Главная » Статьи » Кровь на пцр что это

Кровь на пцр что это


Метод ПЦР для анализа крови

ПЦР (Полиразмерная Цепная Реакция) – уникальный в своем роде экспериментальный метод молекулярной биологии. В настоящее время это самый эффективный способ диагностики инфекционных заболеваний различной природы и формы протекания.

Разработка метода полиразмерной цепной реакции началась в 70-х годах прошлого столетия. На основе этих исследований в 80-х годах американский ученый Керри Мюллис сделал открытие, удостоенное Нобелевской премии, которое позволило использовать метод ПЦР в анализах крови в ходе экспериментов над ДНК.

Технология метода ПЦР не так давно «вышла» из стен крупных медицинских лабораторий и в настоящее время широко используется в клинической практике.

Суть метода

Метод ПЦР позволяет производить различные манипуляции с генетическим материалом: многократно клонировать определенные участки ДНК при помощи ферментов, создавать мутации, объединять участки ДНК. Клонирование пораженной микробами ДНК незаменимо в случаях, когда возбудители малочисленны. Размноженный в необходимых количествах генетический материал намного легче поддается анализу и идентификации. Помимо качественной оценки, оценивается также количество инфекционных возбудителей (так называемая вирусная нагрузка) в организме человека, что имеет большое значение при диагностике и лечении хронических инфекционных заболеваний. Чем выше концентрация инфекционных возбудителей в крови, тем выше риск передачи заболевания при контактах с другими людьми. Кроме того, концентрацию вирусов рассматривают как показатель эффективности во время лечения: если она снижается, то терапия производится успешно.

Исследования на основе результатов метода ПЦР широко используются в медицинской и биологической практике. Метод стал незаменимым при диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, а также при исследованиях в области генетики (для клонирования и выделения новых генов, установления отцовства, введения мутаций).

Несмотря на свою новизну, метод ПЦР прошел значительную клиническую апробацию. Высокая эффективность метода основывается на его чувствительности: достаточно мизерных количеств биологического материала и всего нескольких молекул возбудителя, чтобы диагностировать тип и общую картину заболевания. Использование метода позволяет обнаружить некультивируемые, трудно культивируемые или вообще скрыто существующие формы микроорганизмов, вызывающих хронические или латентные формы протекания заболеваний. Огромное преимущество работы с полиразмерной цепной реакцией состоит в том, она позволяет отказаться от выращивания таких микроорганизмов в лабораторных условиях.

Еще одним достоинством метода является скорость получения результатов. Обработка результатов производится автоматически и занимает всего несколько часов, в то время как традиционные методы, в частности посевы, могут занимать от нескольких суток до нескольких недель.

Исследованию методом ПЦР подлежит любой биологический материал: мокрота, слюна, моча, сыворотка, соскоб эпителиальных клеток, мазок, сперма. Предметом нашего рассмотрения станет использование метода в анализах крови.

Как сдавать анализ крови для ПЦР исследований

Подготовка к сдаче ПЦР-анализа крови не требует каких-либо специальных ограничений. Колебания состава крови, которые могут быть вызваны изменением рациона, физическими нагрузками и даже стрессами, не являются показательными для данного исследования. Единственное правило, которому необходимо следовать перед тем, как делать ПЦР-анализ крови, это выдерживание достаточной паузы после приема курса антибактериальных препаратов, поскольку объективная картина распространения возбудителей инфекции в организме может быть смазана.

В силу новизны технологии выполнение ПЦР-анализа крови все еще остается дорогостоящим. Лабораторное оборудование и реактивы для выполнения этого исследования в основном поставляются из Европы и США, поэтому стоимость диагностики одного вида инфекции может достигать тысячи рублей.

Применение ПЦР-анализа крови для диагностики заболеваний

Областью применения метода полиразмерной цепной реакции является диагностика уреаплазмоза, микоплазмоза, вирусных гепатитов В и С, хламидиоза, трихомониаза, кандидоза, герпеса, туберкулеза, бактерий, вызывающих язвенную болезнь и гастрит, папилломавирусов и вирусов иммунодефицита. Поэтому в назначении на обследование указывается тот или иной вид возбудителя: ПЦР-анализ крови на туберкулез, например. Результатами сдачи ПЦР-анализов крови будут выводы о наличии или отсутствии возбудителя, а также его количествах.

