инфекции (при вирусных уровень СРБ повышен незначительно).
  • Для определения активности воспалительного, аутоиммунного процесса.
  • Для диагностики послеоперационных инфекционных осложнений.
  • Для диагностики скрытых инфекций.
  • Для оценки необходимости антибактериальной терапии и ее длительности.
  • Чтобы дать прогноз течения и возможного летального исхода при некоторых острых состояниях (например, панкреонекрозе).
  • Чтобы оценить прогрессирование опухоли и рецидива заболевания (при совместном определении с другими онкомаркерами).
  • Для дифференциальной диагностики воспалительных заболеваний кишечника: болезни Крона (высокий СРБ) и неспецифического язвенного колита (низкий СРБ).
  • Для дифференциальной диагностики ревматоидного артрита (высокий СРБ) и неосложненной волчанки (низкий СРБ).
  • Для мониторинга активности хронических заболеваний.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на инфекционное заболевание у лихорадящих больных, при нейтропении, подозрении на менингит у детей, на сепсис у новорожденных.
  • При обследовании пациентов с аутоиммунной патологией (артритом, васкулитом).
  • При проведении антибактериальной терапии.
  • В послеоперационном периоде (для раннего выявления инфекционных осложнений и оценки эффективности антибактериальной терапии) – при развитии осложнений уровень СРБ будет оставаться повышенным или увеличиваться в течение 4-5 дней после операции.
  • При проведении терапии хронических воспалительных заболеваний.
  • При трансплантации органов (почек, сердца).
  • При профилактическом обследовании и наблюдении за пациентами с хроническими заболеваниями, новообразованиями.

Референсные значения:мг/л.

Если уровень СРБ превышает 10 мг/л, проводят дополнительное обследование, чтобы выявить инфекционные и воспалительные заболевания. СРБ больше 10 мг/л свидетельствует об остром воспалении, хроническом заболевании, травме и т. д. При вирусных инфекциях, метастазах, вялотекущих хронических и некоторых системных ревматических заболеваниях концентрация СРБ составляетмг/л, при бактериальных инфекциях, обострении некоторых хронических воспалительных заболеваний (например, ревматоидного артрита) и повреждении тканей (хирургическая операция, острый инфаркт миокарда) –мг/л (иногда 200 мг/л), при тяжелых генерализованных инфекциях, ожогах и сепсисе – до 300 мг/л и более.

Причины повышения уровня С-реактивного белка:

  • острые вирусные и бактериальные инфекции;
  • аутоиммунные заболевания (ревматоидный артрит, системный васкулит, ревматический полиартрит, анкилозирующий спондилоартрит);
  • обострение хронических воспалительных (инфекционных и аутоиммунных) заболеваний;
  • очаговые инфекции (например, хронический тонзиллит);
  • повреждение тканей (травма, хирургическое вмешательство, острый инфаркт миокарда, острое нарушение мозгового кровообращения, острый панкреатит, панкреонекроз);
  • воспалительные заболевания органов малого таза;
  • инфекционный эндокардит;
  • злокачественные новообразования и метастазы;
  • миеломная болезнь;
  • туберкулез;
  • ожоги;
  • сепсис;
  • перитонит;
  • артериальная гипертензия, атеросклероз, сахарный диабет, избыточная масса тела (небольшое увеличение);
  • нарушение гормонального фона (повышение содержания эстрогенов и прогестерона).

Что может влиять на результат?

Факторы, повышающие уровень СРБ:

  • беременность,
  • интенсивные физические нагрузки;
  • прием пероральных контрацептивов, заместительная гормональная терапия.

Факторы, снижающие уровень СРБ:

  • прием нестероидных противовоспалительных препаратов (аспирина, ибупрофена), кортикостероидов, статинов, бета-блокаторов.
  • Данный анализ не используется для определения риска развития сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений. Активность воспаления сосудистой стенки и атеросклероза оценивается благодаря высокочувствительному тесту на СРБ.
  • При выявлении повышенного СРБ необходимо дополнительное обследование для уточнения локализации и характера патологического процесса.

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, анестезиолог-реаниматолог, педиатр, хирург, онколог, кардиолог, ревматолог, гастроэнтеролог, гематолог, акушер-гинеколог.

СРБ в крови что это такое и его возможности в диагностике

С-реактивный белок в анализах крови врач часто смотрит вместе с СОЭ, чтобы определить возможность наличия в организме воспалительного процесса в острой фазе. Анализ наличия в крови С-реактивного белка стали применять еще в 30-х годах ХХ века. Отличительной особенностью этого белка является быстрая реакция на начало заболевания. Уровень повышается уже в течение 6-ти – 12-ти часов после начала болезни, когда еще никаких симптомов нет.

“Золотой маркер” – так называют C-реактивный белок клиницисты за его способность к выявлению острой фазы воспалительного процесса. К радости тех же клиницистов результаты анализов теперь вместо суток в связи с внедрением современных методик можно получить через полчаса (в каких-то случаях через час). При такой скорости обработки анализа крови кроме диагностики заболевания можно и мониторить процесс лечения.

Что такое С-реактивный белок

Синтез С-реактивного белка активизируется при развитии воспалительного процесса любой локализации в организме человека. Основным механизмом действия указанного маркера является реакция преципитации с С-полисахаридом пневмококков и других бактерий, грибов уже на самых ранних стадиях патологического состояния.

Основными характеристиками СРБ являются:

  • Более высокая чувствительность на воспаление в отличие от СОЭ – скорости оседания эритроцитов.
  • Реагирует уже через 4 – 6 часов после воздействия возбудителя или развития патологического состояния (имеются в виду состояния неинфекционного генеза).
  • Изменение показателей можно диагностировать уже в течение первых суток заболевания.

В современной медицинской литературе представлены данные о том, что существует две разновидности С-реактивного белка:

  • Нативный (пентамерный, состоит из 5 субъединиц) белок – этот маркер, который известен всем, как непосредственно СРБ.
  • Новый белок (мономерный, состоит из 1 субъединицы) – отличается более быстрой подвижностью, снижением времени агрегации тромбоцитов, способностью активировать и синтезировать биологические вещества.

Антигены мономерного протеина находятся на поверхности лимфоцитарных и плазматических клеток, клеток-киллеров. При остром развитии воспаления обычный С- реактивный белок трансформируется в мономерный, который уже и оказывает все присущие СРБ эффекты.

Функции С-реактивного белка

Так как указанный маркер входит в комплекс основных острофазовых показателей воспаления, для него характерны следующие функции:

  • Самая главная обязанность СРБ – это участие в осуществлении гуморального врожденного иммунитета. Такой эффект реализуется посредством сложных последовательных иммунных реакций, что обеспечивает крепкую связь врожденного и приобретенного иммунитета:
    • Уничтожение оболочек здоровых клеток возбудителем, прочим патологическим фактором. Это приводит к гибели клеток. В такие очаги мигрируют лейкоциты, фагоциты.

Как проводится анализ

Необходимо указать, что исследование крови с целью определения СРБ не является обязательным для всех. Такой тест проводят по некоторым показаниям.

Показания для проведения анализа

Как и для каждого маркера, для определения CRP характерны свои состояния, при которых необходимо проведение исследования:

  • Оценка риска возникновения патологии сердечно – сосудистой системы у здоровых и больных людей.
  • При наличии у пациентов ишемической болезни сердца, артериальной гипертензии оценивается прогноз таких осложнений, как внезапная сердечная смерть, острый коронарный синдром, инфаркт миокард, инсульта.
  • Оценка обширности зоны ишемии и некроза при инфаркте.
  • Анализ эффективности лечения.
  • Профилактика осложнений.
  • Диагностика острых инфекций.
  • Контроль развития реакции «трансплантат против хозяина».
  • Диагностика новообразований.
  • Определение осложнений в послеоперационном периоде.
  • Наблюдение за динамикой диффузных заболеваний соединительной ткани и оценка их лечения.
  • Дифференциальная диагностика между вирусным и бактериальным поражением.
  • При жалобах на длительную боль в суставах, повышенную температуру тела, болевом синдроме в спине, мышцах, а также при увеличении лимфатических узлов.

