Как определить группу крови цоликлонами

Определение группы крови и резус-фактора с помощью цоликлонов

Цоликлоны – это моноклинальные антитела, полученные путем генной инженерии из крови стерильных мышей и применяемые для определения группы крови системы АВО. В отличие от стандартных сывороток, цоликлоны отличаются очень высокой активностью и авидностью, то есть временем наступления и выраженностью реакции агглютинации (склеивания). Основными цоликлонами являются: анти-A, анти-B, анти-AB, анти-0 и другие. По ним определяют группы крови и резус-фактор.

Как проводится

Определение группы крови данным методом проводится в лаборатории. Температура воздуха в помещении должна составлять от +15 до + 25 градусов C. Исследование должно проходить при хорошем освещении. Все реагенты нужно хранить плотно закрытыми, поскольку при высыхании активность антител значительно снижается. Нельзя использовать мутные и содержащие хлопья реагенты. Для каждого из них нужна отдельная пипетка. Процедура проводится на планшете или тарелке белого цвета, поверхность которых должна хорошо смачиваться. Благодаря высокой авидности и активности цоликлонов, есть возможность применения по одной серии анти-A и анти-B реагентов.

На планшете делают надписи: анти-A и анти-B. Под соответствующие надписи капают цоликлоны в количестве примерно 0,1 мл. Реагент анти-A имеет желтовато-розовый цвет, анти-B – синий. Рядом с моноклональными антителами капают по капле крови и смешивают ее с реагентами стеклянной палочкой или уголком предметного стекла. Перед смешиванием следующей пары капель палочку или стекло тщательно промывают и вытирают насухо.

На протяжении 2,5 минут ведут наблюдение за агглютинацией, при этом планшет слегка покачивают. Затем оценивают результат. Надо сказать, что для наблюдения за процессом не требуются никакие приспособления. Агглютинаты хорошо видны невооруженным глазом, они быстро сливаются и образуют большие хлопья. Если склеивания не происходит, капля реагента равномерно окрашивается в красный цвет.

Если агглютинация отсутствует (и с цоликлоном анти-A, и с анти-B), в эритроцитах нет ни антигена A, ни B. Это I группа.
Если агглютинация есть лишь с цоликлоном анти-A, в эритроцитах содержится только антиген A. Это кровь II группы.
Если агглютинация наблюдается лишь с цоликлоном анти-B, в красных клетках есть только антиген B. Это III группа.

Если агглютинация произошла c цоликлоном и анти-A, и анти-B, в эритроцитах есть оба антигена. Для исключения аутоагглютинации проводят контрольную процедуру: смешивают изотонический раствор натрия хлорида (0,1 мл) и исследуемую кровь (0,01 мл). Если агглютинация отсутствует, то это IV группа.

Определение резус-фактора

Цоликлоны имеют ряд преимуществ перед стандартными сыворотками

На планшет наносят большую каплю реагента анти-D-супер. Рядом – маленькую (в 10 раз меньше) исследуемой крови, которую смешивают с реагентом и оценивают результат. Если началась агглютинация, кровь является резус-положительной, при отрицательном резус-факторе агглютинации не происходит.

В заключение

Моноклональные реагенты для определения группы крови имеют явные преимущества по сравнению со стандартными изогем-агглютинирующими сыворотками. Они обеспечивают очень точный результат, а сама процедура безболезненна, безопасна и занимает очень мало времени.

Определения группы крови и резус-фактора цоликлонами

Цоликлоны – моноклинальные антитела, которые были получены из крови мышей с помощью генной инженерии и используются для определения группы крови системы АВО и резус-фактора.

Цоликлоны, в противовес стандартным сывороткам, отличаются высокой активностью и авидностью (временем наступления, а также выраженностью склеивания (реакции агглютинации).

Основные цоликлоны:

Анти-A,
Анти-B,
Анти-AB,
Анти-0 и т.д.

По цоликлонам определяют резус-фактор и группы крови.

Техника определения групп с помощью цоликлонов

Определение данным методом производится в лабораторных условиях. Температура воздуха должна находиться в пределах +15 – + 25 градусов по Цельсию. Исследование должно проводиться при достаточно хорошем освещении.

Реагенты необходимо хранить плотно закрытыми, так как при высыхании значительно снижается активность антител.

Нельзя использовать содержащие хлопья и мутные реагенты. Для каждого из реагентов требуется отдельная пипетка.

Анализ проводится на белой тарелке или планшете с хорошо смачиваемой поверхностью. Благодаря высокой активности и авидности цоликлонов, есть возможно применение по серии реагентов анти-A и анти-B.

На планшете нужно сделать надписи с названиям антигенов анти-A/анти-B. Далее снизу от соответствующих надписей капают примерно 0,1 миллилитр цоликлонов. У реагента анти-A цвет желтовато-розовый, у анти-B – синий.

Определение групп крови

Возле моноклональных антител капают по одной капле крови, смешивают ее уголком предметного стекла или стеклянной палочкой с реагентами. Перед дальнейшим смешиванием пар капель необходимо тщательно промыть и насухо вытереть стекло или палочку.

Наблюдение за процессом агглютинацией ведут в течение 2,5 минут, при этом тарелку или планшет нужно слегка покачивать. По истечении времени оценивают результат. Стоит отметить, что наблюдения за агглютинацией не требуют каких-либо специальных приспособлений.

Агглютинаты достаточно хорошо видны даже невооруженным глазом, быстро сливаясь и образуя большие хлопья. В случае, если не происходит склеивания, капля реагента приобретает равномерную окраску красного цвета.

Расшифровка результатов

Таблица сопоставления группы крови и цоликлона позволяет разобраться в результатах.

Цоликлон I положительная I отрицательная II положительная II отрицательная III положительная III отрицательная IV положительная IV отрицательная

Анти-А		+	+			+	+
Анти-В				+	+	+	+
Анти-D	+	+		+		+

Если отсутствует агглютинация (с анти-A и анти-B), эритроциты не содержат антигенов A и Б. Это I группа крови,
Если есть агглютинация только с анти-A, эритроциты содержат лишь антиген A, что характеризует II группу крови,
Если агглютинация только с анти-B, красные клетки содержат антиген B, что характеризует III группу,
Если наблюдается агглютинация c обоими цоликлонамми анти-A и анти-B, эритроциты содержат оба антигена. С целью исключения аутоагглютинации необходимо провести контрольную процедуру: в этом случае смешивают 0,1 миллилитр изотонического раствора хлорида натрия и 0,01 миллилитр исследуемой крови. Если реакция агглютинации отсутствует, определяется IV группа.

Расшифровка результатов

Определение резус-фактора

Для определения резус-фактора наносят на планшет большую каплю анти-D-супе, возле нее – маленькую каплю (меньше в десять раз) исследуемой крови. Производят смешивание и оценивают полученный результат. Если реакция агглютинации началась, данная методика определяет кровь как резус-положительную, если резус-фактор отрицательный – агглютинации нет.

Определение резус-фактора

Препараты цоликлонов

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D.

Существуют три разновидности:

Обычный анти-D-цоликлон. При его добавлении развивается реакция непрямой агглютинации,
Супер. Вызывает прямую агглютинацию,
Препарат анти-D-микс, имеющий в составе компоненты обычного и супер цоликлона анти-D). С их помощью можно как выявить группу крови, так и определить резус-принадлежность крови.