Анализ крови методом ПЦР является наиболее распространенной формой диагностики острых и хронических инфекционных заболеваний в их атипичных и вирусных проявлениях. Трудность диагностики подобных заболеваний старыми серологическими методами состояла в том, что обнаружение инфекций производилось по выработанным организмом антителам. Однако состояние больного не всегда позволяет выждать время для выработки антител.

Показательным примером в этом смысле является диагностика туберкулеза. Заражение туберкулезом происходит воздушно-капельным путем. Возбудителем болезни является палочка Коха, поражающая легкие. Симптоматика туберкулеза может быть смазанной, поэтому для ранней диагностики этой болезни проводят всевозможные вспомогательные исследования. С детства нам хорошо известна кожная проба под названием «реакция Манту». В организм вводится доза ослабленных возбудителей туберкулеза, а затем оценивается отклик иммунной системы. Эта проба очень часто вызывает аллергические реакции, которые могут быть ошибочно истолкованы как наличие болезни. Затем, чтобы подтвердить или снять подозрения, врач направляет пациента на флюорографию или анализ мокроты. ПЦР-анализ крови на туберкулез позволяет выявить возбудителя с помощью однократного исследования в короткие сроки с практически стопроцентной гарантией точности без вредоносных воздействий на организм. Кроме того, ПЦР-анализ крови на туберкулез позволяет детализировать особенности заболевания: определить концентрацию возбудителей в биологическом материале, локализовать очаг инфекции, который может быть расположен не только в легких, но и в других органах или тканях.

ПЦР-анализ крови очень эффективен при диагностике вируса иммунодефицита. Эта опасная болезнь не проявляет однозначных симптомов. Поскольку защитные силы организма блокируются, обнаружить в крови реакцию на чужеродный белок практически невозможно. В этих условиях единственным способом верной диагностики становится использование метода полиразмерной цепной реакции, обеспечивающего качественный результат за счет своей гиперчувствительности.

Инфекции являются неотъемлемыми спутниками нашей жизни с самого рождения. Некоторые протекают незаметно и без особого ущерба для здоровья, другие требуют серьезной диагностики и незамедлительного лечения. В таких случаях точность постановки диагноза играет определяющую роль. К сожалению, старые методы лабораторных исследований не всегда обеспечивали достоверность результата.

Анализ крови методом ПЦР в настоящее время зарекомендовал себя как самый надежный и оперативный вид диагностических исследований, не требующий специальной подготовки и способный работать с минимальными объемами информации (в случаях, когда в биологическом материале обнаруживаются единичные возбудители). Незамедлительная сдача ПЦР-анализов крови позволит вам наиболее эффективно победить болезнь. Будьте здоровы!

Анализ крови на пцр что это

Главная » Анализ крови » Анализ крови на пцр что это

Анализ крови на ПЦР – это наиболее современный метод лабораторного исследования помогающий выявить возбудители многих инфекционных болезней. Трехбуквенный вариант – это сокращенная аббревиатура означающая «полимеразная цепная реакция». Именно это название метода и отражает его суть. Предлагаем разобраться более подробно, что же являет собой ПЦР-диагностика и в каких случаях она применяется?

Принцип работы

Суть метода анализа ПЦР заключается в распознавании возбудителей инфекционных патологий путем определения их генетического материала (ДНК или РНК) в пробах, взятых у пациента. Во время исследования образец биологического материала, в котором предположительно находятся ДНК микроорганизмов, помещают в специальный реактор. Далее к этому образцу добавляют специальные ферменты, которые обеспечивают связь с ДНК возбудителя заболевания и которые способны синтезировать его копию. Последний процесс происходит по принципу цепной реакции в два этапа: на первом из одной молекулы ДНК образуются две новые молекулы, а на втором из этих двух молекул образуются четыре новые, и т.д. По окончании нескольких циклов реакции синтеза из одной копии ДНК формируются несколько сотен или даже тысяч копий. Полученное количество копий ДНК возбудителя инфекции можно с легкостью проверить и сравнить с базой данных, содержащей информацию о структуре ДНК разных микроорганизмов.