При оценке полученных данных необходимо отталкиваться от значений нормы для разных категорий лиц.

С-реактивный белок норма

У здорового взрослого человека C-реактивный белок в крови при биохимическом анализе крови не обнаруживается или допускается его показатель не более 5 – 10 мг/л (по различным данным).

Для правильной интерпретации полученных данных необходимо учитывать следующие факторы:

  • Возраст.
  • Физиологическое состояние человека.
  • Наличие заболеваний.
  • Взрослые мужчины и женщины – не более 10 мг/л.
  • Беременные женщины – не более 20 мг/л.
  • Новорожденные – показатель не должен превышать 15 мг/л
  • Дети – до 10 мг/л.
  • Курильщики – концентрация до 20 мг/л.
  • Спортсмены, особенно после выраженной физической нагрузки – не более 60 мг/л.

Помимо учета нормальных цифр теста, необходимо принимать во внимание некоторые причины, способные повлиять на данные анализа.

Факторы, влияющие на уровень СРБ

  • Применение противозачаточных средства.
  • Лечение гормональными лекарственными средствами.
  • Беременность.
  • Интенсивные физические нагрузки.
  • Возраст.

Так как С-реактивный белок – показатель острой фазы воспаления и патологических расстройств в организме, необходимо выявить источник, вызвавший изменение уровней теста.

Причины повышения

Факторов, которые приводят к увеличению острофазовых показателей в крови достаточно много. Чем острее выраженность заболевания, тем выше будут показатели, отражающие тяжесть состояния пациента.

Наиболее частыми причинами увеличения показателя СРБ являются:

  • Острые инфекционные поражения бактериального, вирусного, грибкового генеза. Разница между данными будет зависеть от этиологического фактора – при бактериальных инфекциях цифры реактивного белка будут крайне высокими, а при вирусной патологии – незначительно повышены.
  • Сепсис.
  • Ревматоидный артрит, васкулиты, болезнь Крона и прочие аутоиммунные заболевания.
  • Инфаркт миокарда.
  • Хирургические операции.
  • Трансплантация органов и тканей.
  • Травмы.
  • Ожоги.
  • Злокачественные новообразования всех локализаций.
  • Острый панкреатит, пиелонефрит, пневмония, проктит, некроз поджелудочной железы и все состояния внутренних органов, при которых наблюдается острое воспаление.
  • Обострения хронических заболеваний.
  • Болезни желудочно-кишечного тракта.
  • Сахарный диабет.
  • Артериальная гипертензия, атеросклероз, ИБС.
  • Ожирение.
  • Гормональные дисфункции.
  • Хронический алкоголизм.

При каждом из таких состояний в различной степени происходит реакция организма в виде повышения уровня С-реактивного белка в крови в различной мере. Тяжесть состояния при этом необходимо оценивать исходя из общепринятых параметров оценки.

Критерии оценки

  • Вялотекущие инфекции, ревматические заболевания, которые характеризуются минимальным наличием симптомов, как правило, не дают увеличение СРБ при проведении теста более 30 мг/л.

Важность определения СРБ при патологии сердечно-сосудистой системы

Исследование показателей СРБ в кардиологии определяет:

  • Риск развития тромбоза с/без развития инсульта, инфаркта.
  • Прогноз после случившегося инфаркта миокарда.
  • Риск развития фатальных и нефатальных ишемии и некроза сердечной мышцы.
  • Маркер повторного стеноза после оперативного вмешательства по причине устранения стеноза.

Даже у здорового человека с предрасположенностью к заболеваниям сердца и сосудов с помощью определения реактивного протеина можно сделать прогноз дальнейшего развития или отсутствия такового:

  • Низкий риск развития – показатели менее 1 мг/л.
  • Средний – концентрация от 1 до 3 мг/л.
  • Высокий – от 3 мг/л.

Уже при развившемся инфаркте ксуткам заболевания уровни С-реактивного белка понижаются. К 40 – 45 суткам при отсутствии осложнений показатели нормализуются. А в случае длительного и стойкого повышения такое явление считается крайне неблагоприятным.

С-реактивный белок в крови: норма в анализах, почему повышается, роль в диагностике

С-реактивный белок (СРБ, C-Reactives protein – CRP) – довольно старый лабораторный тест, который, как и СОЭ, показывает, что в организме идет острый воспалительный процесс. Обычными методами СРБ обнаружить не удается, в биохимическом анализе крови повышение его концентрации проявляется увеличением α-глобулинов, которые он, наряду с другими острофазными протеинами, представляет.

Главной причиной появления и возрастания концентрации С-реактивного протеина являются острые воспалительные заболевания, которые дают многократное (до 100 раз) увеличение этого острофазного белка уже черезчасов от начала процесса.

СРБ в крови и отдельная молекула белка

Помимо высокой чувствительности СРБ к различным, происходящим в организме событиям, изменениям в лучшую или худшую сторону, он хорошо реагирует на терапевтические мероприятия, поэтому может быть использован для контроля над течением и лечением различных патологических состояний, сопровождаемых повышением данного показателя. Все это объясняет высокий интерес клиницистов, которыми данный острофазный белок был назван «золотым маркером» и обозначен, как центральный компонент острой фазы воспалительного процесса. Вместе с тем, обнаружение СРБ в крови пациента еще в конце прошлого века было сопряжено с определенными трудностями.

Проблемы прошлого века

Обнаружение С-реактивного белка почти до конца прошлого века было проблемным, ввиду того, что СРБ не поддавался традиционным лабораторным исследованиям, составляющим биохимический анализ крови. Полуколичественный метод кольцепреципитации в капиллярах с использованием антисыворотки был скорее качественным, поскольку выражался в «плюсах» в зависимости от количества (в миллиметрах) выпавших хлопьев (преципитатов). Самым большим недостатком анализа было время, потраченное на получение результатов – ответ был готов только через сутки и мог иметь следующие значения:

  • Нет осадка – результат отрицательный;
  • 1мм осадка — + (реакция слабоположительная);
  • 2 мм — ++ (положительная реакция);
  • 3мм — +++ (выраженно положительная);
  • 4 мм — ++++ (резко положительная реакция).

Безусловно, ждать такого важного анализа 24 часа было крайне неудобно, ведь за сутки многое могло измениться в состоянии больного и нередко отнюдь не в лучшую сторону, поэтому врачам чаще всего приходилось надеяться в первую очередь на СОЭ. Скорость оседания эритроцитов, которая тоже является неспецифическим индикатором воспаления, в отличие от СРБ, определялась за час.

В настоящее время описываемый лабораторный критерий ценится выше и СОЭ, и лейкоцитов – показателей общего анализа крови. С-реактивный протеин, появляющийся раньше повышения СОЭ, исчезает, как только затихнет процесс или лечение окажет свое влияние (через 1 – 1,5 недели), в то время как скорость оседания эритроцитов будет находиться выше нормальных значений еще до месяца.

Как определяют СРБ в лаборатории и что нужно кардиологам?

С-реактивный белок относится к очень важным диагностическим критериям, поэтому разработка новых методов его определения никогда не уходила на задний план и в настоящее время тесты, позволяющие обнаружить СРБ, перестали быть проблемой.

Не входящий в биохимический анализ крови С-реактивный белок легко определить, имея наборы для латекс-теста, в основе которых лежит латексная агглютинация (качественный и полуколичественный анализ). Благодаря этой методике, не пройдет и полчаса, как ответ, который так важен врачу, будет готов. Такое быстрое исследование хорошо зарекомендовало себя, как самый начальный этап диагностического поиска острых состояний, методика хорошо коррелирует с турбидиметрическими и нефелометрическими методами, поэтому подходит не только для скрининга, но и для окончательного решения в отношении диагностики и выбора тактики лечения.

