Диагностическая лаборатория в Уфе
Серологические исследования что это такое
Серологические методы исследования в диагностике паразитарных заболеваний
Оглавление
Серологический анализ крови представляет собой способ лабораторного исследования определенных антигенов или антител (специфических белков) в сыворотке крови пациента, основанный на иммунных реакциях организма. Данный метод применяется при диагностике инфекционных заболеваний для выявления наличия антител в крови больного к определенному виду вирусов или бактерий, а также для определения групповой принадлежности крови. В первую очередь для проведения серологического анализа используют биологический материал, собранный от пациента:- сыворотка крови
- слюна
- фекальные массы
Иммунофлюоресцентная реакция – очень трудоёмкий процесс, требующий от специалиста немало времени и ответственности. Начинается реакция с подготовки растворов, затем сыворотки и их контрольные образцы подвергаются титрованию (процесс, позволяющий определить содержание определённого вещества путём постепенного смешивания исследуемого раствора с контролируемым количеством реагента). Подготовленные ранее разведения и их контрольные образцы аккуратно наносятся на предметные стёкла с антигеном. Потом препараты подвергаются инкубации, затем следует их отмывание и высушивание на воздухе. На стёкла с антигеном тонким слоем наносится антисыворотка, после этого производится вторичная инкубация препаратов и, вся предыдущая цепь действий повторяется, завершаясь высушиванием препарата. В результате препарат на предметном стекле подвергается обработке глицерином и исследуется в люминесцентном микроскопе.
Результаты проведённой реакции оцениваются по четырёх бальной шкале, которая характеризуется интенсивностью поверхностного жёлто-зелёного свечения клеток антигенов:+ очень слабое свечение клетки, заметное только на её периферии
++ слабое свечение периферии клетки, но с явно заметным зелёным оттенком +++/++++ яркое свечение зелёного цвета периферии клетки Титром реакции считается такое разведение сыворотки, где не менее 50 % клеток антигена проявляют чёткое поверхностное свечение, то есть результат реакции +++ или ++++. Значение тира реакции от 1/80 до 1/100. Принцип реакции основывается на способности эритроцитов концентрировать антиген на своей поверхности и склеиваться, образуя видимый осадок, при вступлении в контакт со специфическими антителами. Данная реакция очень информативна в диагностике острой формы описторхоза, острой и хронической формы эхинококкоза и трихинеллёза. Иногда РНГА используется для подтверждения результатов ИФА, что помогает повысить достоверность диагностики паразитарных заболеваний. Набор, необходимый для проведения реакции, содержит: (Д+) эритроциты барана, чувствительные к специфическому антигену, (Д-) эритроциты без антигена, (Э) сухие эритроциты барана, (К+) диагностическую агглютинирующую сыворотку – положительный контрольный тест, (К-) нормальная сыворотка человека – отрицательный тест, реагент, применяемый для подготовки раствора, используемого при разведении сыворотки. Постановка реакции происходит в несколько этапов, строго следующих один за другим. Вначале подготавливают необходимые растворы, затем готовят сыворотки и их контрольные образцы, после чего данные образцы наносятся на планшеты. Далее следует нанесение на планшеты сенсибилизированных (Д+) и несенсибилизированных (Д-) эритроцитов барана. Данные препараты инкубируются, и через некоторое время производится учёт результатов. Результаты проведённой реакции учитываются по четырёх бальной системе. Интенсивность реакции зависит от количества осаждённых эритроцитов на дне образованных лунок:– отрицательная реакция, которая характеризуется осаждением эритроцитов на дно лунок в виде небольшого колечка с гладкими краями или «пуговки»