Материалом для выполнения анализа методом ПЦР может служить:

  • Сыворотка крови, плазма, кровь.
  • Слизь и иные биологические выделения.
  • Моча (необходима первая порция мочи собранная утром).
  • Соскоб эпителиальных клеток (из уретры у женщин и у мужчин, а также из цервикального канала).
  • Мокрота.
  • Биологические жидкости (суставная, плевральная, околоплодная, спинномозговая жидкости, сок простаты, слюна).
  • Биопаты двенадцатиперстной кишки и желудка.

С помощью анализа крови на ПЦР можно диагностировать множество инфекций: хеликобактериоз, гепатит B, C, ВИЧ (СПИД), герпесную инфекцию, туберкулез, папилломавирусную инфекцию, бактериальный вагиноз, трихомониаз, микоплазмоз, кандидоз, хламидиоз, уреаплазмоз.

Достоинства

Безусловно, одно из основных достоинств метода — это его универсальность. Анализ ПЦР помогает обнаруживать любые РНК и ДНК, даже если другие методы остаются бессильными. Причем оборудование, с помощью которого проводится исследование стандартно и абсолютно не зависит от того, где именно и что конкретно нужно найти.

Еще одно достоинство — высокая специфичность (достигает 100%). В образце, направленном на анализ, распознается уникальная последовательность нуклеотидов, типичная лишь для конкретного возбудителя. Кроме того, метод характеризуется высочайшей чувствительностью – можно обнаружить всего одну часть генетического материала возбудителя.

Также при помощи анализа ПЦР определяют наличие самого микроорганизма, а не реакцию организма на его внедрение. Таким образом, еще в инкубационном периоде, когда никаких лабораторных или клинических симптомов болезни не отмечается, появляется возможность безошибочно диагностировать заболевание.

Главное преимущество – это оперативность. Постановка реакции длится всего несколько часов, благодаря чему все исследование, с момента сдачи материала до получения результата, занимает всего один день.

Недостатки

Естественно ПЦР – не идеальный метод, он имеет и некоторые недостатки. Он достаточно высокотехнологичен и требует соблюдения строгих правил оснащения лаборатории. Так, к примеру, в помещении обязательно должен быть установлен специальный фильтр биологической очистки. Это объясняется тем, что в воздухе постоянно находится невероятный коктейль из частиц ДНК различных живых организмов, и во время подготовки к выполнению реакции образец материала может быть загрязнен, а это, в свою очередь, станет причиной «ложного срабатывания».

Еще один недостаток – это отрицательный результат ПЦР-диагностики даже при наличии ярко выраженной клинической картины. Причиной такого явления может быть неправильно взятый материал для исследования. Образец должен брать только квалифицированный врач, следуя всем необходимым инструкциям, которые ему выписывает лаборатория.

Оценивать результаты анализа ПЦР также должен специалист, который назначает лечение конкретному пациенту. Дело в том, что положительный ответ далеко не всегда означает наличие патологии. К примеру, больной пролечился от какой-либо болезни, однако защитная система организма будет еще некоторое время «разбирать на запчасти» погибший возбудитель. Если в этот период сделать -диагностику – результат окажется положительным.

Показания к анализу

Специалисты рекомендуют проводить данное исследование в следующих случаях: дискомфорт при мочеиспускании, резко изменившийся запах и чувство жжения в половых органах, зуд, выделения, необычный характер выделений (консистенция, количество, цвет), случайный половой контакт без использования презерватива.

Также очень важно сделать анализ ПЦР при беременности, чтобы вовремя обнаружить и провести лечение возможного заболевания, тем самым предотвратив развитие серьезных осложнений. Исследование назначается женщинам с большим количеством лейкоцитов в мазке и после перенесенного аборта. Зачастую, анализ ПЦР при беременности проводят во время постановки на учет. Поскольку эта процедура делается не во всех лабораториях и женских консультациях, то врач может выписать направление в частную клинику.