Концентрацию данного лабораторного показателя узнают с помощью высокочувствительной турбидиметрии с латексным усилением, иммуноферментного анализа (ИФА) и радиоиммунологических методов.

Следует отметить, что очень часто описываемый критерий применяют для диагностики патологических состояний сердечно-сосудистой системы, где СРБ помогает выявить возможные риски осложнений, следить за течением процесса и за эффективностью принимаемых мероприятий. Известно, что СРБ и сам участвует в формировании атеросклероза даже при сравнительно невысоких значениях показателя (к вопросу, как это происходит, мы еще вернемся). Для решения подобных задач традиционные методы лабораторной диагностики кардиологов не удовлетворяют, поэтому в данных случаях используется высокоточное измерение hsCRP в сочетании с липидным спектром.

Кроме этого, данный анализ применяют, чтобы рассчитать риск развития сердечно-сосудистой патологии при сахарном диабете, заболеваниях выделительной системы, неблагоприятном течении беременности.

Норма СРБ? Одна на всех, но…

В крови здорового человека уровень СРБ очень невысок или данный белок вовсе отсутствует (при лабораторном исследовании, но это не значит, что его нет совсем – просто тест не улавливает мизерные количества).

За норму приняты следующие границы значений, причем, они не зависят от возраста и половой принадлежности: у детей, мужчин и женщин она одна – до 5 мг/л, исключение составляют лишь новорожденные дети – им позволено иметь до 15 мг/л этого острофазного протеина (о чем свидетельствует справочная литература). Однако ситуация меняется при подозрении на сепсис: неонатологи начинают срочные меры (антибиотикотерапия) при повышении СРБ у ребенка до 12 мг/л, при этом, врачи отмечают, что бактериальная инфекция в первые дни жизни может и не давать резкого повышения этого белка.

Назначается лабораторное исследование, выявляющее C-Reactives protein, в случае многих патологических состояний, сопровождаемых воспалением причиной которых стала инфекция или разрушение нормальной структуры (деструкция) тканей:

  • Острый период различных воспалительных процессов;
  • Активирование хронических заболеваний воспалительного характера;
  • Инфекции вирусного и бактериального происхождения;
  • Аллергические реакции организма;
  • Активная фаза ревматизма;
  • Инфаркт миокарда.

Для того, чтобы лучше представить диагностическую ценность данного анализа, необходимо понять, что собой представляют собой белки острой фазы, узнать о причинах их появления в крови пациента, более детально рассмотреть механизм иммунологических реакций при остром воспалительном процессе. Что мы и попытаемся сделать в следующем разделе.

Как и почему появляется С-реактивный протеин при воспалении?

СРБ и его связывание с клеточной мембраной в случае её повреждения (например, при воспалении)

СРБ, участвуя в острых иммунологических процессах, способствуют фагоцитозу на первом этапе ответной реакции организма (клеточный иммунитет) и являются одним их ключевых компонентов второй фазы иммунного ответа – гуморального иммунитета. Это происходит следующим образом:

  1. Разрушение клеточных оболочек возбудителем или другим фактором приводит к деструкции самих клеток, что для организма не остается незамеченным. Сигналы, посланные от возбудителя или от лейкоцитов, находящихся рядом с местом «аварии», привлекает в зону поражения фагоцитирующие элементы, способные поглощать и переваривать чужеродные для организма частицы (бактерии и остатки мертвых клеток).
  2. Местный ответ на удаление погибших клеток вызывает воспалительную реакцию. На место происшествия из периферической крови устремляются нейтрофилы, обладающие самой высокой фагоцитарной способностью. Чуть попозже туда прибывают моноциты (макрофаги), чтобы помочь с образованием медиаторов, стимулирующих продукцию белков острой фазы (СРБ), если в этом будет необходимость, и выполнить функцию своеобразных «дворников», когда нужно «подчистить» очаг воспаления (макрофаги способны поглощать частицы, превосходящие себя по размерам).
  3. Для осуществления процессов поглощения и переваривания чужеродных факторов в очаге воспаления происходит стимуляция продукции собственных протеинов (С-реактивного белка и других белков острой фазы), способных противостоять невидимому врагу, усиливая своим появлением фагоцитарную активность клеток лейкоцитарного звена и привлекая новые компоненты иммунитета для борьбы с инфекцией. Роль индукторов этой стимуляции берут на себя вещества (медиаторы), синтезируемые «готовыми к бою» находящимися в очаге и прибывающими в зону воспаления макрофагами. Кроме этого, в образовании СРБ участвуют и другие регуляторы синтеза острофазных белков (цитокины, глюкокортикоиды, анафилотоксины, медиаторы, образованные активированными лимфоцитами). Продуцируется СРБ преимущественно клетками печени (гепатоцитами).
  4. Макрофаги, после выполнения основных задач в зоне воспаления, уходя, захватывают чужеродный антиген и направляются в лимфоузлы, чтобы там представить его (презентация антигена) иммунокомпетентным клеткам – Т-лимфоцитам (хелперам), которые распознают его и дадут команду В-клеткам приступить к антителообразованию (гуморальный иммунитет). В присутствии С-реактивного белка заметно увеличивается активность лимфоцитов, обладающих цитотоксическими способностями. СРБ от начала процесса и на всех его этапах и сам активно участвует в распознавании и презентации антигена, что возможно благодаря другим факторам иммунитета, с которыми он находится в тесной взаимосвязи.
  5. Не пройдет и полдня (приблизительно до 12 часов) от начала разрушения клеток, как концентрация сывороточного С-реактивного протеина возрастет во много раз. Это дает основание считать его одним из двух главных белков острой фазы (второй – сывороточный амилоидный протеин А), которые несут основные противовоспалительные и защитные функции (иные острофазные белки при воспалении выполняют преимущественно регуляторные задачи).

Таким образом, повышенный уровень СРБ свидетельствует о начале инфекционного процесса на самом раннем этапе его развития, а применение антибактериальных и противовоспалительных препаратов, напротив, снижает его концентрацию, что позволяет придать этому лабораторному показателю особую диагностическую значимость, называя «золотым маркером» клинической лабораторной диагностики.

Причина и следствие

За качества, обеспечивающие исполнение многочисленных функций, С-реактивный протеин исследователем-острословом был прозван «двуликим Янусом». Прозвище оказалось удачным для белка, выполняющего массу задач в организме. Его многофункциональность заключается в тех ролях, которые он играет при развитии воспалительных, аутоиммунных, некротических процессов: в умении связываться со многими лигандами, распознавать чужеродные агенты, своевременно привлекать к уничтожению «врага» защитные силы организма.

Наверное, каждый из нас когда-нибудь переживал острую фазу воспалительного заболевания, где центральное место отведено С-реактивному белку. Даже не зная всех механизмов образования СРБ, можно самостоятельно заподозрить, что в процессе участвует весь организм: сердце, сосуды, голова, эндокринная система (повышается температура, «ломит» тело, болит голова, учащается сердцебиение). Действительно, сама лихорадка уже свидетельствует, что процесс пошел, и в организме начались изменения метаболических процессов в различных органах и целых системах, обусловленные повышением концентрации острофазных маркеров, активацией системы иммунитета, снижением проницаемости сосудистых стенок. Эти события не видимы глазом, но определяемы с помощью лабораторных показателей (СРБ, СОЭ).

С-реактивный белок будет повышен уже в первые 6-8 часов от начала болезни, причем его значения будут соответствовать тяжести процесса (чем тяжелее течение, тем выше СРБ). Такие свойства CRP позволяют его использовать в качестве индикатора при дебюте или протекании различных воспалительных и некротических процессов, которые и будут причинами повышения показателя:

  1. Бактериальные и вирусные инфекции;
  2. Острая сердечная патология (инфаркт миокарда);
  3. Онкологические заболевания (в том числе, метастазирование опухолей);
  4. Хронические воспалительные процессы, локализованные в различных органах;
  5. Оперативные вмешательства (нарушение целостности тканей);
  6. Травмы и ожоги;
  7. Осложнения послеоперационного периода;
  8. Гинекологическая патология;
  9. Генерализованная инфекция, сепсис.