+ слабая интенсивность, для данной реакции характерны небольшие одиночные отложения на дне лунки. Неагглютинированные эритроциты образовывают «маленькое колечко» в центре лунки ++ средняя интенсивность, ей свойственно образование на дне лунки «широкого плотного кольца» из неагглютинированных эритроцитов +++ интенсивная реакция, агглютинированные эритроциты образуют так называемые «зонтики», в центре которых, явно видны кольца, образованные осевшими неагглютинированными эритроцитами ++++ резко интенсивная реакция, в которой агглютинируются все эритроциты и, образуя «зонтики», выстилают дно лунок. Титром данной реакции считают последнее разведение сыворотки, при котором выявляется явная агглютинация эритроцитов не менее +++, то есть при интенсивной или резко интенсивной реакции. Принцип метода заключается в своеобразном взаимодействии антитела с антигеном. Одним из обязательных условий реакции является предварительная фиксация одного из её компонентов, то есть антигена или антитела, на твёрдых планшетах. Затем, при помощи ферментной метки обнаруживают возникнувшие комплексы антиген – антитело благодаря изменению оптической плотности первоначальной смеси (субстрата), что проявляется изменением интенсивности её окраски. ИФА свойственны некоторые преимущества перед остальными серологическими методами, например, данная реакция является наиболее чувствительной, в тестах используются универсальные реагенты, остающиеся стабильными не менее 6 месяцев, автоматизированный процесс учёта результатов реакции. Набор, необходимый для проведения реакции, содержит следующие компоненты: паразитарный антиген, специфические сывороточные антитела, конъюгат, планшета с зафиксированным на ней специфическим паразитарным антигеном, контрольные сыворотки.Постановка реакции ИФА происходит в несколько этапов: вначале производится приготовление необходимых растворов, затем готовятся исследуемые образцы сывороток, а также контрольные сыворотки, позже следует нанесение приготовленных образцов сыворотки и контрольных сывороток на твёрдофазные носители, планшеты инкубируются, промываются и, только после проведённых процедур в лунки планшет вносится конъюгат. Через некоторое время он удаляется путём промывания лунок. На завершающем этапе в лунки вносится субстратная смесь и выдерживается в тёмном месте при комнатной температуре. Оценка результатов проводится автоматически при помощи специальных измерительных приборов, в некоторых случаях допускается визуальный учёт результатов проведённой реакции.
Достоверность и качество методов серологической диагностики зависят от организации проведённого внутреннего и внешнего лабораторного контроля, состоящих из нескольких независимых процедур, предназначенных для оценки качества результатов проведённого анализа.Вернуться к началу страницы
Особенности проведения серологического анализа крови
Серологический анализ крови проводится для того, чтобы узнать, болеет ли человек определенными инфекционными заболеваниями или он абсолютно здоров. Серологическое исследование делают в лаборатории, после выдается расшифровка. Изучение позволяет выяснить, насколько далеко зашла болезнь, определить стадию заболевания. Определение процедуры и подробное описание этапов анализа освещает википедия.
Анализ крови на антитела показан при большом количестве заболеваний. Речь идет о редких и широко распространенных недугах. Известно, что антитела и антигены способны взаимодействовать. Именно эту особенность врачи и используют, проводя исследование.
Если человек болеет, происходит образование иммунных защитных комплексов. Врач, проводя исследование, добавляет антиген или антитело, а потом наблюдает за реакцией. Именно так становится понятно, какая инфекция присутствует в организме. После этого можно смело начинать лечение.
Серологический анализ крови выполняется следующим образом. Врач берет антиген возбудителя заболевания, добавляет его в сыворотку. В результате манипуляций начинается химическая реакция. Врач производит оценку и выдает результат.
Часто возникает ситуация, при которой события развиваются противоположным образом. Речь идет о том, чтобы определить, какое заболевание у человека. Сделать это можно по имеющимся антигенам. Чтобы их выявить, врач берет антитела и добавляет их в кровь.
Если необходимо узнать, какая группа крови у человека, также сдают материал. Врачи обращают пристальное внимание на то, какова свертываемость крови. Возможно, при исследовании будет выявлено отклонение от нормы, тогда, если не начать лечение, последствия могут быть плачевными. Речь идет не только о тромбозе, у человека возможен инфаркт. Кроме того, повышается вероятность инсульта.
Как подготовиться к анализу?
Если вы желаете пройти исследование, то помните о том, что это надо сделать натощак. Анализ крови берут в лабораториях. То, как протекает реакция, врач определяет, используя сыворотку крови. Именно по ней можно понять, как взаимодействуют антигены и антитела. Полученная информация позволяет представить полную картину. Врач, опираясь на результат исследования, назначит наиболее эффективное лечение. Поэтому, если есть возможность, обязательно сдайте материал.