Анализ ПЦР — эффективный и мощный диагностический инструмент, помогающий быстро и точно обнаружить возбудителей многих инфекций. Как правило, его применяют для диагностики именно болезней, передающихся половым путем. В любом случае ограничиваться лишь одним методом нельзя. Желательно комбинировать различные способы диагностики – кроме определения самого возбудителя следует учитывать и иммунный ответ организма (определяется серологическими методами исследования).

dolgojit.net

ПЦР диагностика - анализ на инфекции 🎥

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.

Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в 1983 году разработал Кэри Мюллис (США), за что в 1993 году он удостоен Нобелевской премии в области химии.

ПЦР анализ стал для большинства инфекций своеобразным «золотым стандартом». Большинство специалистов сталкиваются с ним практически ежедневно и не представляют без него постановку окончательного диагноза. ПЦР нередко становится единственной реакцией для выявления активных стадий заболевания в те моменты, когда не срабатывают другие бактериологические, вирусологические, иммунологические методы диагностики.

Преимущества ПЦР-диагностики в современной медицине:

• Непосредственное выявление присутствия возбудителя (а именно, специфического участка ДНК или РНК возбудителя) в исследуемом образце. • Высокая специфичность позволяет определять уникальный участок ДНК или РНК, характерный для конкретного возбудителя, что исключает возможность ложных реакций. • Высокая чувствительность метода ПЦР позволяет обнаружить даже единичные клетки возбудителей (вирусов, бактерий). Чувствительность ПЦР-анализа составляет 10-1000 клеток в исследуемом образце (к примеру, чувствительность иммунологических и микроскопических тестов - всего 103-105 клеток).• Разработка универсальной методики ПЦР для обнаружения различных возбудителей. Объектом для исследования методом ПЦР служит генетический материал (ДНК, РНК) возбудителя. Методика позволяет выявлять несколько возбудителей из одной биологической пробы. • Достаточно быстрое получение результата анализа. Полное исследование проводится за 4-4,5 часа, реже – несколько дольше.

• Возможность обнаружения патогенов до возникновения симптомов заболевания (доклиническая диагностика) и после прошедшей болезни (ретроспективная диагностика). Примером доклинической диагностики будет обследование в инкубационный период (с момента заражения до возникновения жалоб больного), а также латентная инфекция (когда симптомов нет совсем, а есть только лабораторные данные – ПЦР, к примеру). Одним из важных моментов ПЦР-диагностики является проведение ПЦР в архивном материале или биологических остатках, что важно для идентификации личности или отцовства.

В настоящее время ПЦР-диагностика подвергается существенному развитию. Происходит совершенствование самого метода, вновь и вновь появляются новые разновидности ПЦР, на медицинский рынок поступают новые тест-системы для данной реакции. Благодаря этому стоимость ПЦР-исследований с каждым годом становится доступнее для широкого круга пациентов.

На чем основан метод ПЦР

Основой полимеразно-цепной реакции является многократное удвоение (амплификация) определённого участка ДНК или РНК при помощи ферментов в лабораторных условиях. В результате образуется то количество ДНК или РНК, достаточное для визуального анализа. В ходе исследования копируется только тот участок, который подходит под заданные условия, и только в ситуации присутствия его в исследуемой пробе.

Например, материал для исследования, в котором предполагается наличие фрагментов ДНК или РНК возбудителя (слюна, кровь, моча, выделения из половых органов), помещается в специальный реактор (амплификатор). Далее к нему добавляются специфические ферменты, которые связываются с ДНК или РНК патогена, и происходит синтез ее копии. Это копирование идет в несколько этапов по типу «цепной реакции», и в конечном итоге из одной копии генетического материала могут образоваться сотни и тысячи копий. Затем идет анализ и сравнение результата с имеющейся базой данных о строении различных возбудителей. Посредством ПЦР можно не только выявить тип возбудителя, но и выдать количественный результат анализа, то есть как много возбудителей в организме человека.

Метод ПЦР в настоящее время расширяет круг возможностей проводимых исследований: введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК, и получил широкое распространение в медицине, к примеру, для установления отцовства, появление новых генов и прочее.