Повышенным СРБ часто бывает при:

Следует отметить, что значения показателя для разных групп заболеваний могут существенно отличаться, например:

  1. Вирусная инфекция, метастазы опухолей, ревматические болезни, протекающие вяло, без выраженной симптоматики, дают умеренное повышение концентрации CRP – до 30 мг/л;
  2. Обострение хронических воспалительных процессов, инфекции, вызванные бактериальной флорой, оперативные вмешательства, острый инфаркт миокарда могут повысить уровень острофазного маркера в 20, а то и в 40 раз, но в большинстве случаев от таких состояний можно ожидать рост концентрации до 40 – 100 мг/л;
  3. Тяжелые генерализованные инфекции, обширные ожоги, септические состояния способны очень неприятно удивлять клиницистов цифрами, обозначающими содержание С-реактивного белка, они могут достигать запредельных значений (300мг/л и гораздо выше).

И еще: не имея желания кого-то напугать, хочется затронуть очень важный вопрос в отношении повышенного количества СРБ у здоровых людей. Высокая концентрация С-реактивного протеина при внешнем полном благополучии и отсутствии признаков хоть какой-то патологии наводит на мысль о развитии онкологического процесса. Такие пациенты должны пройти тщательное обследование!

Обратная сторона медали

Вообще, по своим свойствам и способностям СРБ очень напоминает иммуноглобулины: он «умеет различать «свое-чужое», связываться с компонентами бактериальной клетки, с лигандами системы комплемента, ядерными антигенами. Но на сегодняшний день известны два типа С-реактивного белка и чем они отличаются друг от друга, добавляя тем самым новые функции C-Reactives protein, может показать наглядный пример:

  • Нативный (пентамерный) белок острой фазы, открытый в 1930 году и состоящий из 5 связанных между собой кольцевых субъединиц, расположенных на одной поверхности (поэтому его назвали пентамерным и отнесли к семейству пентраксинов) – это тот СРБ, который мы знаем и о котором рассуждаем. Пентраксины состоят из двух участков, отвечающих за определенные задачи: один – распознает «чужака», например, антиген бактериальной клетки, другой — «зовет на помощь» те субстанции, которые имеют возможности уничтожить «врага», поскольку сам СРБ подобными способностями не обладает;
  • «Новый» (неоСРБ), представленный свободными мономерами (мономерный СРБ, который назван мСРБ), обладающий другими, не характерными для нативного варианта, свойствами (быстрая подвижность, низкая растворимость, ускорение агрегации тромбоцитов, стимуляция продукции и синтез биологически активных веществ). Новая форма С-реактивного белка была открыта в 1983 году.

При детальном изучения нового острофазного белка выяснилось, что его антигены присутствуют на поверхности лимфоцитов, циркулирующих в крови, клеток-киллеров и плазматических клеток, а получается он (мСРБ) от перехода пентамерного протеина в мономерный белок при бурном развитии воспалительного процесса. Однако самое главное, что узнали ученые о мономерном варианте заключается в том, что «новый» С-реактивный протеин способствует формированию сердечно-сосудистой патологии. Как это происходит?

Повышенный СРБ участвует в формировании атеросклероза

Ответ организма на воспалительный процесс резко увеличивает концентрацию СРБ, что сопровождается усиленным переходом пентамерной формы С-реактивного протеина в мономерную — это необходимо для индукции обратного (противовоспалительного) процесса. Повышенный уровень мСРБ приводит к продукции медиаторов воспаления (цитокинов), налипанию нейтрофилов на сосудистую стенку, активации эндотелия с выделением факторов, вызывающих спазм, образованию микротромбов и нарушению кровообращения в микроциркуляторном русле, то есть, формированию атеросклероза артериальных сосудов.

Это следует учитывать при скрытом течении хронических заболеваний с незначительным повышением уровня СРБ (домг/л). Человек продолжает считать себя здоровым, а процесс медленно развивается, что может привести сначала к атеросклерозу, а потом к инфаркту миокарда (первому) или другим тромбоэмболическим осложнениям. Можно себе представить, насколько рискует пациент, имея в анализе крови С-реактивный белок в повышенных концентрациях, преобладание фракции липопротеинов низкой плотности в липидном спектре и высокие значения коэффициента атерогенности (КА)?

Чтобы не допустить печальных последствий, пациенты, входящие в группу риска, должны не забывать сдавать необходимые для себя анализы, причем, СРБ у них измеряется высокочувствительными методами, а ЛПНП исследуется в липидном спектре с расчетом коэффициента атерогенности.

Главные задачи СРБ определяет его «многоликость»

Возможно, читатель не получил ответы на все свои вопросы в отношении центрального компонента острой фазы – С реактивного белка. Посчитав, что сложные иммунологические реакции стимуляции, регулирования синтеза СРБ и его взаимодействие с другими факторами иммунитета вряд ли могут быть интересны человеку, далекому от этих научных и непонятных терминов, в статье был сделан упор на свойства и важную роль данного острофазного протеина в практической медицине.

А значимость СРБ действительно трудно переоценить: он незаменим при осуществлении контроля над течением болезни и эффективностью терапевтических мер, а также при диагностике острых воспалительных состояний и некротических процессов, где он проявляет высокую специфичность. Вместе с тем, ему, как и другим острофазным белкам, свойственна и неспецифичность (разнообразие причин повышения СРБ, многофункциональность С-реактивного протеина за счет способности связываться со многими лигандами), которая не позволяет с помощью этого показателя дифференцировать различные состояния и установить точный диагноз (не зря же его назвали «двуликим Янусом»?). А тут еще, оказывается, он принимает участие в формировании атеросклероза…

С другой стороны — в диагностическом поиске участвуют многие лабораторные исследования и инструментальные методы диагностики, которые помогут СРБ, и болезнь будет установлена.

profmasterdoor.ru

определение с реактивного белка в сыворотке крови

C-реактивный белок, количественно (метод с нормальной чувствительностью)

Белок острой фазы, высокочувствительный и неспецифический маркер активного воспаления и повреждения тканей.

Синонимы русские

Синонимы английские

C-reactive protein (CRP), quantitative.

Метод исследования

Единицы измерения

Мг/л (миллиграмм на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не принимать пищу в течение 12 часов перед исследованием.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

С-реактивный белок – это гликопротеин, вырабатываемый печенью и относящийся к белкам острой фазы воспаления. Под действием противовоспалительных цитокинов (интерлейкина-1, фактора некроза опухолей – альфа и в особенности интерлейкина-6) его синтез увеличивается уже через 6 часов, а концентрация в крови возрастает в 10-100 раз в течение 24-48 часов после начала воспаления. Наиболее высокие уровни СРБ (более 100 мг/л) наблюдаются при бактериальной инфекции. При вирусной инфекции уровень СРБ, как правило, не превышает 20 мг/л. Концентрация СРБ также повышается при некрозе тканей (в том числе при инфаркте миокарда, опухолевых некрозах).

СРБ участвует в активации комплемента (группы белков, являющихся частью иммунитета), моноцитов, стимулировании экспрессии молекул адгезии ICAM-1, VCAM-1, Е-селектина на поверхности эндотелия (они обеспечивают взаимодействие клеток), связывании и модификации липидов низкой плотности (ЛПНП), то есть способствует развитию атеросклероза.

Прогрессивное увеличение СРБ связано с активностью воспалительного процесса и степенью повреждения тканей. Причем СРБ является более чувствительным показателем активного воспаления, чем скорость оседания эритроцитов (СОЭ), однако повышается и исчезает раньше, чем изменяется СОЭ.