Соблюдайте диету хотя бы в день, предшествующий дню сдачи материала. Не ешьте жирного, сладкое также стоит исключить. Не съедайте слишком много пищи за раз. Алкоголь полностью исключите. Кроме того, не стоит изнурять себя физическими нагрузками. Поскольку стресс может стать причиной искажения результатов, избегайте его перед тем, как сдавать анализ крови.
Какие заболевания определяет анализ?
Если вы думаете, что у вас лямблии, амебиаз, то смело обращайтесь в лабораторию. Исследование материала покажет, если человек болен токсоплазмозом, описторхозом и рядом других заболеваний. Антитела станут сигналом к тому, что стоит начать лечение.
Данное обследование назначают для беременных, при подозрении на сердечно-сосудистую патологию. Варикозное расширение вен, аутоиммунные заболевания — все это показания для проведения исследования.
Кроме того, исследование делают:
- после лечения;
- до и после операции;
- для оценки эффективности лечения.
В урологии и венерологии исследование делают чаще всего.
Что называют нормой?
Если по результатам видно, что антител нет, то это очень хорошо. Инфекция отсутствует. Но такое случается редко, особенно если раньше были все симптомы, указывающие на наличие заболевания. Как правило, серологический анализ часто становится последним подтверждением диагноза.
Обычно анализ крови на антитела делают два раза. Сначала просто определяют, есть ли инфекция. Второй раз анализ на антитела сдают для того, чтобы понять, насколько динамично идет процесс. Если количество связей между антителами и антигенами увеличилось, то идет заражение. Для того чтобы правильно выбрать лечение, врач должен получить больше информации. В такой ситуации проводятся дополнительные химические реакции. Так можно понять, с какой болезнью придется бороться. Кроме того, так определяется стадия болезни.
Результат исследования крови на антитела может быть только повышенным. Нормой является значение на отметке «ноль». Именно по этой причине результат не может быть пониженным.
Серологические исследования что это такое
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Серологические исследования — это методы изучения определенных антител или антигенов в сыворотке крови больных, основанные на реакциях иммунитета. С их помощью также выявляют антигены микробов или тканей с целью их идентификации.
Обнаружение в сыворотке крови больного антител к возбудителю инфекции или соответствующего антигена позволяет установить причину заболевания.
Серологические исследования применяют также для определения антигенов групп крови. тканевых антигенов и уровня гуморального звена иммунитета.
Серологические исследования включают в себя различные серологические реакции:1. Реакция агглютинации.2. Реакция преципитации.3. Реакция нейтрализации.4. Реакция с участием комплемента.
5. Реакция с использованием меченых антител или антигенов.
Реакции агглютинации — это простые реакции склеивания корпускулярных антигенов с помощью антител.
Различают:— прямые реакции агглютинации, которые используют для выявления антител в сыворотке крови больного. Добавление взвеси убитых микробов к сыворотке больного вызывает образование хлопьевидного осадка (положительная реакция склеивания микробов антителами). Используется для определения брюшного тифа. паратифа и др.— реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации основана на использовании эритроцитов с адсорбированными на их поверхности антигенами, взаимодействие которых с соответствующими антителами сыворотки крови больных приводит к образованию фестончатого осадка. Используется для определения беременности, выявления повышенной чувствительности больных к лекарственным препаратам и гормонам;— реакция торможения гемагглютинации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы, которые в результате теряют свойство склеивать эритроциты. Используется для диагностики вирусных болезней;
— реакция коагглютинации — разновидность реакции агглютинации, в которой антигены возбудителя определяют с помощью стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой.
Реакции преципитации — реакции, в которых происходит осаждение комплекса антиген-антитело. Антиген в данном случае должен быть растворимым. Осадок комплекса антиген-антитело называется преципитатом. Реакцию ставят путем наслоения раствора антигена на иммунную сыворотку. При оптимальном соотношении антиген-антитело на границе этих растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Наибольшее распространение получила реакция преципитации в полужидком геле агара (двойная иммуно-иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.). Реакцию используют для определения содержания в крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента.
Реакция нейтрализации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или их токсинов на чувствительные клетки или ткани. При отсутствии повреждающего эффекта смеси антител и микробов или их токсинов на культуру клеток говорят о специфичности взаимодействия комплекса антиген-антитело.