Какие инфекции можно выявить с помощью ПЦР-диагностики

1) ВИЧ-инфекция (можно выявить вирус иммунодефицита человека ВИЧ-1)2) Вирусные гепатиты А, В, С, G ( РНК-HAV, ДНК-HBV, РНК-HCV, РНК-HGV)3) Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ)4) Цитомегаловирусная инфекция (ДНК-CMV)5) Герпетическая инфекция (ДНК- вируса простого герпеса ВПГ 1 и 2 типа)6) ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз,7) Туберкулез (микобактерия туберкулеза)8) Онкогенные вирусы – папилломавирусная инфекция (вирус папилломы человека (в том числе его онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59)9) Боррелиоз, клещевой энцефалит10) Листериоз11) Кандидоз (грибы рода Candida)12) Хеликобактерная инфекция (Helicobacter pylori)

и другие

Учитывая спектр возбудителей, ПЦР-диагностика активно используется в гинекологической, урологической практике, практике инфекциониста, в пульмонологии, фтизиатрии, гастроэнтерологии, гематологии, онкологии и других.

Материал для исследования и правила его забора

Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК бактерии или ДНК или РНК вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека: слизи, моче, крови, мокроте, соскобе эпителиальных клеток, тканях плаценты, крови, соке простаты, околоплодные воды, плевральная жидкость.

При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), у мужчин и женщин забираются выделения из половых органов, мазок или соскоб из шейки матки, мазок или соскоб из уретры (мочеиспускательного канала), моча.

При обследовании на инфекции (герпетические инфекции, ЦМВИ, мононуклеоз, токсоплазмоз, гепатиты В, С, ВИЧ-инфекция) на ПЦР забирают кровь.

Для диагностики инфекционного мононуклеоза, ЦМВИ, герпетической инфекции забирается мазок из зева, для обследования на ЦМВИ – моча. Нередко для обследования на поражение нервной системы при ряде исследований забирается спинномозговая жидкость.

В пульмонологии материалом служит мокрота, плевральная жидкость.

При обследовании на внутриутробные инфекции – околоплодные воды, ткани плаценты.

Подготовка к сдаче материала и проведению ПЦР-диагностики

Практически все пациенты, которым проводится ПЦР-диагностика, вправе рассчитывать на достоверный, точный и быстрый результат, зависящий в большой степени от возможности лаборатории, профессионализма врача-лаборанта. Вместе с тем, многие не задумываются, что эта самая достоверность во многом зависит и от нас самих, а именно от рекомендаций лечащего доктора, образа жизни и правильности забора материала. При заборе материала требуются условия, исключающие контаминацию (загрязнение) материала и, соответственно, ставящие под сомнение объективность анализа.

Правильная подготовка к сдаче материала не представляет особых сложностей. Существуют следующие рекомендации врачей для пациентов: 

 1) не жить половой жизнью за сутки до сдачи материала;2) кровь для исследования сдается утром натощак (не есть, не пить);

3) при сдаче мочи собирается первая утренняя порция в чистый стерильный контейнер.

Сроки готовности ПЦР-анализа

Окончательный результат готов через 1,5-2х суток после сдачи материала. В некоторых случаях результат готов в первый же день.

Расшифровка результатов ПЦР

Отрицательный результат ПЦР указывает на то, что в исследуемом материале на момент его сдачи не обнаружено никаких следов инфекционных агентов. Большинство случаев показывает отсутствие инфекции, которую пытались найти в исследуемой пробе.

Положительный результат ПЦР указывает на выявление следов инфекции в исследуемой биологической пробе. С большой точностью положительный результат указывает на наличие инфекции в данный момент времени.

Существуют ситуации, когда ПЦР оказывается положительной, а об активной инфекции говорить нельзя – это так называемое «здоровое носительство» без клинических симптомов болезни, которое не требует лечения, но требует динамического наблюдения у врача.  Наблюдается чаще при ряде вирусных инфекций (ВПЧ, ЦМВИ, ВЭБ-инфекция, герпетическая инфекция и другие) в таких материалах как слюна, соскоб цервикального канала, уретры, то есть из местного очага. Однако нельзя забывать, что передача инфекции от носителей здоровым людям возможна, как и возможен  переход в хроническую форму болезни с активацией процесса. Если же ПЦР положительна в крови, то это уже не носительство и требует специфического лечения.