Отличие других растворов состоит в названии, поскольку входящие в их состав антитела – иммуноглобулины М и G – предоставляют возможность только произвести типизацию крови по антигенам АВ0. Различие заключается исключительно в механизме слипания эритроцитов (агглютинация прямая/непрямая).

У каждого из этих препаратов есть свои собственные особенности использования и срок годности. Однако наибольшей популярностью в лабораторной клинической диагностике пользуются только 3 вышеуказанных препарата (анти-А, анти-В, анти-D).

Как определить группу в случае неверной трактовки результатов анализа

Иногда возможно получение недостоверных, ложных результатов. К примеру, если при добавлении к препарату крови изменился их цвет или если агглютинация наблюдается во всех ячейках планшетки.

Чтобы предотвратить такие результаты, если выполняется определение группы цоликлонами, алгоритм действий предусматривает определенные правила. Сначала следует посмотреть на срок обращения цоликлонов. Недопустимо использовать реагенты, у которых истек срок годности.

Обязательно нужно соблюдать и все условия правильного проведения процедуры. Помещение должно иметь хорошо оборудованное рабочее место с температурным режимом и достаточным освещением. Если инструкция к препарату содержит указания и касательно требуемой влажности, следует учитывать и данный фактор.

Немалое значение имеет и чистота планшетки, так как ее загрязнение может привести к возникновению ошибок в исследовании и, как следствие, к получению неверных результатов.

Где можно провести анализ?

Определение группы цоликлонами постепенно приобретает все большую популярность. Если раньше эта процедура проводилась исключительно в специализированных стационарах (к примеру, только в отделениях гематологии и хирургии), то сейчас процедура доступна почти в любой достаточно оборудованной лаборатории.

Методика цоликлонов находит применение и в поликлиниках. Там ее включают различные методы экспресс-определения группы крови, проводимые с целью скорейшего выставления пациенту диагноза.

На платной основе проведение этой услуги предлагают и многие центры косметологии и частной медицины. Бесплатно данная процедура, как было сказано выше, проводится по направлению терапевта или лечащего врача.

Если отсутствует возможность обратиться за анализом крови в поликлинику, исследование можно провести и самостоятельно при наличии набора препаратов и специальной планшетки. Однако необходимо помнить, что для получения достоверных результатов требуется соблюдать условия процедуры, в особенности это касается стерильности.

Видео

(Пока оценок нет) Загрузка...

Определение группы крови цоликлонами: алгоритм действий, резус фактора, как определить

Цоликлоны получают из крови лабораторных мышей путем генных методов инженерии. Другое название цоликлонов – моноклональные антитела. Метод идентификации групповой принадлежности человеческой крови построен на принципах прямой агглютинации (склеивание красных клеток крови между собой).

При помощи реактивов-цоликлонов определяют групповую инивидуальность крови по двум системам: резус-фактор и АВ0.

По сравнению с методикой, использующей стандартные определяющие сыворотки, намного проще происходит определение группы крови цоликлонами, алгоритм которого будет представлен в данной статье.

Четкая агглютинация

Четкая агглютинация наступает через 10-30 с, однако окончательный результат следует учитывать через 3 мин, т.к. в случае слабых форм антигена А реакция наступает позднее, а агглютинаты мельче. Вписывают группу крови.

Заключение о группе крови можно делать только в случае отсутствия реакции в контроле (последняя лунка).

Диагностика и лечение виртуально не проводятся! Просьба сообщать о неработающих ссылках на внешние страницы, включая ссылки, не выводящие прямо на нужный материал, запрашивающие оплату, требующие личные данные и т.д.

Каждая ампула стандартной сыворотки должна иметь паспорт-этикетку с указанием группы крови, номера серии, титра, срока годности, места изготовления.

Стандартные сыворотки для определения группы крови по системе АВО выпускают с определенной цветовой маркировкой: I(0) — бесцветная, II(А)—голубая, III(В) — красная, IV(АВ) — желтая.

Тарелку делят цветным карандашом на 4 квадрата и в направлении по часовой стрелке обозначают квадраты I(0), II(А), III(В).

В соответствующий квадрат тарелки пипеткой наносят крупную каплю сыворотки двух серий I(0), II(А), III(В) групп. Подушечку пальца обрабатывают спиртом и делают прокол кожи иглой-копьем.

Первую каплю крови снимают марлевым шариком, последующие разными уголками предметного стекла вносят последовательно в капли сыворотки и тщательно размешивают.

Затем путем покачивания тарелки тщательно перемешивают кровь с сывороткой.

При положительной реакции изогемагглютинации хлопья и зернышки из склеившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хлорида натрия и перемешивании. 1.

Все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации. Но, прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию изогемагглютинации со стандартной сывороткой IV(АВ) группы по той же методике.

Выявление других комбинаций говорит о неправильном определении групповой принадлежности крови больного. Сведения о группе крови больного вносят в историю болезни, делают соответствующую отметку на титульном листе за подписью врача, проводившего исследование, с указанием даты исследования.

Ошибки в определении группы крови всегда связаны с нарушением методики исследования, поэтому необходимо тщательное соблюдение всех правил исследования.

Во всех сомнительных случаях необходимо произвести повторное исследование групповой принадлежности со стандартными сыворотками других серий или с помощью стандартных эритроцитов.

Если появилась агглютинация, то кровь несовместима и переливать ее нельзя.

Горизонтальные табы

По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин, в капли добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия. 4) IV группа — стандартные сыворотки всех трех групп вызывают агглютинацию. Однако для окончательного заключения необходимо провести контрольное исследование на специфичность реакции со стандартной гемагглютинирующей сывороткой IV группы.

1. Исследование проводят двумя моноклональными сыворотками: анти-А (розового цвета) и анти-В (бирюзового цвета). 1.

Для исследования используют специальные сыворотки, принадлежащие к той же группе крови по системе АВ0, что и у данного больного, и содержащие антирезусантитела. 2.

Если результат совпадает, он вписывается в титульный лист истории болезни ОБЯЗАТЕЛЬНО ВСЕ СЛОВАМИ (пример: резус-положительная, НО НЕ Rh+), ставится подпись врача и дата исследования.

Определение группы крови и резус фактора

Практически сразу после рождения у ребенка берется анализ крови на группу крови и резус-фактор. Эти данные остаются неизменными на всю жизнь. Однако не всегда родители запоминают группу крови и резус малыша.

Следовательно, не могут их сообщить, когда ребенок повзрослеет. Поэтому многие люди самостоятельно сдают анализ на группу крови и Rh. Современная медицина предлагает несколько методов определения группы крови и резус-фактора.

Вот самые популярные из них.

Цоликлоны для определения группы крови и резуса

Узнать группу крови можно с помощью цоликлонов. Этот довольно новый метод позволяет получить практически 100% достоверный результат.

Цоликлонами называются моноклинальные антитела, которые синтезированы благодаря разработкам генной инженерии из жидкой ткани стерильных мышей. Они используются для того, чтобы выявить, какая группа у крови по системе АВО.

Такой вид анализа выполняется в условиях лаборатории. Для получения достоверного результата во время исследования должны быть соблюдены ряд правил. Прежде всего, температура воздуха в помещении, где проводятся анализы, не должна быть ниже +15 градусов по Цельсию и выше +25 градусов по Цельсию.