Реакции с участием комплемента
Реакции с участием комплемента основаны на активации комплемента в результате присоединения его к комплексу антиген-антитело. Если комплекс антиген-антитело не образуется, то комплемент присоединяется к комплексу эритроцит-антиэритроцитарное антитело, вызывая тем самым гемолиз (разрушение) эритроцитов (реакция радиального гемолиза). Применяется для диагностики инфекционных болезней, в частности, сифилиса .
Реакция с использованием меченых антител или антигенов
Реакция основана на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками, меченными флюорохромами, способны светиться в ультрафиолетовых лучах люминисцентного микроскопа (реакция иммунофлюоресценции).
В иммуноферментном анализе вместо флюорохромов иммунную сыворотку можно метить ферментом (пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой). Реакцию оценивают по окрашиванию раствора в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфотаза) цвет.
Радиоиммунологический метод — количественное определение антител или антигенов, меченых радионуклидами, с применением аналогичных антигенов или антител.
Методы применяют для выявления антигенов микробов, определения гормонов, ферментов, лекарственных веществ и иммуноглобулинов.
Огород на здоровье
Что такое серологические исследования?
Серологические исследования — это методы изучения определенных антител или антигенов в сыворотке крови больных, основанные на реакциях иммунитета. С их помощью также выявляют антигены микробов или тканей с целью их идентификации.
Обнаружение в сыворотке крови больного антител к возбудителю инфекции или соответствующего антигена позволяет установить причину заболевания.
Серологические исследования применяют также для определения антигенов групп крови, тканевых антигенов и уровня гуморального звена иммунитета.
Серологические исследования включают в себя различные серологические реакции: 1. Реакция агглютинации. 2. Реакция преципитации. 3. Реакция нейтрализации. 4. Реакция с участием комплемента.
5. Реакция с использованием меченых антител или антигенов.
Реакция агглютинации Реакции агглютинации — это простые реакции склеивания корпускулярных антигенов с помощью антител.
Различают: — прямые реакции агглютинации, которые используют для выявления антител в сыворотке крови больного. Добавление взвеси убитых микробов к сыворотке больного вызывает образование хлопьевидного осадка (положительная реакция склеивания микробов антителами). Используется для определения брюшного тифа, паратифа и др. — реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации основана на использовании эритроцитов с адсорбированными на их поверхности антигенами, взаимодействие которых с соответствующими антителами сыворотки крови больных приводит к образованию фестончатого осадка. Используется для определения беременности, выявления повышенной чувствительности больных к лекарственным препаратам и гормонам; — реакция торможения гемагглютинации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы, которые в результате теряют свойство склеивать эритроциты. Используется для диагностики вирусных болезней;
— реакция коагглютинации — разновидность реакции агглютинации, в которой антигены возбудителя определяют с помощью стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой.
Реакции преципитации Реакции преципитации — реакции, в которых происходит осаждение комплекса антиген-антитело. Антиген в данном случае должен быть растворимым. Осадок комплекса антиген-антитело называется преципитатом. Реакцию ставят путем наслоения раствора антигена на иммунную сыворотку. При оптимальном соотношении антиген-антитело на границе этих растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Наибольшее распространение получила реакция преципитации в полужидком геле агара (двойная иммуно-иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.). Реакцию используют для определения содержания в крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента.
Реакция нейтрализации Реакция нейтрализации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или их токсинов на чувствительные клетки или ткани. При отсутствии повреждающего эффекта смеси антител и микробов или их токсинов на культуру клеток говорят о специфичности взаимодействия комплекса антиген-антитело.
Реакции с участием комплемента Реакции с участием комплемента основаны на активации комплемента в результате присоединения его к комплексу антиген-антитело. Если комплекс антиген-антитело не образуется, то комплемент присоединяется к комплексу эритроцит-антиэритроцитарное антитело, вызывая тем самым гемолиз (разрушение) эритроцитов (реакция радиального гемолиза). Применяется для диагностики инфекционных болезней, в частности, сифилиса.
Реакция с использованием меченых антител или антигенов Реакция основана на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками, меченными флюорохромами, способны светиться в ультрафиолетовых лучах люминисцентного микроскопа (реакция иммунофлюоресценции).