Повышение СРБ может предшествовать появлению лихорадки, боли и других признаков болезни. Некоторые специалисты определяют длительность антибактериальной терапии в зависимости от сроков снижения СРБ.

В неосложненном послеоперационном периоде СРБ достигает максимальных значений на третий день и в течение недели снижается до нормального уровня. Сохранение высоких значений СРБ и отсутствие его постепенного снижения указывает на присоединение инфекции.

В отдельности определение СРБ не позволяет уточнить диагноз и характер заболевания, но с высокой чувствительностью дает возможность установить факт активного воспаления или повреждения ткани. Результаты анализа должны интерпретироваться с учетом показателей других лабораторных тестов, клинической картины болезни и заключений инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики различных воспалительных заболеваний, обусловленных инфекцией или аутоиммунными процессами, и для оценки эффективности их лечения.
  • Для дифференциальной диагностики бактериальной и вирусной инфекции (при вирусных уровень СРБ повышен незначительно).
  • Для определения активности воспалительного, аутоиммунного процесса.
  • Для диагностики послеоперационных инфекционных осложнений.
  • Для диагностики скрытых инфекций.
  • Для оценки необходимости антибактериальной терапии и ее длительности.
  • Чтобы дать прогноз течения и возможного летального исхода при некоторых острых состояниях (например, панкреонекрозе).
  • Чтобы оценить прогрессирование опухоли и рецидива заболевания (при совместном определении с другими онкомаркерами).
  • Для дифференциальной диагностики воспалительных заболеваний кишечника: болезни Крона (высокий СРБ) и неспецифического язвенного колита (низкий СРБ).
  • Для дифференциальной диагностики ревматоидного артрита (высокий СРБ) и неосложненной волчанки (низкий СРБ).
  • Для мониторинга активности хронических заболеваний.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на инфекционное заболевание у лихорадящих больных, при нейтропении, подозрении на менингит у детей, на сепсис у новорожденных.
  • При обследовании пациентов с аутоиммунной патологией (артритом, васкулитом).
  • При проведении антибактериальной терапии.
  • В послеоперационном периоде (для раннего выявления инфекционных осложнений и оценки эффективности антибактериальной терапии) – при развитии осложнений уровень СРБ будет оставаться повышенным или увеличиваться в течение 4-5 дней после операции.
  • При проведении терапии хронических воспалительных заболеваний.
  • При трансплантации органов (почек, сердца).
  • При профилактическом обследовании и наблюдении за пациентами с хроническими заболеваниями, новообразованиями.

Что означают результаты?

Референсные значения: 0 — 5 мг/л.

Если уровень СРБ превышает 10 мг/л, проводят дополнительное обследование, чтобы выявить инфекционные и воспалительные заболевания. СРБ больше 10 мг/л свидетельствует об остром воспалении, хроническом заболевании, травме и т. д. При вирусных инфекциях, метастазах, вялотекущих хронических и некоторых системных ревматических заболеваниях концентрация СРБ составляет 10-30 мг/л, при бактериальных инфекциях, обострении некоторых хронических воспалительных заболеваний (например, ревматоидного артрита) и повреждении тканей (хирургическая операция, острый инфаркт миокарда) – 40-100 мг/л (иногда 200 мг/л), при тяжелых генерализованных инфекциях, ожогах и сепсисе – до 300 мг/л и более.

Причины повышения уровня С-реактивного белка:

  • острые вирусные и бактериальные инфекции;
  • аутоиммунные заболевания (ревматоидный артрит, системный васкулит, ревматический полиартрит, анкилозирующий спондилоартрит);
  • обострение хронических воспалительных (инфекционных и аутоиммунных) заболеваний;
  • очаговые инфекции (например, хронический тонзиллит);
  • повреждение тканей (травма, хирургическое вмешательство, острый инфаркт миокарда, острое нарушение мозгового кровообращения, острый панкреатит, панкреонекроз);
  • воспалительные заболевания органов малого таза;
  • инфекционный эндокардит;
  • злокачественные новообразования и метастазы;
  • миеломная болезнь;
  • туберкулез;
  • ожоги;
  • сепсис;
  • перитонит;
  • артериальная гипертензия, атеросклероз, сахарный диабет, избыточная масса тела (небольшое увеличение);
  • нарушение гормонального фона (повышение содержания эстрогенов и прогестерона).

Что может влиять на результат?

Факторы, повышающие уровень СРБ:

  • беременность,
  • интенсивные физические нагрузки;
  • прием пероральных контрацептивов, заместительная гормональная терапия.

Факторы, снижающие уровень СРБ:

  • прием нестероидных противовоспалительных препаратов (аспирина, ибупрофена), кортикостероидов, статинов, бета-блокаторов.

Важные замечания

  • Данный анализ не используется для определения риска развития сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений. Активность воспаления сосудистой стенки и атеросклероза оценивается благодаря высокочувствительному тесту на СРБ.
  • При выявлении повышенного СРБ необходимо дополнительное обследование для уточнения локализации и характера патологического процесса.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, анестезиолог-реаниматолог, педиатр, хирург, онколог, кардиолог, ревматолог, гастроэнтеролог, гематолог, акушер-гинеколог.

Источник: helix.ru

Определение СРБ. Определение концентрации с-реактивного белка в сыворотке крови иммунотурбидиметрическим методом Принцип метода

Определение концентрации С-реактивного белка в сыворотке крови иммунотурбидиметрическим методомПринцип метода: С-реактивный белок (СРБ) сыворотки взаимодействует с моноспецифическими антителами, присутствующими в избытке в реакционной смеси с образованием преципитата, усиленного ПЭГ.

Турбидиметрическое определение концентрации СРБ основано на регистрации оптической плотности анализируемой пробы при длине волны 340 нм.Диапазон измерения метода: 8-150 мг/л.

Норма: до 10 мг/л (37С);СРБ в сыворотке сохраняет стабильность при замораживании (-20С) в течение 6 месяцев.

Оборудование и реагенты:

  1. Спектрофотометр с термостатированной кюветой, длина волны 340 нм, длина оптического пути 1 см; температура реакции 37С;
  2. Секундомер;
  3. Автоматические пипетки на 75 мкл, 200 мкл и 1000 мкл;
  4. Сыворотка крови негемолизированная / плазма;
  5. СРБ-буфер (ТРИС-буфер 0,01 моль/л, содержащий 5% ПЭГ);
  6. Антисыворотка против СРБ;
  7. Калибровочные растворы №№ 1-5 с указанной на этикетках концентрацией СРБ;
  8. Физиологический раствор (хлорид натрия 0,9%).

Антисыворотка разводится в 3 раза (1:2) СРБ буфером с ПЭГ (полиэтиленгликолем). Разведенная антисыворотка годна для применения при условии хранения его при температуре 2-8С в течение 30 дней.Проведение анализа

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до температуры измерения (37С).

Добавить в кювету

Перемешивать содержимое пробирок в течение 15 секунд. Измерить оптическую плотность проб при длине 340 нм ровно через 5 минут после добавления антисыворотки. Расчет

Расчет концентрации СРБ проводят по нелинейной калибровочной кривой:

Если концентрация СРБ пробы выше самой высокой концентрации стандартного раствора СРБ(точка вне рабочей зоны калибровочного графика), анализируемую сыворотку следует развести 1:4 физиологическим раствором и повторить измерение, а полученный результат умножить на 5.Клинико-диагностическое значение: СРБ – это 2-глобулин и компонент неспецифического иммунного ответа на ранних стадиях проникновения антигена в организм. СРБ способствует удалению из крови эндогенных веществ, образующихся в результате разрушения клеток организма (полисахариды, гликопротеины, нуклеиновые кислоты, фосфатидилхолин и пр.).

