Диагностическая лаборатория в Уфе
Сулемовая и тимоловая проба
Диспротеинемические тесты (сулемовая, тимоловая пробы, проба Вельтмана)
Проба Вельтмана 0,4-0,5 мл р-ра Са (V-VII пробирка)
Коллоино-осадочная реакция Вельтмана, основанная на образовании преципитата белков под влиянием хлористого кальция, может изменяться в двух направлениях: в сторону укорочения коагуляционной ленты (полосы) или ее удлинения.
К удлинению полосы приводят усиление разрастания соединительной ткани в органах (фиброз), пролиферация тканей, ускорение деления клеток, разрушение эритроцитов (гемолитические состояния), повреждение паренхимы печени. Удлинение полосы отмечается при вирусном гепатите, циррозе, острой желтой атрофии печени, малярии, после переливания крови, аутогемотерапии и при многих воспалительных заболеваниях (пневмония, плеврит, туберкулез легких). Удлинение коагуляционной ленты может вызываться и повышением содержания гамма-глобулинов, снижающих коллоидную стабильность сыворотки.
Укороченеи обнаруживается при острых воспалительных и экссудативных процессах, при которых увеличивается содержание альфа- и бета-глобулинов и за счет этого повышается стабильость сыворотки крови, а именно: при экссудативной фазе ревматизма, активном туберкулезе легких, нефротическом синдроме, макроглобулинемии Вальденстрема, альфа-2-, бета-плазмоцитомах, злокачественных опухолях, экссудативном перитоните, некрозах (омертвении, разрушении тканей), острых инфекционных заболеваниях. Крайнее укорочение полосы (отрицательная проба) наблюдается у больных острым ревматизмом.
Сулемовая проба 1,6-2,2 мл дихлорида ртути
Сулемовая проба (реакция Таката — Ара) — это реакция флоккуляции, применяемая при исследовании функции печени. Сулемовая проба основана на способности сывороточного альбумина поддерживать устойчивость коллоидного раствора хлорной ртути и карбоната натрия. При изменении соотношения между белковыми фракциями плазмы крови в сторону глобулинов, которое чаще всего возникает при нарушении функции печени, устойчивость коллоидов нарушается, и из раствора выпадает хлопьевидный осадок. В норме образования хлопьевидного осадка не происходит. Реакция считается положительной, если осадок наблюдается не менее чем в 3 пробирках.
Сулемовая проба не является строго специфической и бывает положительной как при паренхиматозных поражениях печени, так и при некоторых новообразованиях, ряде инфекционных заболеваний и др.
Тимоловая проба 0-5 ед. SH
Тимоловая проба — проба для определения функционального состояния печени. Она основана на свойстве насыщенного раствора тимола в вероналовом буфере с рН=7,8 давать с сывороткой крови помутнение. Степень мутности тем больше, чем выше содержание в сыворотке гамма-глобулинов (при одновременном падении содержания альбуминов). Степень мутности определяют обычно нефелометрически, сравнивая мутность пробы с мутностью серии стандартных суспензий сульфата бария, одну из которых принимают за единицу. В норме мутность равна от 0 до 4,7 единиц. Повышенные показатели тимоловой пробы свидетельствуют о повышении в крови концентрации α-, β- и γ-глобулинов и липопротеидов, что чаще всего наблюдается при заболеваниях печени. В то же время тимоловая проба не является абсолютно специфичной, так как может быть повышенной при некоторых инфекционных заболеваниях и новообразованиях.