В иммуноферментном анализе вместо флюорохромов иммунную сыворотку можно метить ферментом (пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой). Реакцию оценивают по окрашиванию раствора в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфотаза) цвет.
Радиоиммунологический метод — количественное определение антител или антигенов, меченых радионуклидами, с применением аналогичных антигенов или антител.
Методы применяют для выявления антигенов микробов, определения гормонов, ферментов, лекарственных веществ и иммуноглобулинов.
Серологическое исследование крови
Серология
Серологическое исследование крови – базовый анализ в медицинских лабораторных исследованиях. Серологическое исследование крови проводят для распознавания микробных, инфекционных и вирусных заболеваний, а также всех болезней, которые обусловлены нарушениями защитной функции иммунной системы организма человека.
Название серология произошло от двух латинских слов – serum (сыворотка) и logos (знание), буквально это название обозначает учение о сыворотке крови и ее свойствах . Когда говорят о серологии, то обычно имеют в виду раздел иммунологии, который изучает взаимодействие антигенов с антителами сыворотки. Серологическая диагностика базируется на определении специфических антител, которые образуются в процессе иммунного ответа, вызванного проникновением антигена – возбудителя заболевания.
Серологическое исследование крови
Антитела защищают организм от инфекционного или же от любого чужеродного вещества. Они любым способом пытаются обезвредить антиген: растворить его либо склеить .
Область применения серологических реакций весьма широка: они используются для определения групп крови, при переливании крови, для установления специфичности белков (видовой и индивидуальной). Также серологические исследования применяются в эпизоотологии и эпидемиологии для выявления эффективности вакцинации, установления источника инфекции и путей ее распространения, иммунитета у людей и животных.
В основе серопрофилактики и серотерапии лежит реакция между антителами и антигенами. Основные задачи серологии – это разработка методов получения высокоспецифических лечебных и диагностических сывороток, выяснение механизма их действия и оценка их активности.
Серологическое исследование крови весьма информативно для установления причины атипичных пневмоний, болезни легионеров, кишечных инфекций, миокардитов, вирусных гепатитов. Также используют серологические методы для установления точного диагноза при аутоиммунных заболеваниях, когда некоторые ткани в организме человека настолько изменяют свои свойства, что организм пытается от них защититься при помощи образования антител. Именно обнаружение антител подобного рода в сыворотке крови и позволяет правильно диагностировать эти заболевания.
Особой подготовки для серологического исследования крови не требуется. Кровь берут из вены, натощак. Данное исследование является абсолютно безопасным.
Анализ ИФА - цель, результаты
Анализ ИФА (Иммуноферментный анализ сыворотки крови) – это анализ, который опреде.
Группа крови человека
Бывает, что людям необходимо делать переливание крови. Такое случается в экстремальных.
Источники: http://www.km.ru/zdorove/encyclopedia/serologicheskie-issledovaniya, http://nazdorovye.narod.ru/serolog.html, http://cleartest.ru/serologicheskoe-issledovanie-krovi
Комментариев пока нет!- Лечение антибиотиками
- Для беременных и рожающих
- Где-то что-то болит
- Лечимся в домашних условиях
- Что содержится и в каких продуктах
- Раздел гинекологическии
- Применение диет
- Кашель, горло, легкие
- Проблемы женского здоровья
- Проблемы мужского здоровья
- Проблемы здоровья ребенка
- Лечение болезней крови
- Кровеносная система
- Полезные и лечебные свойства. Применение и противопоказания
- Решение проблем с глазами
- Лечение боли, шума, кружения головы
- Лечение и уход за кожей лица
- Старинные и современные народные средства
- Руки и ноги - лечение
- Здоровое сердце
- Здоровые сутавы
- Лечение стука, шуршания, шума, болей в ушах
- Как очистить организм
- Решение проблем пищеварительной системы
- Полезные и вредные продукты
- Таблетки, препараты, лекарства
- Симптомы, причины заболеваний и их лечение
- Популярные вопросы
- Лучение и уход за зубами и деснами
- Что такое, как принимать и чем лечить