Количественный результат ПЦР оценивается только врачом индивидуально для той или иной инфекции отдельно и не имеет общих градаций. На основании количественного результата ПЦР врач может установить степень активности инфекции и выставить стадию болезни, что безусловно отразится на курсе и дозах назначенных лекарственных средств.

Один из последних волнующих вопросов: насколько точна ПЦР-диагностика?

Для ПЦР анализа существует 3 определения:

1. Точность (с высокой долей вероятности возможно выявление или отсутствие инфекции).2. Специфичность (точность выявления конкретной инфекции).

3. Чувствительность (даже при низком содержании генетического материала возбудителей в исследуемом образце инфекция будет обнаружена).

Полимеразно-цепная реакция практически не выдает ложноположительных результатов (то есть не бывает положительных проб там, где инфекция отсутствует). Ложноотрицательные результаты наблюдаются редко (чаще это связано с отсутствием активной инфекции у человека в данный момент). Например, латентная инфекция, хроническая инфекция вне активности.

Врач инфекционист Быкова Н.И.

Видео о том, зачем и как сдавать анализ ПЦР на инфекции

www.medicalj.ru

Анализ ПЦР

На сегодняшний день анализ ПЦР считается одним из самых достоверных методов диагностики различных инфекционных заболеваний. К тому же метод становится всё более доступным. Благодаря высокому уровню специфичности исключается возможность получения ложных результатов.

Методика проведения анализа

Во время анализа исследуемый материал помещают в специальный прибор. Добавляют ферменты, которые участвуют в образовании генетического материала. Далее происходит многократное копирование ДНК или РНК возбудителя заболевания. От цикла к циклу число копий ДНК возрастает до количества, при котором легко идентифицировать возбудитель.

Анализ крови методом ПЦР наиболее часто используют в клинической практике для выявления инфекционной причины заболевания. Также возможно исследование мочи, мазка из зева и других биологических материалов. У женщин для анализа ПЦР используют выделения из половых органов, мазок из уретры, цервикального канала. При этом важно знать, как подготовиться к анализу ПЦР у женщин, чтобы результат был максимально достоверный. Главное соблюдать нижеперечисленные правила:

  • воздержание от половых актов в течение трех суток перед сдачей анализов;
  • большая часть бактерий может «вымыться» с мочой, поэтому не следует мочиться перед исследованием;
  • не проводить исследование сразу после менструации, необходимо подождать 3-5 дней после ее окончания.

Перед анализом крови особой подготовки нет.

ПЦР – что показывает анализ?

Известно, что анализ ПЦР показывает наличие различных вирусных и бактериальных инфекций. Данный метод также эффективен для выявления скрытых, хронических инфекций. Анализ на ИППП методом ПЦР дает возможность выделить патогенный агент даже при наличии единичных клеток вирусов и бактерий. Стоит отметить, какие анализы ПЦР входят в блок генитальных инфекций, это:

  • хламидия;
  • микоплазмы;
  • уреаплазмы (парвум и уреалитикум);
  • возбудитель гонореи;
  • различные типы вируса папилломы человека;
  • трихомонады;
  • гарднереллы;
  • кандида.

При инфекционных заболеваниях половых органов материалом для ПЦР служит мазок из цервикального канала, уретры и влагалища. К подготовке к зачатию следует подходить с большой ответственностью. При планировании беременности необходимы анализы ПЦР в случае, когда есть подозрения на наиболее распространенные инфекционные заболевания. А при наличии инфицированности беременность лучше отложить. Стоит отметить, что анализы на выявление вышеперечисленных возбудителей необходимо сдать не только женщине, но и мужчине.