Также в лаборатории должно быть хорошее освещение. Для выполнения анализа используются только качественные реагенты. Они не должны иметь замутнения и содержать хлопья. Для каждого реагента должна быть применена отдельная пипетка, чтобы не допустить смешивание.

Помимо этого, для исследования потребуется обильно смоченная тарелка белого цвета.

Алгоритм действия в данном случае будет следующим. На двух противоположных сторонах тарелки выполняются надписи анти-А и анти-В, под которые лаборант помещает по 0,1 мл соответствующего цоликлона. Определить их можно по оттенку.

Так, у цоликлона анти-А он желто-розовый, а анти-В – синий. Далее, под реагент помещается капля крови. С помощью стеклянной палочки обе субстанции смешиваются.

После этого берется чистая палочка, и такая манипуляция выполняется с двумя другими субстанциями.

Затем, ведется наблюдение за процессом агглютинации. Это должно продолжаться в течение 2,5 минут. Тарелку при этом следует слегка покачивать.

Для того чтобы определить агглютинацию не нужно никакого дополнительного оборудования. Ее определяют визуально. В том случае, если она происходит, то появляются крупные хлопья.

Если же процесса агглютинации нет, то цоликлон приобретает красный цвет. После этого происходит определение группы крови:

Если агглютинация не идет ни с одной, ни с другой стороны тарелки, то в эритроцитах нет антигенов А и В, следовательно, кровь принадлежит к первой группе.
Если агглютинация происходит только там, где присутствовал цоликлон анти-А, то в форменных клетках крови (эритроцитах) присутствует лишь антиген А. Следовательно, кровь принадлежит второй группе.
Если агглютинация происходит только там, где присутствовал цоликлон анти-В, то в форменных клетках крови (эритроцитах) присутствует лишь антиген В. Следовательно, кровь принадлежит к третьей группе.
Если процесс агглютинации идет в обоих случаях, то в эритроцитах есть антигены А и В. В такой ситуации рекомендуется сделать дополнительный анализ. Для его проведения берется капля крови пациента и смешивается с изотоническим раствором хлорида натрия в количестве 0,1 мл. Если при этом агглютинация не наблюдается, то определяют четвертую группу крови.

Данным методом можно также определить резус-фактор. Алгоритм будет таким же, как и при определении группы крови.

На белую тарелку помещается цоликлон анти-D, а рядом с ним капля крови пациента. Она должна быть в 10 раз меньше реагента. Обе субстанции смешиваются и в том случае, если агглютинация началась, то определяется положительный резус-фактор, в том случае, если нет, то резус-фактор отрицательный.

Методика определение группы крови по системе АВО

Как определить группу крови по системе АВО? Методика распознания группы крови и резус-фактора по системе АВО не менее популярна, чем предыдущая. Исследование также проводится в лабораторных условиях. Техника выполнения анализа по системе АВО проста.

Ее суть заключается в следующем. Берется белая тарелка, на которой указывается данные пациента и группы крови в разных местах: О – первая, А – вторая, В – третья. Это и есть так называемая система АВО. Далее, под обозначениями помещаются соответствующие сыворотки.

К ним добавляются капли крови, размеров раз в 10 меньше. Затем, субстанции смешиваются, и наблюдается реакция. Спустя 5 минут, лаборант может начать расшифровку. Оценивается агглютинация, при которой возникают хлопья, а сыворотка становится бесцветной.

Метод АВО выдает такие результаты:

агглютинации нет нигде, следовательно, у человека первая группа крови;
агглютинация идет в сыворотках О и В, значит, кровь 2 группы;
агглютинация идет в сыворотках О и А, значит, кровь 3 группы;
агглютинация идет во всех сыворотках АВО, значит, требуется дополнительное исследование, в котором будет задействована сыворотка для определения четвертой группы. Если в данном случае процесс агглютинации не состоялся, значит, исследуемая кровь относится к 4 группе.

Алгоритм проведения исследования

Все в организме человека обусловлено выработкой различных веществ. Не исключением является и группа крови, тип которой зависит от антигенного состава эритроцитов.

Современная медицина быстро развивается, и определение группы крови уже давно не в новинку. Существует множество методов ее определения. Одним из наиболее широко распространенных является определение группы крови цоликлонами.

Что это такое?

Цоликлоном называют специальное антитело, реагирующее с антигенами, расположенными на поверхности мембран эритроцитов. Для их получения используют методы генной инженерии – вначале получают специальные бактерии, которые вводят в организм мышей. После иммунизации организма мыши получают ее асцитную жидкость, из которой впоследствии и выделяют необходимые антитела.

Они представляют собой иммуноглобулины класса М.

Благодаря особой технологии изготовления, цоликлоны безопасны для человека в эпидемиологическом плане.

Вещество выпускается в виде водно-солевого раствора, который добавляют к имеющимся образцам крови. Для каждой группы антигенов имеется собственный раствор цоликлона – анти-А цоликлон имеет розовую окраску, анти-В – голубую, а цоликлон анти-D бесцветен.

Свое название препараты получили от названия места, где они были созданы – Центральный ордена Ленина институт переливания крови в Москве.

Методика определения

Определение группы крови цоликлонами может проводиться в нативной крови с добавлением консерванта или без него, а также при исследовании капиллярной крови, взятой из пальца. Непосредственно определение группы проводится на специальной пластине или планшете.

В первую очередь, на планшет наносится капля раствора цоликлона под соответствующей пометкой. Рядом с раствором цоликлона наносится капля исследуемой крови, и они смешиваются между собой.

Определение группы крови цоликлонами проводится при равномерном покачивании пластины из стороны в сторону. Визуально, наблюдается агглютинация эритроцитов (слипание их между собой).

Если результат отрицательный, агглютинации не происходит.

Процедура обязательно проводится при соблюдении определенного температурного режима – от 15 до 25 градусов тепла при нормальной освещенности. Перед проведением процедуры следует убедиться, что срок годности цоликлонов не истек.

В некоторых учреждениях с целью контроля за препаратами обязательно следует зафиксировать время открытия средства и срок его годности. Рекомендуется документально отразить срок годности реагента, если проводится определение группы крови цоликлонами. Фото используемых флаконов делают редко, однако подобная фиксация также возможна.

Интерпретация результатов

После проведения теста уже можно узнать, какая же группа крови у пациента.

Каковы же результаты исследования, если проводилось определение группы крови цоликлонами? Таблица сопоставления цоликлона и группы крови позволяет разобраться в полученных результатах.

Многие люди хотят знать, какая группа крови у них. Такой показатель является очень важным для каждого из нас. Может случиться разная ситуация, поэтому обязательно нужно ее знать. Во время операции и при тяжелых родах, возможно, понадобиться срочное переливание крови, поэтому чтобы не терять драгоценные минуты нужно заранее определить свою группу.

Существует в лабораторной практике определение группы крови при помощи цоликлонов. Они являются моноклинальными антителами, которые синтезировали из крови стерильных мышек с помощью генной инженерии.

Их применяют для определения группы крови в системе АВО. Обычно цоликлоны применяют вместо обычных сывороток, так как реакция агглютинации и высокая их активность ускоряет процесс выявления группы крови.

Главные антитела называются:

Проведение определения группы и резуса

Таким способом определение группы производят в лабораторных условиях. Температурный режим в лаборатории обязаны поддерживать от + пятнадцати до +двадцати пяти 0С.

Освещение помещения необходимо сделать довольно ярким. Реагенты необходимо сохранять в плотно закупоренном виде, так как при высыхании их работоспособность сильно понижается.