опубликовано 22/06/2011 21:09обновлено 22/06/2011
— Анализ крови биохимический
Сулемовая проба (белковый обмен)
Сулемовая проба, как и тимоловая, относится к осадочным пробам, но менее чувствительна и выявляет изменение дисперсности белков (размера и способности находиться в плазме во взвешенном состоянии). При добавлении к сыворотке крови сулемы образуются соли ртути, что сопровождается выпадением в осадок крупнодисперсных частиц и помутнением содержимого пробирки. Если помутнение произошло, то проба считается положительной. Результат оценивается по количеству реагента, вызвавшего осаждение белков. В норме сулемовая проба положительна при использовании 1,5-2,2 мл раствора сулемы. Изменение дисперсности белков выявляются при заболеваниях печени, особенно при хроническом гепатите и циррозе. В этих случаях количество сулемы, необходимое для помутнения сыворотки крови, снижается до 1 мл. При инфекционных гепатитах сулемовая проба резко положительная, затем ее показатель увеличивается. При желтухе, связанной с нарушением оттока желчи, результат пробы в первые дни соответствует норме, затем он становиться все более положительным по мере вовлечения в патологический процесс печеночной ткани. Положительная сулемовая проба может определяться и при ревматических заболеваниях.Осадочные пробы
Применение осадочных проб с диагностической целью основано на изменении коллоидоустойчивости белков плазмы при некоторых заболеваниях, что обусловлено изменением соотношения альбумин/глобулины, либо исключительно сдвигом уровня γ‑глобулинов. В норме белки плазмы крови находятся в виде коллоидов, что обеспечивается зарядом на поверхности белковой частицы и ее гидратной оболочкой. Известно, что нарушение коллоидоустойчивости сыворотки под действием какого‑либо реактива сопровождается сначала коагуляцией (склеиванием), а затем флокуляцией (осаждением). Такое нарушение можно вызывать:
- уменьшением заряда — применение электролитов, например, СaCl2, CdSO4;
- снижением содержания гидратационной воды в коллоидах — при помощи органических растворителей, концентрированных растворов электролитов, спирта;
- увеличением размера частиц — денатурация органическими кислотами, солями тяжелых металлов (соли ртути), при нагревании.
При добавлении к сыворотке некоторых органических веществ (тимола) также наступает преципитация белков, приводящая к помутнению или образованию хлопьев.
В качестве унифицированных методов утверждены тимоловая проба, сулемовая проба, проба Вельтмана.
Тимоловая проба
Принцип
Сывороточные γ‑глобулины и липопротеины осаждаются при рН 7,55 тимоловым реактивом. В зависимости от количества и взаимного соотношения отдельных белковых фракций возникает помутнение, интенсивность которого измеряют турбидиметрически.
Нормальные величины
Клинико‑диагностическое значение
Как и все коагуляционные тесты, тимоловая проба является неспецифической реакцией. Вместе с тем, она гораздо более специфична для функционального исследования печени, чем другие коллоидные пробы и применяется для дифференциальной диагностики заболеваний печени. При поражении паренхимы печени (инфекционный и токсический гепатит) уже в преджелтушной стадии или при безжелтушной форме в 90‑100% случаев тимоловая проба выше нормальных величин. У здоровых индивидов, при остальных заболеваниях печени (механическая желтуха) или нарушении функции других органов тимоловая проба соответствует норме.
Проба Вельтмана
Принцип
При добавлении к сыворотке крови раствора СаСl2 и нагревании снижается коллоидная устойчивость белков.
Нормальные величины.
| Сыворотка | 0,4 – 0,5 мл СaCl2 |
Клинико‑диагностическое значение.
Изменение коагуляционной ленты Вельтмана свидетельствует об изменении соотношения альбумины/глобулины.
Сдвиг вправо или расширение (уменьшение количества затраченного СаCl2) означает повышение содержания глобулиновой фракции, в первую очередь иммуноглобулинов, или снижение альбуминовой: наблюдается при фиброзах, гемолизе, повреждениях печени (болезнь Боткина, цирроз, атрофия), пневмонии, плеврите, туберкулезе.
Сдвиг влево или сужение (увеличение расхода CaCl2) обусловлен увеличением содержания сывороточных α- и β-глобулинов, выявляется при ревматизме, активном туберкулезе, перитоните, нефрозе, острых инфекциях, опухолях.
Вы можете спросить или оставить свое мнение.
- ВКонтакте
Тимоловая проба
Тимоловая проба (тимоловероналовая проба, проба Маклагана) — осадочный тест, благодаря которому оцениваются качественные и полуколичественные изменения плазменных белков. Тимоловую пробу назначают в совокупности с трансаминазами, щелочной фосфотазой, сулемовой пробой. Проба Маклагана позволяет, в первую очередь, оценить белковообразующую функцию печени. Применяется для диагностики поражений печени, системных заболеваний соединительной ткани, заболеваний почек. Для исследования используется сыворотка крови. Методом постановки тимоловой пробы является фотоколориметрический. В норме значение тимоловой пробы составляет 0-5 ед.М.