| постоянная тяжесть в желудке причины Тяжесть в далее... |
| валерьянка в таблетках как принимать КакИменно.ру как далее... |
| гастрит с повышенной кислотностью лечение Лечение гастрита далее... |
| боярышник лечебные свойства и противопоказания Боярышник – далее... |
Популярные
Еще по теме
| витамин е где содержится в продуктах КРАСИВЫЙ далее... |
| народные методы лечения кашля у ребенка Когда у далее... |
| перед глазами летают черные точки Причины черных точек далее... |
Серологические исследования
Методика взятия проб крови. Кровь для серологических исследований берут из крупных кровеносных сосудов. Перед массовым взятием проб крови из лаборатории завозят необходимое количество стерильных пробирок с ватными пробками. Пробирок заказывают на 5–10 % больше количества животных. На все пробирки для закрепления бирок с надписями надевают резиновые кольца, которые настригают из резиновых трубок нужного диаметра. Бирки должны быть одинакового размера. Для описи проб крови готовят форму в двух экземплярах. Форма описи животных, от которых взята кровь, является единой и изменять ее нельзя. Готовят необходимые инструменты: острые ножницы Купера для выстригания волос, несколько штук в зависимости от размера стада, но не меньше двух; прямые ножницы; иглы для взятия крови. По возможности, игл должно быть столько, сколько животных в стаде, но не менее десяти. Все иглы должны быть острыми, без ржавчины. Перед работой их проверяют, промывают и обязательно стерилизуют кипячением. На тупой конец надевают резиновую трубку длиной 7–10 см.
Кроме указанных инструментов, нужно иметь стерилизатор электрический или простой, в зависимости от условий; шприц Жанэ или резиновую спринцовку (грушу) для промывания игл после взятия крови; посуду для воды (ведра, тазы); обогревательный прибор для стерилизатора – примус, газовую плиту и т. п., если нет электричества. Из медикаментов необходимы: спиртовой раствор йода, вата, бинты, 3 %-й раствор фенола, 70°-й этиловый. спирт (можно гидролизный). При взятии проб нужно следить, чтобы капли крови не попадали во внешнюю среду. Струю крови следует направлять по стенке пробирки, не допуская вспенивания. Пробирка должна быть теплой, что особенно важно зимой. Не следует набирать кровь каплями; такая кровь, как правило, гемолизируется и для исследования непригодна.
После взятия крови и закрепления этикетки пробирку ставят в водяную баню при температуре 30...35 °С на 30 мин. Особенно это важно в прохладное и холодное время года. При извлечении из водяной бани пробирки просматривают для определения характера свертывания крови и отделения сыворотки. Если сгусток плотно прилип к стенке пробирки, его отделяют от стекла, делая обводку тонкой стеклянной палочкой или проволокой. Затем пробирки с кровью помещают в прохладное место для отстаивания сыворотки. После каждой обводки проволоку обтирают ватой и прокаливают на спиртовке. Если в пробирке обнаружен гемолиз, то проба бракуется. Особенно быстро происходит гемолиз в крови свиней, поэтому пробирки с их кровью необходимо особенно тщательно оберегать от действия неблагоприятных факторов (высоких температур, встряхивания и т. п.).
На бирках лучше всего писать простым карандашом. Запись делают в виде простой дроби, в числителе которой помещают порядковый номер, а в знаменателе – кличку (бирку) животного.
В зависимости от вида животных, условий содержания, времени года, типа помещений, где содержатся животные, массовые взятия проб организуются по-разному.
Взятие проб крови у крупного рогатого скота. Кровь берут из яремной вены, желательно утром до кормления животных. Волосы на месте взятия крови выстригают, операционное поле протирают 3 %-м раствором фенола. У каждого животного кровь берут стерильной иглой.
Если на ферме есть раскол или станок, то лучше кровь брать там. Это более удобно, и после работы легче обезвредить место взятия крови. Однако при такой системе работы, даже при привязном содержании животных, требуются большие затраты труда. Поэтому в практике у животных, содержащихся на привязи, кровь чаще берут непосредственно в стойлах. Вену пережимают с помощью жгута. Чтобы капли крови не попадали на пол и в кормушку, резиновую трубку, надетую на конец иглы, перед введением иглы в вену опускают в пробирку.