Также метод ПЦР позволяет выявить следующие возбудители:

  • вирусы гепатита В и С;
  • микобактерии туберкулеза;
  • ВИЧ;
  • вирусы семейства герпес, в том числе вирус Эпштейн-Барр и цитомегаловирус;
  • хеликобактерная инфекция.
Интерпретация результатов

Расшифровка анализа ПЦР не вызывает сложностей. Обычно результаты анализов ПЦР можно получить следующие:

  1. Отрицательный результат означает, что в исследуемом материале не обнаружено искомого инфекционного возбудителя.
  2. Положительный результат свидетельствует о наличии ДНК или РНК возбудителя. То есть с большой уверенностью можно утверждать, что именно выявленный микроорганизм является причиной заболевания.

В некоторых случаях производят количественное определение микроорганизмов. Это особенно актуально при заболеваниях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами. Так как данные бактерии проявляют свое негативное воздействие лишь при избыточном количестве. Также количественный анализ ПЦР важен для выбора терапевтической тактики и с целью контроля над лечением таких вирусных инфекций, как ВИЧ и вирусы гепатита.

Статьи по теме:
Метод ПЦР - как делается?

Изначально метод ПЦР применялся только в научных целях, сегодня он прочно вошел в практическую медицину, чтобы помогать нам бороться с инфекциями, которые трудно выявить любым другим путем.

Большинство инфекционных заболеваний, передающихся половым путем, раньше врачи определять не умели, если эти болезни не проявляли себя целым букетом симптомов. Сегодня на службе медицины стоит метод ПЦР – от него не спрячется ни один вредоносный микроб.

В организме женщины содержится огромное количество гормонов, но для выявления различных отклонений и заболеваний сдаются лишь некоторые из них. Чаще всего это ФСГ – как и когда его сдают вы узнаете из этой статьи.

Все волнующиеся за свое здоровье женщины хотя бы раз в год должны проходить обязательные медосмотры. Одним из пунктов прохождения гинеколога является сдача анализов крови на гормоны. В частности, та проверяют содержание в организме такого гормона, как ФСГ.

womanadvice.ru

Анализ ПЦР

Благодаря современным методам диагностики специалисты имеют возможность определять широкий спектр возбудителей различных инфекций, что гарантирует в дальнейшем быстрое и эффективное лечение болезни. Одним из уникальных методов выявления инфекции в организме является анализ ПЦР, позволяющий определить не только тип инфекционного возбудителя, но также и количественное присутствие его в организме.  Что собой представляет анализ ПЦР, и какие инфекции могут определяться с его помощью?

Что такое анализ ПЦР?

Анализ методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) представляет собой метод определения различных инфекций высокой точности. Для проведения анализа методом ПЦР используется генетический материал, а именно ДНК или РНК, которые присутствуют в пробах, взятых на анализ.

Для проведения анализа, в зависимости от типа определяемого заболевания, может использоваться биологический материал разного типа, включая кровь, выделения из половых органов, мазок из зева и пр.

Исследуемый материал для анализа ПРЦ помещается в специальный реактор, куда также добавляют ферменты, способные связывать ДНК микроба и создают его копию. В результате нескольких проведенных циклов полученного материала ДНК микроба становится достаточно для того, чтобы определить возбудителя инфекции с высокой точностью. Анализ методом ПЦР позволяет также оценивать эффективность лечения многих хронических инфекций.

Какие заболевания можно определить с помощью анализа на инфекции ПЦР?

Анализ на инфекции ПЦР позволяет диагностировать множество инфекций, причем по результатам анализа ПЦР можно определить и степень распространения инфекции, что очень важно для правильного назначения лечения. Анализ ПЦР назначается для определения возбудителей следующих заболеваний:

  • гепатит В и С, выявляется путем обнаружения в биологическом материале ДНК соответствующего вируса;
  • хламидиоз, выявляется путем обнаружения ДНК  Chlamydia trachomatis;
  • уреаплазмоз, выявляется путем обнаружения ДНК  Ureaplasma urealiticum и Ureaplasma parvum;
  • микоплазмоз, выявляется путем обнаружения ДНК  Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium;
  • кандидоз, выявляется путем обнаружения ДНК  Candida albicans;
  • бактериальный вагиноз, выявляется путем обнаружения ДНК  Gardnerella vaginalis;
  • трихомониаз, выявляется путем обнаружения ДНК  Trichomonas vaginalis;
  • инфекционный мононуклеоз, выявляется путем обнаружения ДНК  вируса Эпшетейна-Барра;
  • туберкулез, выявляется путем обнаружения ДНК  микобактерии туберкулеза;
  • папилломавирусная инфекция, выявляется путем обнаружения ДНК  вируса папилломы человека;
  • ВИЧ (СПИД), выявляется путем обнаружения ДНК вируса иммунодефицита человека;
  • герпесная инфекция, выявляется путем обнаружения ДНК вирусов простого герпеса 1 и 2 типов;
  • хеликобактериоз, выявляется путем обнаружения ДНК Helicobacter pylori.