Цоликлоны с хлопьями и мутным содержимым нельзя использовать для определения группы.

При проведении анализа нужно использовать разные пипетки. Применяется специальная тарелочка или планшет с белой поверхностью и отличными смачивающимися качествами. По 1 серии реагентов анти-А и анти-В можно применить в анализе, так как у них отличная активность и авидность.

Планшет отмечают надписями антител. На поверхность с соответствующей надписью капают 0,1 мл цоликлонов. Оттенки желтого и розового цветов присутствуют в анти-А реагентах, синим, окрашен анти-В.

Около антител капают капельку крови, а затем смешивают ее стеклянной палочкой или углом предметного стекла. Когда нужно смешать следующую пару необходимо обязательно хорошо промыть и вытереть насухо.

Планшетку начинают слегка раскачивать около 2,5 минуты, чтобы агглютинации проходил в правильном режиме. Потом смотрят результат. Наблюдают за процессом без каких-либо вмешательств и дополнительных предметов. Антитела отлично видны лаборанту. Процесс их слияния прекрасно выявлен в виде объемных хлопьев. При определении не склеивания моноклинальных антител они окрашиваются в красный цвет.

Список определения группы крови с помощью этого анализа:

Насколько это достоверно?

Кровь человека – уникальная жидкость. Ее удивительный состав и свойства остаются предметом для внимательного изучения ученых и медиков. Определение группы крови цоликлонами – один из новых способов. В чем заключается данная методика? Возможно ли определение резус-фактора цоликлонами? Что это за сыворотка? Как быстро можно получить ответ после лабораторного исследования?

Общая информация о цоликлонах

Чтобы понять, как используются цоликлоны для определения группы крови, необходимо разобраться, что это такое, и почему данный способ эффективен.

Цоликлоны – препараты, полученные из крови стерильных мышей. Они применяются исключительно для определения группы крови по системе АВО. С помощью данных средств можно определить как группу, так и резус фактор.

Важно! Цоликлоны представляют собой растворы антител к антигенам разных типов, которые расположены сверху эритроцитарных клеток. Соблюдая существующий алгоритм, можно быстро определить группу и резус фактор человека.

Картинка показывает, как выглядят флаконы с цоликлонами

Проведение процедуры

Проводить процедуру определения группы крови цоликлонами, алгоритм которой описан ниже, принято в лабораторных условиях. Это связано с тем, что хранение препаратов и компонентов требует особых условий, которых невозможно достичь в быту.

Процедура проводится с соблюдением некоторых условий:

температура в помещении должна быть в пределах от 15-25 градусов;
каждый отдельный реагент должен храниться в плотно закрытой емкости;
лаборатория должна быть хорошо освещена;
если реагент для проведения процедуры помутнел, он непригоден;
если в нем наличествует осадок, применять препарат нельзя.

Чтобы благодаря этому анализу получить достоверные сведения, необходимо тщательно к ней подготовиться.

Подготовительные меры

Перед тем как начать определение группы крови с помощью цоликлонов, нужно заранее приготовить все необходимые инструменты, реагенты и биоматериал. Важно соблюсти все условия процедуры. Только так можно рассчитывать на получение достоверных сведений.

Определение группы крови по цоликлонам проводится, если есть такое оснащение:

сухой планшет, тарелка или предметное стекло для проведения подобных манипуляций;
цоликлоны анти-А и анти-В;
две стерильные пипетки для разных цоликлонов;
две стеклянные палочки;
стерильный шприц для забора биоматериала;
несколько ватных тампонов;
стерильные салфетки;
спирт;
жгут;
физраствор.

Все, что потребуется для проведения процедуры, необходимо подготовить заранее

На сухой пробирке должна быть отметка с фамилией исследуемого пациента. Бланк, который выдан врачом, должен быть правильно заполнен лаборантом. В нем должно быть описание о группе, резус факторе. Внизу ставят печать и подпись врача.

Проведение процедуры

Алгоритм определения группы крови с помощью цоликлонов состоит в следующем.

Вначале у пациента проводится забор кровеносной массы для проведения исследования. Обычно это делается с помощью одноразового пяти кубового шприца. Затем проводят такие манипуляции:

на планшет для процедуры наносят по крупной капле цоликлонов каждой категории;
предварительно важно маркером точно подписать, в какую часть планшета какие реагенты нанесены;
рядом ставят каплю небольшого объема взятой на исследование кровеносной жидкости;
на проявление результата отводится 2-3 минуты.

Чтобы проанализировать результат, в течение нескольких минут приводится помешивание реагентов с биоматериалом разными палочками. Лаборант внимательно наблюдает за реакцией агглютинации.

Процесс определения группы с помощью специальных реагентов

Положительной считается реакция в случае, если агглютинация (склеивание) состоялось. Агглютинаты представляют собой небольшие склеенные агрегаты красного цвета и мягкой природы. Если реакция отрицательная, склеивания не происходит, а кровеносная жидкость остается равномерной по структуре, ровного красного цвета.

Расшифровка полученных данных

Техника определения группы крови с помощью цоликлонов считается достоверной, и результат можно получить в кратчайший срок. Таблица прохождения агглютинации позволяет понять, как правильно расшифровать полученную в процессе процедуры информацию.

Если ни с одним из используемых в процессе процедуры реагентов агглютинация не произошла, для анализа была получена кровь первой группы, в которой нет антигенов А или В.

Если в процессе смешивания исследуемой массы с цоликлонами анти-А произошло склеивание, речь идет о второй группе крови, в которой содержатся антигены А.

Склеивание цоликлонов анти-В с компонентами крови при смешивании их с кровью пациента свидетельствует о том, что для процедуры сдана кровь третьей группы, в которой содержатся антигены В.

Если произошла агглютинация фрагментов крови с обоими видами реагентов, скорее всего, манипуляция проводится с участием четвертой группы. Для подтверждения данного предположения применяется специальный цоликлон анти-АВ.

Определение резус-фактора цоликлонами

Для проведения процедуры применяется только венозная кровь. Направление на процедуру выдает врач-гематолог. Действие препарата ожидается в течение нескольких минут. В комплект с препаратом идет инструкция, которая дает общее представление о проведении процедуры и о порядке расшифровки полученных данных.

Резус-фактор определяется тем же эффективным способом, но с применением другого реагента

Для определения резус-фактора нужно провести такую процедуру:

каплю крови смешивают с моноклональным реагентом;
слабый эффект агглютинации отмечается уже через 10-15 секунд;
полное склеивание возможно только через минуту.

Реакция агглютинации показывает, есть ли резус-фактор+. При положительной крови агглютинация наступает всегда. Если этот процесс не развивается, резус отрицательный.

Итак, мы рассмотрели определение группы крови и резус-фактора цоликлонами (алгоритм процедуры). Применение данного способа широко распространено в медицинских учреждениях разных стран. Если манипуляция проводится в лабораторных условиях с соблюдением всех правил, можно получить достоверные сведения о группе крови и резус-факторе.

Определение резуса фактора

Медицина выделяет у людей всего четыре группы крови не зависимо от половой или расовой принадлежности.

Иммунологические признаки, которые и составляют основное различие по группе эритроцитарных антигенов, передаются по наследству.

Что такое цоликлон

Перед хирургическим вмешательством обязательно определяется тип индивидуальных антигенных характеристик человека.