СРБ относится к белкам острой фазы. При тяжелых воспалениях синтез его в печени возрастает более, чем в тысячу раз. Уровень СРБ в крови увеличивается в течение 6-10 часов в реакциях острой фазы (разрушение тканей, воспаление).

Концентрация СРБ у курильщиков может достигать 25 мг/л. После хирургического вмешательства (если нет осложнений) СРБ держится в течение 2 дней на уровне до 150 мг/л, а затем возвращается в норму.

Плохим прогностическим признаком является СРБ  200 мг/л на протяжении 10 дней и более после хирургического вмешательства. За 1-2 дня до летального исхода СРБ заметно увеличивается.

Определение концентрации СРБ используют для отличия бактериальных инфекций от вирусных. Концентрация СРБ до 50 мг/л обычно наблюдается при легких вирусных инфекциях и местных бактериальных инфекциях; 50-150 мг/л – в основном при бактериальных инфекциях и в отдельных случаях при тяжелых вирусных инфекциях;  150 мг/л – при тяжелых бактериальных инфекциях.

Максимальная концентрация СРБ может доходить до 400 мг/л у новорожденных и примерно до 850 мг/л у взрослых.

перейти в каталог файлов

Источник: stomfaq.ru

Анализ на C-реактивный белок — универсальное лабораторное исследование, которое позволяет диагностировать острые воспаления, скрытые травмы, заболевания сердечно-сосудистой системы. Уровень C-реактивного белка в организме повышается при повреждении здоровых тканей, разрушении клеток, появлении злокачественных опухолей. Концентрация вещества также увеличивается при некоторых врожденных заболеваниях, например, коллагенозах.

Анализ на C-реактивный белок — информативный тест при подозрениях на инфаркт миокарда. В течение нескольких часов после приступа уровень вещества в сыворотке крови увеличивается в тысячи раз, затем его концентрация постепенно снижается. Своевременная лабораторная диагностика поможет вовремя начать лечение и предотвратить развитие осложнений.

Анализы на C-реактивный белок можно сдать в любой из лабораторий Synevo. Срок готовности результатов — 1 рабочий день. Возможность проведения срочных исследований в день обращения уточняйте у наших администраторов.

С-реактивный белок (СРБ) — негликозилированный белок, который синтезируется преимущественно в гепатоцитах под влиянием цитокинов (через 4-6 часов после повреждения тканей). Свое название он получил из-за способности связывать С-полисахарид клеточной стенки пневмококка. Основная функция СРБ состоит в активации иммунных реакций организма, связывании различных микроорганизмов и продуктов распада поврежденных тканей. СРБ состоит из 5 одинаковых субъединиц, нековалентно связанных между собой, и имеет несколько специфических участков связывания — как для связи с компонентами мембран поврежденных клеток, так и для связывания рецепторов и Clq компонента комплемента. СРБ является провоспалительным «триггером», так как стимулирует моноцитарную выработку IL-1, IL-6 и TNF-α. Уровень СРБ может достигать очень больших значений (увеличиваться в 100 раз или даже больше) после тяжелых травм, бактериальных инфекций, воспалений, хирургических вмешательств или неопластической пролиферации. Увеличение СРБ является неспецифической реакцией на воспалительные и инфекционные процессы. В норме СРБ сыворотки крови составляет менее 5 мг/л. При успешном лечении уровень СРБ снижается, нормализуясь на 6-10 сутки болезни, что позволяет использовать этот тест для наблюдения за течением болезни и контроля эффективности лечения. После инфаркта миокарда концентрация С-реактивного белка повышается на 2-й день заболевания, к концу 2-й — началу 3-й недели уровень снижается до нормальных значений, при стенокардии увеличения концентрации С-реактивного белка в сыворотке крови не происходит. Значения концентрации СРБ, превышающие 3 мг/л, являются неблагоприятным прогностическим признаком, связанным с риском сосудистых осложнений у практически здоровых людей и больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Для оценки риска сердечных заболеваний рекомендуется использовать другой тип теста — ультрачувствительный-СРБ (высокочувствительный-СРБ), который может обнаружить более низкие уровни С-реактивного белка.

Источник: synevolab.ru

nhadian123.com

Определение концентрации С-реактивного белка в сыворотке крови

Главная | Услуги | Медосмотр | Лабораторные методы исследования

С-реактивный белок или СРБ очень чувствительный элемент крови, быстрее других реагирующий на повреждения тканей. Наличие реактивного белка в сыворотке крови — признак воспалительного процесса, травмы, проникновения в организм чужеродных микроорганизмов — бактерий, паразитов, грибов. С-реактивный белок стимулирует защитные реакции, активизирует иммунитет. Определение СРБ используется для диагностики острых инфекционных заболеваний и опухолей. Также анализ СРБ используется для контроля над процессом лечения, эффективности антибактериальной терапии и т.д.

Подготовка к исследованию анализа крови

  1. Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи. Для тестов на инфекции и экстренных исследований допустимо сдавать кровь через 4-6 часов после последнего приема пищи.
  2. ВНИМАНИЕ! Специальные правила подготовки для ряда тестов: строго натощак, после 12-14 часового голодания, следует сдавать кровь на гастрин-17, липидный профиль (холестерин общий, холестерин-ЛПВП, холестерин-ЛПНП, холестерин-ЛПОНП, триглицериды, липопротеин (а), аполипо-протен А1, аполипопротеин В); глюкозотолерантный тест выполняется утром натощак после 12-16 часов голодания.
  3. Накануне исследования (в течение 24 часов) исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки, прием лекарственных препаратов (по согласованию с врачом).
  4. За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться.
  5. Не следует сдавать кровь для лабораторного исследования сразу после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования, рентгенологического и ультразвукового исследований, массажа и других медицинских процедур.
  6. При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях – в одной лаборатории, сдавать кровь в одинаковое время суток и пр. 
  7. Кровь для исследований нужно сдавать до начала приема лекарственных препаратов или не ранее, чем через 10–14 дней после их отмены. Для оценки контроля эффективности лечения любыми препаратами нужно проводить исследование спустя 7–14 дней после последнего приема препарата.

Если Вы принимаете лекарства, обязательно предупредите об этом лечащего врача.

xn----7sbezakcfto7b.xn--p1ai

определение концентрации с реактивного белка в сыворотке крови

С-реактивный белок, количественно (высокочувствительный метод)

Белок острой фазы, длительно повышенное содержание базовых концентраций которого в крови указывает на воспалительный процесс в стенке сосудов, развитие атеросклероза и ассоциировано с риском развития сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений.

Синонимы русские

Синонимы английские

High-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP), quantitative, Cardio CRP, High-sensitivity CRP, Ultra-sensitive CRP.

Метод исследования

Единицы измерения

Мг/л (миллиграмм на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не принимать пищу в течение 12 часов перед исследованием.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение за 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

С-реактивный белок – это гликопротеин, вырабатываемый печенью и относящийся к белкам острой фазы воспаления. Под действием противовоспалительных цитокинов (интерлейкина-1, фактора некроза опухолей – альфа и в особенности интерлейкина-6) его синтез увеличивается уже через 6 часов, а концентрация в крови возрастает в 10-100 раз в течение 24-48 часов после начала воспаления. Наиболее высокие уровни СРБ (более 100 мг/л) наблюдаются при бактериальной инфекции. При вирусной инфекции уровень СРБ, как правило, не превышает 20 мг/л. Концентрация СРБ также повышается при некрозе тканей (в том числе при инфаркте миокарда, опухолевых некрозах).

СРБ участвует в активации комплемента (группы белков, являющихся частью иммунитета), моноцитов, стимулировании экспрессии молекул адгезии ICAM-1, VCAM-1, Е-селектина на поверхности эндотелия (они обеспечивают взаимодействие клеток), связывании и модификации липидов низкой плотности (ЛПНП), то есть способствует развитию атеросклероза. По результатам последних исследований, вялотекущее воспаление в стенке сосудов играет главную роль в развитии атеросклероза, что, в свою очередь, ассоциировано с возникновением сердечно-сосудистых заболеваний. Повреждению стенки сосудов, воспалению и повышению СРБ способствуют «классические» факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний: курение, ожирение, снижение чувствительности тканей к действию инсулина.