Тимоловая проба (тимоловероналовая проба, проба Маклагана) — осадочный тест, благодаря которому оцениваются качественные и полуколичественные изменения плазменных белков. Тимоловую пробу назначают в совокупности с трансаминазами, щелочной фосфотазой, сулемовой пробой. Проба Маклагана позволяет, в первую очередь, оценить белковообразующую функцию печени. Применяется для диагностики поражений печени, системных заболеваний соединительной ткани, заболеваний почек. Для исследования используется сыворотка крови. Методом постановки тимоловой пробы является фотоколориметрический. В норме значение тимоловой пробы составляет 0-5 ед.М.
Белки в крови в определенном соотношении представлены низкомолекулярным белком альбумином и глобулинами: альфа-1 и альфа-2-глобулинами, бета-глобулином, гамма-глобулином. Альбумин, альфа-1-глобулин, альфа-2-глобулин и частично бета-глобулин синтезируются в печени. Бета–глобулин и гамма-глобулин в основном образуются в селезенке, костном мозге и лимфатических узлах. Протеины контролируют кислотно-щелочное состояние организма, определяют онкотическое давление крови, участвуют в формировании иммунного ответа. Специальные транспортные белки переносят холестерин, билирубин, железо, гормоны, лекарственные вещества.
При повреждении печени страдает ее синтетическая функция, которая вызывает изменения в соотношении компонентов белка крови. Развивается состояние диспротеинемии. Сами молекулы протеина тоже трансформируются. Могут изменяться их характеристики – конфигурация, молекулярная масса, электрический заряд. Эти изменения ведут к потере коллоидной устойчивости белков. Нарушение этого важного свойства протеинов проявляется в том, что в патологических условиях они начинают слипаться и выпадать в осадок. На этом основан главный принцип тимоловой пробы.
В настоящее время тимоловая проба назначается редко. Ее вытеснили более специфические биохимические исследования. Однако в некоторых областях медицины назначение тимоловероналовой пробы не потеряло актуальности. Инфекционисты назначают пробу Маклагана для диагностики вирусного гепатита и определения стадии заболевания. В гепатологии и токсикологии тимоловую пробу проводят с целью оценки степени поражения гепатоцитов и как индикатор эффективности лечения, направленного на восстановление печеночных клеток.
Показания и противопоказания
Анализ на тимоловую пробу назначают при внезапно возникшей фебрильной температуре, катаральных явлениях (першении в горле, покашливании), симптомах интоксикации (головной боли, ломоте в мышцах и суставах) и диспепсических расстройствах (тошноте, рвоте, горечи во рту, тяжести в подложечной области). Эти симптомы могут свидетельствовать о начальных проявлениях острого вирусного гепатита А. Проведение исследования показано при длительных болях в суставах, лихорадке, изменениях кожных покровов. Такие признаки могут быть проявлениями системной красной волчанки, системной склеродермии, дерматомиозита.
Тимоловероналовая проба является одной из печеночных проб и может назначаться в комплексе с другими биохимическими показателями — билирубином, щелочной фосфотазой, протромбиновым индексом, трансаминазами. При совокупной оценке результатов исследования удается воссоздать полную и реальную картину степени поражения печени.
Тимоловая проба применяется для дифференциальной диагностики желтух. При паренхиматозной (печеночной) желтухе тимоловая проба положительная. При механической желтухе, связанной с обструкцией желчных путей, в 75% случаев она отрицательная. Исследование может быть назначено при отсутствии симптомов в случаях, когда пациент при сборе анамнеза указывал на давние и неизвестные перенесенные заболевания печени, или если при проведении УЗИ печени найдены характерные диффузные изменения. Анализ производится для отслеживания динамики и контроля эффективности терапии острых вирусных гепатитов, малярии, токсических гепатитов, аутоиммунных заболеваний. Противопоказаний к проведению тимоловой пробы не существует.