Та же процедура является обязательно для военнослужащих (информация указывается на форме), для женщин перед родами и т.д.

Определение групп крови цоликлонами сравнительно новый метод исследования. Этот анализ может проводиться на любом этапе стационарного лечения пациентов.

Цоликлоны по сути являются одним из видов иммуноглобулинов (тип М). Это моноклональные антитела, которые были образованы с помощью генной инженерии. Цоликлоны получены в результате воздействия сыворотки на стерильных лабораторных мышей. Образовывается скопление жидкости в брюшной полости грызуна, которая содержит эти антитела.

Подготовка к процедуре

Температура воздуха должна быть не ниже 15 и не выше 25 градусов, иначе результат исследования не может считаться достоверным. В помещении не должно быть пыли, животных, насекомых и других факторов, которые могут физически повлиять на процесс проведения исследования.

Также проведение лабораторного анализа требует хорошей освещенности помещения.

Перед процедурой подготавливается весь необходимый инвентарь.

Для проведения анализа потребуется пробирка для биологического образца, планшет для нанесения реагентов, стерильные пипетки и палочки для взаимодействия с биологическими образцами.

Если лаборант проводит не только лабораторное исследование, но и забор крови, то необходимо подготовить одноразовые шприцы или вакуумные пробирки, жгут, медицинский спирт, ватные шарики и стерильные салфетки. Также под рукой должны быть инструменты для маркировки биообразов пациентов.

Проведения анализа

В современной лабораторной диагностике используется три вида стандартных цоликлонов для определения группы крови и резус фактора.

Реагент типа «Анти-А» окрашен в красный цвет, также окрашен и флакон, колпачок или этикетка флакона». Тип «Анти-В» окрашивается синим, а «Анти АВ» не помечается цветным маркером.

Производители реагентов выпускают упаковки с цоликлонами 5 или 10 мл. Не допускается использование испорченных или некачественных реагентов.

При наличии видимых дефектов упаковки или появлении хлопьев в жидкости, цоликлон не используют.

Для определения группы крови на специально подготовленную пластину, которая оформлена как таблица, наносят цоликлоны различных типов (А, В и АВ). Каждый из них должен быть подписан. Реагент наносится на специально отмеченную область. Каждый тип цоликлона должен наноситься отдельной стерильной пипеткой.
Рядом с реагентами помещается по 1 капле крови пациента.
Стерильной палочкой реагенты смешивают с биологическим образцом.
Уже спустя несколько секунд можно заметить изменения и происходящую реакцию агглютинации. По правилам наблюдение следует вести в течение 3 минут. После этого можно сделать вывод о результатах исследования.

Как понять результат

Отсутствие какой-либо реакции склеивания во всех образцах означает, что в клетках эритроцитов пациента нет агглютиногена исследуемого типа. Образец крови причисляется к I группе (тип 0).
Если эритроцитарные клетки пациента вступили в реакцию с реагентами типа «Анти-а» и «Анти-АВ», то у пациента II группа крови (тип А).
Заметная агглютинация образца исследуемой крови с цоликлонами тип «Анти-АВ» и «Анти-В» означает, что пациент обладает III группой крови (тип В).
Если кровь пациента вступила в реакцию со всеми химичсекими реагентами, то исследуемый образец принадлежит к IV группе (тип АВ).При определении группы крови с помощью цоликлонов дополнительной проверки не требуется, так как реагенты не содержат добавок, которые могут спровоцировать спонтанную реакцию.

Определение группы крови и резус фактора проводится в лабораторных учреждениях в медицинских учреждениях.

Это достаточно простое исследование, которое дает очень полезную и жизненно важную информацию о человеке.

В будущем информация группы крови и резус фактора позволит быстро оказать помощь и организовать переливание крови после травмы или аварии и может спасти жизнь. Узнать свой номер ГК можно самостоятельно заказав исследование в любой медицинской лаборатории. Полученные данные необходимо внести в карту пациента.

Источник: http://krovinushka.ru/gruppy-krovi/opredelenie-gruppy-krovi-tsoliklonami-algoritm-provedeniya-issledovaniya.html

Как определяют группы крови с помощью цоликлонов, и насколько это достоверно?

Общая информация о цоликлонах

Картинка показывает, как выглядят флаконы с цоликлонами

Проведение процедуры

Процедура проводится с соблюдением некоторых условий:

температура в помещении должна быть в пределах от 15-25 градусов;
каждый отдельный реагент должен храниться в плотно закрытой емкости;
лаборатория должна быть хорошо освещена;
если реагент для проведения процедуры помутнел, он непригоден;
если в нем наличествует осадок, применять препарат нельзя.

Чтобы благодаря этому анализу получить достоверные сведения, необходимо тщательно к ней подготовиться.

Подготовительные меры

Определение группы крови по цоликлонам проводится, если есть такое оснащение:

сухой планшет, тарелка или предметное стекло для проведения подобных манипуляций;
цоликлоны анти-А и анти-В;
две стерильные пипетки для разных цоликлонов;
две стеклянные палочки;
стерильный шприц для забора биоматериала;
несколько ватных тампонов;
стерильные салфетки;
спирт;
жгут;
физраствор.

Все, что потребуется для проведения процедуры, необходимо подготовить заранее

Проведение процедуры

Алгоритм определения группы крови с помощью цоликлонов состоит в следующем.

на планшет для процедуры наносят по крупной капле цоликлонов каждой категории;
предварительно важно маркером точно подписать, в какую часть планшета какие реагенты нанесены;
рядом ставят каплю небольшого объема взятой на исследование кровеносной жидкости;
на проявление результата отводится 2-3 минуты.

Процесс определения группы с помощью специальных реагентов

Внимание! Определение группы крови по цоликлонам – достоверный метод, чтобы узнать свою группу и резус фактор. Стандартный набор процедуры включает лишь несколько манипуляций, требует немного времени и считается малозатратным способом. Схема проведения процедуры всегда одинакова. Чтобы точно узнать свою группу, манипуляции должен проводить только квалифицированный специалист.

Расшифровка полученных данных

Определение резус-фактора цоликлонами

Резус-фактор определяется тем же эффективным способом, но с применением другого реагента

Для определения резус-фактора нужно провести такую процедуру:

каплю крови смешивают с моноклональным реагентом;
слабый эффект агглютинации отмечается уже через 10-15 секунд;
полное склеивание возможно только через минуту.

Источник: http://lechiserdce.ru/analiz-krovi/9485-opredelyayut-gruppyi-krovi-tsoliklonov.html

Что такое цоликлоны? Как с их помощью определить группу крови и резус-фактор

По цоликлонам определяют резус-фактор и группы крови.

Техника определения групп с помощью цоликлонов

Реагенты необходимо хранить плотно закрытыми, так как при высыхании значительно снижается активность антител. Нельзя использовать содержащие хлопья и мутные реагенты. Для каждого из реагентов требуется отдельная пипетка.

Определение групп крови

Расшифровка результатов

Таблица сопоставления группы крови и цоликлона позволяет разобраться в результатах.

Если отсутствует агглютинация (с анти-A и анти-B), эритроциты не содержат антигенов A и Б. Это I группа крови;
Если есть агглютинация только с анти-A, эритроциты содержат лишь антиген A, что характеризует II группу крови;
Если агглютинация только с анти-B, красные клетки содержат антиген B, что характеризует III группу;
Если наблюдается агглютинация c обоими цоликлонамми анти-A и анти-B, эритроциты содержат оба антигена. С целью исключения аутоагглютинации необходимо провести контрольную процедуру: в этом случае смешивают 0,1 миллилитр изотонического раствора хлорида натрия и 0,01 миллилитр исследуемой крови. Если реакция агглютинации отсутствует, определяется IV группа.