Молодняк при беспривязном содержании, а также буйных животных при отсутствии станков и расколов для взятия крови фиксируют у столбов. Столб должен быть крепким и гладким. Иногда пользуются коновязями.
При фиксации вокруг столба исключается возможность травмы людей и животных, один человек свободно справляется с животным и, фиксируя, пережимает вену.
Для облегчения работы по взятию проб крови у крупного рогатого скота предложены различные приспособления, однако в производственной практике широкого применения они пока не нашли, так как имеют существенные недостатки. Пробы крови у крупного рогатого скота в комплексах берут в специальных расколах, заканчивающихся фиксационным станком.
Взятие проб крови у овец. Овец для взятия крови прогоняют через раскол, рядом с которым выкапывают траншею глубиной около 1 м (до пояса человека). Ветеринарный специалист находится в этой траншее, и к нему по очереди подводят овец. Яремная вена у овец легко пережимается пальцем. Иногда вместо траншеи делают специальный стол высотой 60–90 см. Овец через раскол загоняют на стол и фиксируют, ветеринарный врач стоит рядом и берет кровь.
Взятие проб крови у свиней. Для взятия проб крови у свиней используют разные методы. Фиксируют животных за верхнюю челюсть с помощью веревочной или кожаной петли. Кровь берут из сосудов уха или хвоста путем прокола или надреза сосуда. В практике чаще всего кровь берут из хвоста, причем в некоторых случаях вместо прокола сосуда отрубают кончик хвоста секачом (ножом для вскрытий) или рассекают его вдоль ножницами. В последнее время нашел применение новый способ взятия крови из хвоста. У фиксированного обычным способом животного левой рукой берут хвост и поворачивают его с таким расчетом, чтобы вентральная поверхность хвоста была обращена направо или кверху. На границе средней и нижней трети хвоста строго посередине остроконечным скальпелем делают прокол всех мягких тканей до позвонка. При этом рассекают кожу, подкожную клетчатку, мышцы и вентральную артерию поперек. После прокола тканей придают хвосту естественное положение и приподнимают нижнюю его треть для того, чтобы операционная рана была открыта. Кровь выделяется равномерной струей. После взятия нужного количества крови место прокола смазывают 5 %-м раствором йода и хвост опускают. В результате сокращения мышц хвоста происходит закрытие просвета прокола и кровотечение за 3–5 мин полностью прекращается.
Свиней при этом способе взятия крови можно фиксировать в расколе, в результате чего значительно повышается производительность труда.
Можно брать кровь и из орбитального венозного сплетения. Этот способ применяется при работе с лабораторными животными, молодняком и свиньями. Он прост, удобен, дает возможность получить нужное количество крови при минимальной затрате времени.
Глубокая лицевая вена в области периорбиты формирует венозный синус, который легко доступен для введения иглы. Для взятия крови можно использовать иглы № 2055, 2079, 2540, 2260, Ананьева или Каспера.
Зафиксированному животному иглу вводят в область наружного (латерального) угла глаза по направлению к противоположной ветви нижней челюсти (угол 40–45°) до упора в кость орбиты. Скос иглы должен быть направлен к орбите (в противоположную сторону от глазного яблока). Затем иглу слегка оттягивают обратно, и кровь обычно идет сразу. Если кровь не пошла, иглу слегка смещают влево или вправо.
Можно вводить иглу и со стороны медиального угла глаза. При этом укол иглы делают через третье веко. Направляют иглу к основанию противоположного уха (к носовой перегородке) сверху вниз. Иглу вводят до упора, затем слегка оттягивают.
После извлечения иглы иногда может появиться несколько капель крови, которые следует убрать тампоном.
При необходимости через сутки взятие крови можно повторить. При таком взятии крови почти никогда не бывает гемолиза. У животных никаких осложнений не наблюдается.
При необходимости получения большого количества крови (10 мл и больше) ее берут непосредственно из полои вены. При этом животное фиксируют за верхнюю челюсть обычным способом и применяют длинную иглу (10–15 см) и шприц. Иглу вводят в вену со стороны подгрудка.
Взятие проб крови у птиц. Кровь у птиц берут при массовых их обработках. Подробно этот вопрос рассматривается при описании болезней птиц.(???)