Несколько повышенный базовый уровень СРБ, который может быть определен только благодаря высокочувствительным аналитическим методам, отражает активность воспаления во внутренней оболочке сосудов и является достоверным признаком атеросклероза. Некоторые исследования указывают на то, что пациенты с повышенным СРБ и нормальными ЛПНП имеют больший риск развития сердечно-сосудистых заболеваний, чем пациенты с нормальным СРБ и высокими ЛПНП. Относительно повышенный уровень СРБ даже при нормальном уровне холестерина у практически здоровых лиц позволяет прогнозировать риск возникновения гипертонической болезни, инфаркта миокарда, инсульта, внезапной сердечной смерти, сахарного диабета 2-го типа и облитерирующего атеросклероза периферических сосудов. У больных ишемической болезнью сердца чрезмерное содержание СРБ является плохим признаком и свидетельствует о высоком риске повторного инфаркта, инсульта, рестеноза при ангиопластике и осложнений после аортокоронарного шунтирования.

Уровень СРБ в крови снижают ацетилсалициловая кислота и статины, которые уменьшают активность воспаления в стенке сосудов и течения атеросклероза. Регулярная физическая нагрузка, умеренность в употреблении алкоголя, а также нормализация массы тела приводят к снижению уровня СРБ и, соответственно, риска сосудистых осложнений.

Как известно, среди причин смертности взрослого населения развитых стран сердечно-сосудистые заболевания и их осложнения занимают первое место. Исследования уровня СРБ в совокупности с другими показателями помогают оценить вероятный риск развития сердечно-сосудистых заболеваний у относительно здоровых людей, а также спрогнозировать течение болезни у пациентов кардиологического профиля, что может применяться в профилактических целях и при планировании тактики лечения.

Для чего используется исследование?

  • Для оценки риска развития сердечно-сосудистых заболеваний у практически здоровых лиц (наряду с другими маркерами).
  • Для прогнозирования осложнений (инфаркта миокарда, инсульта, внезапной сердечной смерти) у лиц с ишемической болезнью сердца и гипертонической болезнью.
  • Для оценки эффективности профилактики сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений.

Когда назначается исследование?

  • При комплексном обследовании практически здоровых лиц старших возрастных групп.
  • При обследовании пациентов с ишемической болезнью сердца, гипертонической болезнью.
  • Во время лечения и профилактики сердечно-сосудистых осложнений, на фоне приема аспирина (ацетилсалициловой кислоты) и статинов у пациентов кардиологического профиля.
  • После ангиопластики у пациентов со стенокардией напряжения или острым коронарным синдромом (для оценки риска смерти, повторного инфаркта миокарда, рестеноза).
  • После коронарного шунтирования (для выявления ранних послеоперационных осложнений).

Что означают результаты?

Референсные значения: 0 — 1 мг/л.

Концентрация СРБ меньше 1 мг/л указывает на низкий риск развития сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений, 1-3 мг/л – средний риск, больше 3 мг/л – высокий риск сосудистых осложнений у практически здоровых лиц и у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями.

Если уровень СРБ превышает 10 мг/л, проводят повторный тест и дополнительное обследование, чтобы выявить инфекционные и воспалительные заболевания.

СРБ больше 10 мг/л свидетельствует об остром воспалении, хроническом заболевании, травме и т. д.

Причины повышения уровня С-реактивного белка:

  • острые вирусные и бактериальные инфекции;
  • обострение хронических воспалительных (инфекционных и иммунопатологических) заболеваний;
  • повреждение тканей (травма, хирургическое вмешательство, острый инфаркт миокарда);
  • злокачественные новообразования и метастазы;
  • ожоги;
  • сепсис;
  • хронический вялотекущий воспалительный процесс, связанный с повышенным риском сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений;
  • курение;
  • артериальная гипертензия;
  • избыточная масса тела;
  • сахарный диабет;
  • атерогенная дислипидемия (снижение концентрации холестерина ЛПВП, увеличение концентрации триглицеридов, холестерина ЛПНП);
  • нарушение гормонального фона (повышение содержания эстрогенов и прогестерона).

Что может влиять на результат?

Факторы, повышающие уровень СРБ:

  • беременность, интенсивные физические нагрузки;
  • прием пероральных контрацептивов, заместительная гормональная терапия.

Факторы, снижающие уровень СРБ:

  • прием нестероидных противовоспалительных препаратов (аспирина, ибупрофена), кортикостероидов, статинов, бета-блокаторов.

Важные замечания

Оценивать базовый уровень СРБ целесообразно не ранее чем через 2 недели после исчезновения симптомов любого острого заболевания (или обострения хронического заболевания). При значительном повышении СРБ более 10 мг/л необходимо дополнительное обследование для уточнения причин воспалительного процесса.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Источник: helix.ru

C-реактивный белок, количественно (метод с нормальной чувствительностью)

Белок острой фазы, высокочувствительный и неспецифический маркер активного воспаления и повреждения тканей.

Синонимы русские

Синонимы английские

C-reactive protein (CRP), quantitative.

Метод исследования

Единицы измерения

Мг/л (миллиграмм на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не принимать пищу в течение 12 часов перед исследованием.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

С-реактивный белок – это гликопротеин, вырабатываемый печенью и относящийся к белкам острой фазы воспаления. Под действием противовоспалительных цитокинов (интерлейкина-1, фактора некроза опухолей – альфа и в особенности интерлейкина-6) его синтез увеличивается уже через 6 часов, а концентрация в крови возрастает в 10-100 раз в течение 24-48 часов после начала воспаления. Наиболее высокие уровни СРБ (более 100 мг/л) наблюдаются при бактериальной инфекции. При вирусной инфекции уровень СРБ, как правило, не превышает 20 мг/л. Концентрация СРБ также повышается при некрозе тканей (в том числе при инфаркте миокарда, опухолевых некрозах).

СРБ участвует в активации комплемента (группы белков, являющихся частью иммунитета), моноцитов, стимулировании экспрессии молекул адгезии ICAM-1, VCAM-1, Е-селектина на поверхности эндотелия (они обеспечивают взаимодействие клеток), связывании и модификации липидов низкой плотности (ЛПНП), то есть способствует развитию атеросклероза.

Прогрессивное увеличение СРБ связано с активностью воспалительного процесса и степенью повреждения тканей. Причем СРБ является более чувствительным показателем активного воспаления, чем скорость оседания эритроцитов (СОЭ), однако повышается и исчезает раньше, чем изменяется СОЭ.

Повышение СРБ может предшествовать появлению лихорадки, боли и других признаков болезни. Некоторые специалисты определяют длительность антибактериальной терапии в зависимости от сроков снижения СРБ.

В неосложненном послеоперационном периоде СРБ достигает максимальных значений на третий день и в течение недели снижается до нормального уровня. Сохранение высоких значений СРБ и отсутствие его постепенного снижения указывает на присоединение инфекции.