Расшифровка результатов к содержанию ↑

Определение резус-фактора

Определение резус-фактора к содержанию ↑

Препараты цоликлонов

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D.

Существуют три разновидности:

Обычный анти-D-цоликлон. При его добавлении развивается реакция непрямой агглютинации;
Супер. Вызывает прямую агглютинацию;
Препарат анти-D-микс, имеющий в составе компоненты обычного и супер цоликлона анти-D). С их помощью можно как выявить группу крови, так и определить резус-принадлежность крови.

Как определить группу в случае неверной трактовки результатов анализа

Где можно провести анализ?

Источник: http://moyakrov.info/blood/tsoliklony-opredelenie-gruppy-krovi-rezus-faktor

Определение группы крови цоликлонами

Определение группы крови и резус-фактора играет основополагающую роль в случаях, когда речь идет о спасении жизни человека. Именно по этой причине подобное исследование проводят всем пациентам в предоперационный период, беременным женщинам перед родами и во многих других ситуациях, которые могут потребовать срочного переливания. Существует несколько способов определения группы крови с использованием разных лабораторных реагентов, и один из них основывается на применении химических веществ под названием цоликлоны. Что же представляет собой определение группы крови цоликлонами и как проводится процедура?

Определение группы крови цоликлонами

Для чего проводится анализ?

Группа и резус-фактор – генетически обусловленные характеристики крови, которые наследуются от родителей и остаются неизменными на протяжении всей жизни человека. Классификация групп крови осуществляется, исходя из определенного набора биохимических параметров и состава антигенов, и насчитывает 4 основных группы. Переливание пациенту крови несовместимой группы или с другим резус-фактором несет с собой смертельную опасность – иммунная система начинает вырабатывать антитела против чужеродных клеток, которые атакуют и разрушают их. Именно по этой причине в ситуациях, которые несут с собой риск обширной кровопотери, необходимо точное определение принадлежности крови и резус-фактора как у донора, так и у реципиента.

Таблица групп крови и резус-факторов

Что такое цоликлоны?

Цоликлоны – это антитела, которые получают посредством технологий генной инженерии. Обычно для получения цоликлонов берутся лабораторные мыши – животным вводится специальный препарат, после чего производят забор жидкости из брюшной полости – именно она и содержит необходимые для проведения анализа вещества. С научной точки зрения, цилоклоны можно отнести к иммуноглобулинам М, которые способны реагировать с агглютиногенами – специфическими клетками, присутствующими на поверхности красных кровяных телец.

Именно агглютиногены, а точнее их типы, и служат основой для классификации групп крови: так, у носителей первой группы данные вещества отсутствуют, у обладателей второй имеются агглютиногены типа А и т. д. В ходе проведения процедуры определенные цоликлоны вступают в реакцию с разными типами агглютиногенов, что и позволяет определить группу крови пациента.

Группа крови и резус фактор – фото

Цоликлоны выпускаются в виде жидкости, разлитой во флаконы по 5 мл или 10 мл, причем каждый ее тип имеет специфические характеристики:

анти-А представляет собой жидкость красноватого цвета;
анти-В имеет синий оттенок;
анти-АВ (анти-D) – бесцветный прозрачный раствор.

Преимущество цоликлонов перед другими химическими реагентами заключается в том, что они не требуют специальной подготовки к анализу и позволяют провести его в кратчайшие сроки. Кроме того, они не являются клетками человеческого организма, поэтому инфекционное заражение медперсонала при контакте с веществами полностью исключено.

Определение групп крови по системе АВ0 при помощи цоликлонов Анти-А и Анти-В

Как проводится исследование?

Для определения группы крови с использованием цоликлонов необходима плоская ровная поверхность (планшетка), смоченная водой, набор химических реагентов и пробы биологической жидкости, причем специалист может использовать любую кровь: капиллярную, венозную, замороженную и т. д.

Стороны планшета помечают, чтобы не перепутать, на какую из них будет нанесен тот или иной тип цоликлонов.

Процедура определения группы крови цоликлонами

Планшет для определения группы крови

Важно! Спустя несколько минут наступит реакция, по которой можно с высокой точностью определить принадлежность крови к определенной группе.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов процедуры проводится визуально – жидкости либо полностью соединяются, либо наступает склеивание (агглютинация) кровяных телец, вследствие чего биоматериал сворачивается и в нем образовываются мелкие хлопья.

Расшифровка осуществляется следующим образом:

если реакция отсутствует во всех образцах биоматериала, его можно причислить к I группе (это означает, что агглютиноген в клетках крови отсутствует);
вступление кровяных клеток в реакцию с цоликлоном анти-А свидетельствует о том, что кровь исследуемого человека относится к II группе;
склеивание эритроцитов с цоликлоном анти-В – признак III группы крови;
если биоматериал вступил в реакцию со всеми веществами, то он принадлежит к IV группе.

Исследуемая кровь группы О(I)

Для проверки точностии результатов и определения резус-фактора к образцам биоматериала добавляют цоликлон АВ – если произошла реакция агглютинации, он в крови определяется как положительный (отсутствие склеивания эритроцитов говорит об отрицательном резус-факторе). Чтобы исключить заболевания, при которых агглютинация происходит при контакте с любыми раздражителями, капля крови пациента смешивается с физраствором. В случаях, когда визуально определить результат невозможно, анализ переделывают, а образцы рассматривают под микроскопом.

Таблица. Реакции разных групп крови с цоликлоном анти-А и анти-В.

Цоликлон Анти-B флакон-капельница

Что следует учитывать при проведении анализа?

Чтобы результат анализа был максимально достоверным, при проведении процедуры необходимо соблюдать ряд условий:

реагенты должны храниться в холодном месте при температуре +2-8 градусов во флаконах с плотно закрученной крышкой (в случае нарушения правил хранения они быстро теряют свои свойства);
для проведения анализа нельзя использовать цоликлоны с истекшим сроком хранения (он составляет около 30 дней) или жидкости, которые содержат осадок, хлопья или мусор;
исследование выполняется в хорошо освещенном помещении при температуре воздуха не ниже +15 и не выше +25 градусов, причем в нем не должно быть грязи, пыли и других факторов, способных исказить результат;

Температура воздуха во время процедуры должна соответствовать

Процесс определения группы крови

Продолжительность реакции должна составлять не менее 3 минут, а при сомнительном результате время наблюдения за образцами биоматериала следует продлить до 5 минут. Однако по истечении 10 минут может произойти подсыхание биоматериала и естественное выпадение эритроцитов в осадок, поэтому доверять такому исследованию не стоит.

Что может повлиять на результат?

Цоликлоны чувствительны к факторам окружающей среды, соответственно, при проведении исследования необходимо соблюдать температурный режим и правила гигиены – помещение должно быть чистым и сухим, а отдельные образцы крови не должны контактировать друг с другом. Кроме того, при некоторых патологиях кровь человека способна менять свои характеристики, вследствие чего проведение исследования существенно усложняется. Так, при дисфункции печени, селезенки, септических процессах и обширных ожогах у пациентов наблюдается так называемая панагглютинация крови – эритроциты выпадают в осадок даже при реакции с физраствором. У больных лейкозом и новорожденных младенцев наблюдается иная картина – кровяные тельца не реагируют на раздражители, из-за чего отследить реакцию склеивания становится невозможно.