Взятие проб крови у лошадей. Кровь у лошадей берут из яремной вены. Обычно вену пережимают пальцем, а голову поднимают. При массовых исследованиях для пережатия вены можно пользоваться резиновым жгутом. При работе с табунными лошадьми обязательно строят расколы или станки, так как эти животные могут нанести людям и себе травмы.
Консервирование сыворотки крови. При невозможности сразу отправить кровь в лабораторию сыворотку сливают. В теплое время года сыворотку для лучшей сохранности необходимо законсервировать. Для этого можно использовать 5 %-й раствор фенола на изотоническом растворе натрия хлорида из расчета 1 мл раствора на 9 мл сыворотки (две капли на 1 мл). Можно консервировать сыворотку борной кислотой по 0,05–0,07 г на одну пробирку с пробой (на кончике скальпеля).
Серологические реакции и их роль в постановке диагноза.
Важнейшим достижением иммунологии является внедрение в широкую практику различных иммунологических методов для диагностики инфекционных болезней. Эти методы, получившие название реакций иммунитета, высокоспецифичны, однако следует иметь в виду, что в отдельных случаях могут наблюдаться и групповые неспецифические реакции. Большинство серологических исследований основано на комплементарном, строго специфическом взаимодействии антигена и антитела; они позволяют быстро обнаруживать антигены (в том числе и вирусные) и антитела к ним в жидкостях организма.
Используя серологические реакции, определяют с помощью известного антигена наличие специфических антител и, наоборот, с помощью известного антитела выявляют неизвестный антиген.
Серологические массовые исследования животных дают возможность определить степень распространения зараженности животных, выявить животных с латентной формой инфекции, предупредить ввод в благополучное стадо зараженных животных. Большая роль принадлежит серологическим исследованиям в системе оздоровительных мероприятий при многих инфекционных болезнях.
В последнее десятилетие резко возросла роль серологических исследований в постановке диагноза, особенно при вирусных болезнях. Появилось много новых методов серологических исследований, которые дают возможность получить результат очень быстро (через несколько минут, часов), исключая необходимость выделения возбудителя при высокой специфичности и чувствительности.
Серологический диагноз устанавливают на основании выявления и нарастания титра антител в парных сыворотках. Первый раз для постановки диагноза кровь берут в острой фазе болезни, второй раз через 10–20 дней. Четырехкратное и большее нарастание титра антител при одновременном исследовании парных сывороток считают достаточным для постановки серологического диагноза. Такое исследование особенно важно для эпизоотологии при расшифровке эпизоотических вспышек при многих болезнях (лептоспироз, вирусные болезни, особенно ОРЗ у крупного рогатого скота и свиней). При хронических инфекциях заключение делают по результатам однократного исследования.
Изучение классов 1д позволило установить закономерность их распределения в динамике инфекционного процесса. Установлено, что в первоначальной стадии болезни формируются связанные антитела. Обнаружение их дает возможность ставить диагноз на ранних стадиях болезни.
В эпизоотологии в настоящее время разработаны и находят все более широкое применение иммунологические реакции.
К числу отработанных и широко внедренных в производство относятся реакции: агглютинации (РА), связывания комплемента (РСК), длительного связывания комплемента (РДСК), реакция преципитации (РП), реакция флокуляции (РФ), реакция нейтрализации (РН). В настоящее время разработаны и постепенно внедряются в производство: иммуноферментный метод (ИФМ), метод флюоресцирующих антител (МФА), реакция агглютинации латекса (РАЛ), реакция гемагглютинации (РГА), реакция задержки гемадсорбции (РЗГад), радиоиммунологический анализ (РИА), реакция иммунодиффузии (РИД), радиоиммунологический метод (РИМ), реакция ингибиции нейраминидазной активности (РИНА), реакция иммунной сорбции антител, меченных ферментом (РИСАФ), реакция ингибиции элюции (РИЭ), реакция коагглютинации (РКОА), реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), реакция обратной непрямой гемагглютинации (РОНГА), реакция радиального гемолиза (РРГ), реакция торможения агглютинации латекса (РТАЛ), реакция торможения гемагглютинации (РТГА), реакция торможения непрямой геммагглютинации (РТНГА).