В отдельности определение СРБ не позволяет уточнить диагноз и характер заболевания, но с высокой чувствительностью дает возможность установить факт активного воспаления или повреждения ткани. Результаты анализа должны интерпретироваться с учетом показателей других лабораторных тестов, клинической картины болезни и заключений инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики различных воспалительных заболеваний, обусловленных инфекцией или аутоиммунными процессами, и для оценки эффективности их лечения.
  • Для дифференциальной диагностики бактериальной и вирусной инфекции (при вирусных уровень СРБ повышен незначительно).
  • Для определения активности воспалительного, аутоиммунного процесса.
  • Для диагностики послеоперационных инфекционных осложнений.
  • Для диагностики скрытых инфекций.
  • Для оценки необходимости антибактериальной терапии и ее длительности.
  • Чтобы дать прогноз течения и возможного летального исхода при некоторых острых состояниях (например, панкреонекрозе).
  • Чтобы оценить прогрессирование опухоли и рецидива заболевания (при совместном определении с другими онкомаркерами).
  • Для дифференциальной диагностики воспалительных заболеваний кишечника: болезни Крона (высокий СРБ) и неспецифического язвенного колита (низкий СРБ).
  • Для дифференциальной диагностики ревматоидного артрита (высокий СРБ) и неосложненной волчанки (низкий СРБ).
  • Для мониторинга активности хронических заболеваний.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на инфекционное заболевание у лихорадящих больных, при нейтропении, подозрении на менингит у детей, на сепсис у новорожденных.
  • При обследовании пациентов с аутоиммунной патологией (артритом, васкулитом).
  • При проведении антибактериальной терапии.
  • В послеоперационном периоде (для раннего выявления инфекционных осложнений и оценки эффективности антибактериальной терапии) – при развитии осложнений уровень СРБ будет оставаться повышенным или увеличиваться в течение 4-5 дней после операции.
  • При проведении терапии хронических воспалительных заболеваний.
  • При трансплантации органов (почек, сердца).
  • При профилактическом обследовании и наблюдении за пациентами с хроническими заболеваниями, новообразованиями.

Что означают результаты?

Референсные значения: 0 — 5 мг/л.

Если уровень СРБ превышает 10 мг/л, проводят дополнительное обследование, чтобы выявить инфекционные и воспалительные заболевания. СРБ больше 10 мг/л свидетельствует об остром воспалении, хроническом заболевании, травме и т. д. При вирусных инфекциях, метастазах, вялотекущих хронических и некоторых системных ревматических заболеваниях концентрация СРБ составляет 10-30 мг/л, при бактериальных инфекциях, обострении некоторых хронических воспалительных заболеваний (например, ревматоидного артрита) и повреждении тканей (хирургическая операция, острый инфаркт миокарда) – 40-100 мг/л (иногда 200 мг/л), при тяжелых генерализованных инфекциях, ожогах и сепсисе – до 300 мг/л и более.

Причины повышения уровня С-реактивного белка:

  • острые вирусные и бактериальные инфекции;
  • аутоиммунные заболевания (ревматоидный артрит, системный васкулит, ревматический полиартрит, анкилозирующий спондилоартрит);
  • обострение хронических воспалительных (инфекционных и аутоиммунных) заболеваний;
  • очаговые инфекции (например, хронический тонзиллит);
  • повреждение тканей (травма, хирургическое вмешательство, острый инфаркт миокарда, острое нарушение мозгового кровообращения, острый панкреатит, панкреонекроз);
  • воспалительные заболевания органов малого таза;
  • инфекционный эндокардит;
  • злокачественные новообразования и метастазы;
  • миеломная болезнь;
  • туберкулез;
  • ожоги;
  • сепсис;
  • перитонит;
  • артериальная гипертензия, атеросклероз, сахарный диабет, избыточная масса тела (небольшое увеличение);
  • нарушение гормонального фона (повышение содержания эстрогенов и прогестерона).

Что может влиять на результат?

Факторы, повышающие уровень СРБ:

  • беременность,
  • интенсивные физические нагрузки;
  • прием пероральных контрацептивов, заместительная гормональная терапия.

Факторы, снижающие уровень СРБ:

  • прием нестероидных противовоспалительных препаратов (аспирина, ибупрофена), кортикостероидов, статинов, бета-блокаторов.

Важные замечания

  • Данный анализ не используется для определения риска развития сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений. Активность воспаления сосудистой стенки и атеросклероза оценивается благодаря высокочувствительному тесту на СРБ.
  • При выявлении повышенного СРБ необходимо дополнительное обследование для уточнения локализации и характера патологического процесса.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, анестезиолог-реаниматолог, педиатр, хирург, онколог, кардиолог, ревматолог, гастроэнтеролог, гематолог, акушер-гинеколог.

Источник: helix.ru

Определение концентрации С-реактивного белка в сыворотке крови иммунотурбидиметрическим методом

Принцип метода: С-реактивный белок (СРБ) сыворотки взаимодействует с моноспецифическими антителами, присутствующими в избытке в реакционной смеси с образованием преципитата, усиленного ПЭГ.

Турбидиметрическое определение концентрации СРБ основано на регистрации оптической плотности анализируемой пробы при длине волны 340 нм.

Диапазон измерения метода: 8-150 мг/л.

Норма: до 10 мг/л (37°С);

СРБ в сыворотке сохраняет стабильность при замораживании (-20°С) в течение 6 месяцев.

Оборудование и реагенты:

1) Спектрофотометр с термостатированной кюветой, длина волны 340 нм, длина оптического пути 1 см; температура реакции 37°С;

3) Автоматические пипетки на 75 мкл, 200 мкл и 1000 мкл;

4) Сыворотка крови негемолизированная / плазма;

5) СРБ-буфер (ТРИС-буфер 0,01 моль/л, содержащий 5% ПЭГ);

6) Антисыворотка против СРБ;

7) Калибровочные растворы №№ 1-5 с указанной на этикетках концентрацией СРБ;

8) Физиологический раствор (хлорид натрия 0,9%).

Антисыворотка разводится в 3 раза (1:2) СРБ буфером с ПЭГ (полиэтиленгликолем). Разведенная антисыворотка годна для применения при условии хранения его при температуре 2-8°С в течение 30 дней.

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до температуры измерения (37°С).

Добавить в кювету

3. Буфер для СРБ

Перемешать в течение 15 с. Инкубировать 10 минут при температуре 37°С. Измерить оптическую плотность холостой пробы.

4. Антисыворотка против СРБ

Перемешивать содержимое пробирок в течение 15 секунд. Измерить оптическую плотность проб при длине 340 нм ровно через 5 минут после добавления антисыворотки.

Расчет концентрации СРБ проводят по нелинейной калибровочной кривой:

Оптическая плотность при 340 нм

Оптическая плотность при 340 нм

Если концентрация СРБ пробы выше самой высокой концентрации стандартного раствора СРБ (точка вне рабочей зоны калибровочного графика), анализируемую сыворотку следует развести 1:4 физиологическим раствором и повторить измерение, а полученный результат умножить на 5.

Клинико-диагностическое значение: СРБ – это a2-глобулин и компонент неспецифического иммунного ответа на ранних стадиях проникновения антигена в организм. СРБ способствует удалению из крови эндогенных веществ, образующихся в результате разрушения клеток организма (полисахариды, гликопротеины, нуклеиновые кислоты, фосфатидилхолин и пр.).

СРБ относится к белкам острой фазы. При тяжелых воспалениях синтез его в печени возрастает более, чем в тысячу раз. Уровень СРБ в крови увеличивается в течение 6-10 часов в реакциях острой фазы (разрушение тканей, воспаление).

Концентрация СРБ у курильщиков может достигать 25 мг/л. После хирургического вмешательства (если нет осложнений) СРБ держится в течение 2 дней на уровне до 150 мг/л, а затем возвращается в норму.

Плохим прогностическим признаком является СРБ > 200 мг/л на протяжении 10 дней и более после хирургического вмешательства. За 1-2 дня до летального исхода СРБ заметно увеличивается.

Определение концентрации СРБ используют для отличия бактериальных инфекций от вирусных. Концентрация СРБ до 50 мг/л обычно наблюдается при легких вирусных инфекциях и местных бактериальных инфекциях; 50-150 мг/л – в основном при бактериальных инфекциях и в отдельных случаях при тяжелых вирусных инфекциях; > 150 мг/л – при тяжелых бактериальных инфекциях.

Максимальная концентрация СРБ может доходить до 400 мг/л у новорожденных и примерно до 850 мг/л у взрослых.

Источник: biohimist.ru

nhadian123.com


Смотрите также