Что влияет на результаты процедуры

Обратите внимание! Кроме того, у близнецов, людей с пересаженным костным мозгом или у тех, кто перенес неоднократное переливание крови, в биологических жидкостях уживаются разные типы эритроцитов – соответственно, при проведении анализа наблюдаются непредсказуемые результаты. Для определения группы в вышеперечисленных случаях требуются дополнительные лабораторные анализы с использованием специального оборудования.

Анализ с использованием цоликлонов – один из наиболее простых и точных способов определения группы крови человека. При соблюдении всех правил и условий проведения процедуры вероятность ошибочного результата сводится к минимуму, поэтому химические реагенты данного типа применяются практически во всех современных лабораториях.

Видео — Определения групп крови с помощью цоликлонов

Источник: http://med-explorer.ru/serdechno-sosudistaya-sistema/pervaya-medicinskaya-pomoshh/opredelenie-gruppy-krovi-coliklonami.html

Алгоритм определения группы крови цоликлонами

В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность. Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.

Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции. Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур. Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.

Состав крови различных групп крови

Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».

Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.

Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.

Выделяются следующие группы крови по составу:

I (0) – ά, β — поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов;
II (А) – β — на поверхности имеется антиген А и антитело β;
III (В) – ά — поверхность содержит В с антителом типа ά;
IV (АВ) – 00 — поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.

Определение групп крови

Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.

Методы определения

Стандартный метод

Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.

Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.

Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система — посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.

Разведение производится так:

В пробирку, содержащую 1 миллилитр 0.9 %-го раствора пищевой соли, необходимо добавить 1 миллилитр плазмы. Раствор тщательно перемешать.
Затем пипеткой отбирают полученный раствор плазмы в объеме 1 миллилитр. Добавляют его в пробирку, которая содержит изотонический раствор. Так необходимо достигнуть разведения плазмы с соотношением 1 к 256. Применение других разведений несет риск возникновения диагностической ошибки.

Непосредственно исследование проводится таким образом:

На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.

к содержанию ↑

Правила расшифровки результатов

Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.

Видео: Определение группы крови и резус-фактора

Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) — определение первой группы;
Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II — определение второй;
При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы — определение III;
Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной — определение IV.

Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.

В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.

Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.

На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.

Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.

Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:

Источник: http://moyakrov.info/blood/opredelenie-gruppy-krovi

Как проводится определение группы крови цоликлонами

Содержание

Определение группы крови цоликлонами сегодня считается одной из самых простых техник анализа принадлежности крови пациента к той или иной группе. Знать группу крайне важно – это значимое исследование, проводимое всем пациентам, которым назначены хирургические операции. В обязательном порядке делают определение группы крови и резус-фактора военнослужащим, беременным матерям и других людям, для которых может стать необходимым срочное переливание донорской крови.

Принцип действия

Рассматриваемые вещества представляют собой специфические реагенты, которые применяют в анализе человеческой крови на групповую принадлежность и выяснении резус-фактора. Свое название они получили по месту разработки: реагенты были созданы в Москве, в стенах ЦОЛИПК – Центрального Ордена Ленина Института Переливания крови. Ранее использовались другие, существенно более трудоемкие и сложные техники диагностики, но появление цоликлонов позволило исключить их, увеличив скорость анализа.

Чтобы понять, что представляют из себя цоликлоны, механизм их работы, нужно уяснить разницу между группами человеческой крови. Таковые различаются присутствием (или, наоборот, отсутствием) специфических веществ – агглютиногенов, на поверхности красных кровяных телец. Агглютиногены делятся на типы, обозначаемые латинской A и латинской B.

Таблица соответствий:

I группа. Ее носители не имеют агглютиногенов, по этой причине ей присваивают цифровое значение 0.
У ее обладателей имеется агглютиноген типа А, и эта группа также обозначается данной буквой.
III группа. Носители ее имеют на поверхности эритроцитов агглютиногены типа B, буквенное обозначение этой группы аналогично.
IV группа характеризуется содержанием обоих типов веществ, и ей присвоен буквенный шифр AB.

Именно на этом различии базируется определение групп крови с помощью цоликлонов. Они представляют собой особые жидкости, в составе которых есть вещества, способные реагировать с определенным типом агглютиногенов. Проба крови при этой реакции сворачивается. К примеру, цоликлон, реагирующий на агглютиноген типа А, носит имя Анти-А.

Цоликлон Анти-В реагирует, соответственно, на B-агглютиноген, а анти-АВ содержит смесь всех веществ и служит в качестве контрольного, когда нужно подтвердить или опровергнуть результат предыдущего исследования.

Анти-А выпускается в виде красной жидкости, анти-В – синей, анти-АВ разливается в тару как бесцветная субстанция. Все они поставляются либо во флаконах из стекла, либо в сосудах из пластика со встроенной капельницей, для упрощения работы с ними.

Как проводится анализ

Для определения группы крови методом цоликлонов не требуется какое-либо специальное оборудование: достаточно иметь чистую плоскую поверхность (планшет или тарелку), набор цоликлонов и две пробы крови испытуемого. Годится как свежевзятая из вены/пальца кровь, так и законсервированная ранее. Перед исследованием стороны рабочей поверхности (планшета и тд.) помечаются, чтобы не перепутать, на какую сторону будет наноситься тот или другой цоликлон.

Далее приступают к анализу. На левую и правую стороны наносят по капле цоликлона: анти-А – слева, анти-В – справа. К жидкостям добавляют по капле крови, в соотношении 2 части на 10 частей реагента. Далее поверхность легонько покачивают, чтобы кровь смешалась с веществом, но пробы с разных сторон планшета не перемешались друг с другом.

Через несколько минут можно наблюдать результат: кровь либо смешается с цоликлоном, либо произойдет ожидаемая агглютинация, когда кровь станет сворачиваться.

По увиденному интерпретируют полученный результат диагностики:

отсутствие реакции на цоликлоны говорит о принадлежности к I группе;
сворачивание наблюдалось в пробе с Анти-А – II группа;
в пробе с анти-В – III группа;
если свернулись обе пробы, группа крови — IV.

Для надежности, при подозрении на реакцию A+B проводят дополнительный анализ группы крови с помощью цоликлонов, вводя пробу в раствор с цоликлоном Анти-АВ. Если наблюдалась реакция, результат предыдущей диагностики подтверждается.

Для полного исключения вероятности склейки эритроцитов, что может проявляться в пробах крови на фоне определенных заболеваний и не зависеть от введения цоликлонов, кровь пациента смешивают с простым физраствором. Если реакция отсутствует, подтверждается IV группа.

Особенности анализа

Определение группы крови с помощью данной техники обладает довольно высокой точностью. Существует некоторая вероятность ошибок, но большинство из них вызывается неточностями и ошибками в процедуре проведения.