Подготовка и забор крови
Кровь для проведения тимоловероналовой пробы необходимо сдавать строго натощак в первой половине дня. Ужин должен быть не позже, чем за 8 часов до забора крови (оптимально — не менее 12 часов предварительного голода). Запрещается употреблять соки, газированную воду, кофе и чай. Можно пить чистую воду без сахара.
В процедурном кабинете в условиях стерильности медицинский работник пунктирует вену локтевой ямки или кисти. В обычную пробирку без антикоагулянта или вакутейнер набирают несколько миллилитров крови. Емкость с кровью маркируют, указывая ФИО пациента, время и место забора крови, помещают в специальный контейнер и передают курьеру.
В биохимической лаборатории для проведения печеночной пробы используют 0,1 мл сыворотки крови, которую добавляют в 6 мл веронал-мединалового буфера с кислотностью 7,8. Затем в полученную смесь прибавляют насыщенный раствор тимола, и помещают пробирку в штатив на 30 минут отстояться. Если через полчаса раствор интенсивно помутнел, значит, белковые частицы соединились и образовали крупные глобулин-тимололипидные агрегаты. Далее фотоколориметрическим методом, используя специальный калибровочный график, измеряют степень помутнения раствора. Полагают, что тимоловая проба положительна, если в сыворотке крови снижается количество альбуминов, увеличивается содержание бета-, гамма-глобулинов и бета-липопротеинов.
Проба Маклагана проводится медицинским лаборантом в течение одного часа. Если срочности в получении результата анализа не требуется, то выдачу ответа производят вечером или на следующий день.
Нормальные значения
Тимоловая проба измеряется в единицах Маклагана (ед.М.). Результат считается отрицательным, если степень помутнения составляет менее 4 единиц. Предельная концентрация — 4-5 ед.М. При расшифровке полученных данных необходимо учитывать, что на результаты анализа может повлиять употребление очень жирной пищи перед сдачей крови. Небольшое повышение результатов пробы (на 1-2 единицы) возможно при длительном приеме гепатотоксических лекарственных средств, например антимикотических препаратов или гормональных контрацептивов на основе эстрогенов.
Положительная проба
Тимоловая проба считается положительной, если полученный результат превысил 5 ед.М. В начальной стадии острого вирусного гепатита А (болезни Боткина) повышенные показатели тимоловой пробы можно назвать маркером этого заболевания. Проба Маклагана самой первой из биохимических показателей реагирует на начавшуюся репликацию вируса в клетках печени. Только потом начинают повышаться трансаминазы, билирубин и изменяться другие печеночные пробы.
Повышенные результаты тимоловой пробы определяются при инфекционных и токсических гепатитах, циррозах и опухолях печени. Положительное тестирование свидетельствует о снижении синтеза альбуминов печенью и формировании иммунного ответа путем повышенного образования бета- и гамма-глобулинов в ретикуло-эндотелиальной системе. Как правило, у тех, кто перенес вирусный гепатит, тимоловая проба дает положительный результат в течение 6-12 месяцев после выписки из больницы.
Положительная реакция тимоловой пробы не является строго специфическим показателем для заболеваний печени. Повышенное значение тимоловой пробы выявляется при нефротическом синдроме вследствие заболеваний почек. Причиной является снижение альбуминов в крови за счет протеинурии, гиперлипидемии и повышенного синтеза глобулиновой фракции.
Положительная тимоловероналовая проба отмечается при системных поражениях соединительной ткани, злокачественных новообразованиях, панкреатитах. Это связано с развитием диспротеинемии при этих заболеваниях. Изменение результатов теста выявляется при малярии, мононуклеозе, брюшном тифе.
Лечение отклонений от нормы
Даже незначительное повышение результата тимоловой пробы должно насторожить лечащего врача (терапевта, гастроэнтеролога, токсиколога, инфекциониста). Изменение свойств протеинов и нарушение соотношения компонентов белка в крови является показателем воспалительных процессов. В комплексе с оценкой клинических проявлений, других биохимических показателей и данных инструментальных методов исследования врач может счесть необходимым экстренную госпитализацию пациента в инфекционное отделение.
Источник