Чтобы исключить этот фактор, нужно принимать во внимание следующее:

Хранение цоликлонов допускается только в холодильнике, в диапазоне температур от 2 до 7 градусов. Вскрытую упаковку можно хранить до 3 дней, но она должна быть плотно закупорена. Если не соблюдать это правило, свойства реагентов существенно меняются, и результаты искажаются. Запрещено применять цоликлоны, чей срок годности истек, и такие реагенты, которые хранились неправильно.
Условия проведения диагностики предполагают хорошее освещение и температуру в лаборатории в диапазоне 15-25 градусов. Если ситуация вынуждает делать анализ на жаре, планшет, где будет проводиться реакция, следует охладить.
Нельзя забывать, где на планшете находится тот или иной цоликлон, именно с этой целью подписываются его стороны. Хотя цвета исходных реагентов различны, смешиваясь с кровью, они приобретают примерно схожий оттенок, и их легко перепутать.
Нужно соблюдать приведенное ранее отношение объемов крови, вводимой в реагент, к самим цоликлонов.
Нельзя смешивать жидкости из разных проб. Когда смешение все же случилось, диагностику проводят снова.
Палочки из стекла, которые применяют для перемешивания проб, должны быть свои для каждой отдельной капли.

Источник: http://boleznikrovi.com/gruppa/opredelenie-gruppy-krovi-tsoliklonami.html

Определение группы крови цоликлонами

Для чего проводится анализ?

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ: Лучшая группа крови

Таблица групп крови и резус-факторов

Что такое цоликлоны?

Группа крови и резус фактор – фото

анти-А представляет собой жидкость красноватого цвета;
анти-В имеет синий оттенок;
анти-АВ (анти-D) – бесцветный прозрачный раствор.

Определение групп крови по системе АВ0 при помощи цоликлонов Анти-А и Анти-В

Как проводится исследование?

Стороны планшета помечают, чтобы не перепутать, на какую из них будет нанесен тот или иной тип цоликлонов.

Процедура определения группы крови цоликлонами

Планшет для определения группы крови

Интерпретация результатов

Расшифровка осуществляется следующим образом:

если реакция отсутствует во всех образцах биоматериала, его можно причислить к I группе (это означает, что агглютиноген в клетках крови отсутствует);
вступление кровяных клеток в реакцию с цоликлоном анти-А свидетельствует о том, что кровь исследуемого человека относится к II группе;
склеивание эритроцитов с цоликлоном анти-В – признак III группы крови;
если биоматериал вступил в реакцию со всеми веществами, то он принадлежит к IV группе.

Исследуемая кровь группы О(I)

Таблица. Реакции разных групп крови с цоликлоном анти-А и анти-В.

Цоликлон Анти-B флакон-капельница

Что следует учитывать при проведении анализа?

реагенты должны храниться в холодном месте при температуре +2-8 градусов во флаконах с плотно закрученной крышкой (в случае нарушения правил хранения они быстро теряют свои свойства);
для проведения анализа нельзя использовать цоликлоны с истекшим сроком хранения (он составляет около 30 дней) или жидкости, которые содержат осадок, хлопья или мусор;
исследование выполняется в хорошо освещенном помещении при температуре воздуха не ниже +15 и не выше +25 градусов, причем в нем не должно быть грязи, пыли и других факторов, способных исказить результат;

Температура воздуха во время процедуры должна соответствовать

Процесс определения группы крови

Что может повлиять на результат?

Что влияет на результаты процедуры

Видео — Определения групп крови с помощью цоликлонов

Источник: http://med-explorer.ru/serdechno-sosudistaya-sistema/pervaya-medicinskaya-pomoshh/opredelenie-gruppy-krovi-coliklonami.html

Веками ученые пытались узнать о человеческом организме как можно больше и научиться исцелять больных от любой болезни. Одним из важных параметров является определение группы крови цоликлонами. Медицина выделяет у людей всего четыре группы крови не зависимо от половой или расовой принадлежности. Иммунологические признаки, которые и составляют основное различие по группе эритроцитарных антигенов, передаются по наследству.

Что такое цоликлон

Определение группы крови с помощью различных лабораторных реагентов стандартный метод исследований. Информация группе крови крайне важна, особенно в тех случаях, когда человеку нужна экстренная помощь. Перед хирургическим вмешательством обязательно определяется тип индивидуальных антигенных характеристик человека. Та же процедура является обязательно для военнослужащих (информация указывается на форме), для женщин перед родами и т.д.

Для осуществления лабораторного исследования не требуется много времени, достаточно наличие всех необходимых химических веществ (цоликлонов) и простого оборудования.

Подготовка к процедуре

Определение групп крови с помощью цоликлонов требует предварительной подготовки и действий согласно установленному алгоритму. Обстановка в помещении, в котором проводится анализ оговорена отдельно. Температура воздуха должна быть не ниже 15 и не выше 25 градусов, иначе результат исследования не может считаться достоверным. В помещении не должно быть пыли, животных, насекомых и других факторов, которые могут физически повлиять на процесс проведения исследования. Также проведение лабораторного анализа требует хорошей освещенности помещения.

При использовании цоликлонов важно держать флаконы плотно зарытыми и не допускать пересыхания реагентов, иначе способность антител к активным действиям заметно снижается. Перед процедурой подготавливается весь необходимый инвентарь. Для проведения анализа потребуется пробирка для биологического образца, планшет для нанесения реагентов, стерильные пипетки и палочки для взаимодействия с биологическими образцами.

Проведения анализа

В современной лабораторной диагностике используется три вида стандартных цоликлонов для определения группы крови и резус фактора. Реагент типа «Анти-А» окрашен в красный цвет, также окрашен и флакон, колпачок или этикетка флакона». Тип «Анти-В» окрашивается синим, а «Анти АВ» не помечается цветным маркером. Производители реагентов выпускают упаковки с цоликлонами 5 или 10 мл. Не допускается использование испорченных или некачественных реагентов.

При наличии видимых дефектов упаковки или появлении хлопьев в жидкости, цоликлон не используют.

Для определения группы крови на специально подготовленную пластину, которая оформлена как таблица, наносят цоликлоны различных типов (А, В и АВ). Каждый из них должен быть подписан. Реагент наносится на специально отмеченную область. Каждый тип цоликлона должен наноситься отдельной стерильной пипеткой.
Рядом с реагентами помещается по 1 капле крови пациента.
Стерильной палочкой реагенты смешивают с биологическим образцом.
Уже спустя несколько секунд можно заметить изменения и происходящую реакцию агглютинации. По правилам наблюдение следует вести в течение 3 минут. После этого можно сделать вывод о результатах исследования.

Как понять результат

Отсутствие какой-либо реакции склеивания во всех образцах означает, что в клетках эритроцитов пациента нет агглютиногена исследуемого типа. Образец крови причисляется к I группе (тип 0).
Если эритроцитарные клетки пациента вступили в реакцию с реагентами типа «Анти-а» и «Анти-АВ», то у пациента II группа крови (тип А).
Заметная агглютинация образца исследуемой крови с цоликлонами тип «Анти-АВ» и «Анти-В» означает, что пациент обладает III группой крови (тип В).
Если кровь пациента вступила в реакцию со всеми химичсекими реагентами, то исследуемый образец принадлежит к IV группе (тип АВ). При определении группы крови с помощью цоликлонов дополнительной проверки не требуется, так как реагенты не содержат добавок, которые могут спровоцировать спонтанную реакцию.

Определение группы крови и резус фактора проводится в лабораторных учреждениях в медицинских учреждениях. Это достаточно простое исследование, которое дает очень полезную и жизненно важную информацию о человеке.

Источник: http://krov.expert/gruppa-krovi/opredelenie-gruppy-tsoliklonami.html