Анализ ПЦР на гепатит С

Анализ ПЦР на гепатит С позволяет точно определить наличие вируса в крови, из чего делается заключение о наличии данного заболевания у пациента. Сегодня это один из наиболее эффективных методов определения гепатита С. Анализ ПЦР на гепатит С может быть качественным и количественным.

Качественный анализ на гепатит С прямо указывает на наличие вируса в крови пациента. Качественным результатом анализа ПЦР в данном случае может быть «обнаружено» или «не обнаружено». Данный вид теста имеет определенную чувствительность, в пределах 10-500 МЕ/мл. Это означает, что если концентрация вируса в крови будет ниже, то результатом качественного анализа будет «не обнаружено».

Количественный анализ ПЦР на гепатит С позволяет определить концентрацию вируса в крови. Данный показатель обозначают как «вирусная нагрузка», и он представляет собой количество единиц вирусной РНК, обнаруженной в определенном объеме крови. Расшифровка анализа ПЦР в данном случае может выражаться по-разному. В некоторых лабораториях будет указано, например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 106 МЕ/мл. Также могут использоваться и другие единицы изменения —  копии/мл. Пересчитать копии в международные единицы (МЕ) можно по формуле: 1 МЕ/мл = 4 копии/мл.

Для определения степени распространения вируса в организме, можно принять следующие показатели. Если в расшифровке анализа ПЦР присутствует значение вирусной нагрузки в 800 *103 или 800.000 ME/мл, то это говорит о высоком содержании вируса в крови. Очень высокой считается нагрузка, значение которой превышает 1*107 ME/мл.

Анализ ПЦР на хламидии

Для проведения анализа ПЦР на хламидии используется биологический материал в виде соскобов из уретры, осадка мочи, секрета простаты, спермы, соскобов с конъюнктивы. Анализ ПЦР на хламидии подразумевает качественное определение присутствия возбудителя инфекции в материале. Расшифровка анализов ПЦР на хламидии может свидетельствовать о наличии инфекции либо об ее отсутствии. Нормальный результат анализа ПЦР на хламидии должен быть отрицательным. Положительный результат свидетельствует о наличии инфекции в острой стадии заболевания.

Для того чтобы результат анализа ПЦР был достоверным, исследуемым пациентам рекомендуется в течение 3-х дней до сдачи биоматериала воздерживаться от применения любых лекарств, а также от применения средств гигиены, в которых содержатся бактерицидные добавки. Кроме того, до сдачи анализа необходимо воздерживаться от опорожнения мочевого пузыря в течение 2-х часов.

Метод ПЦР на страже здоровья

Сегодня анализ методом ПЦР позволяет ставить точные диагнозы там, где другие анализы дают неточную картину заболевания.  На сегодняшний день это самый быстрый и, главное, самый точный метод диагностики. Метод хорош тем, что позволяет находить различных по своей природе возбудителей в разном биологическом материале. При этом точность выявления не страдает от того, на наличие какого именно возбудителя проводится исследование. В расшифровке анализа ПЦР содержится достаточно информации о том, какая инфекция и в каком количестве присутствует в организме.

www.wjtoday.ru

Анализ ПЦР

Анализ крови на ПЦР – это наиболее современный метод лабораторного исследования помогающий выявить возбудители многих инфекционных болезней. Трехбуквенный вариант – это сокращенная аббревиатура означающая «полимеразная цепная реакция». Именно это название метода и отражает его суть. Предлагаем разобраться более подробно, что же являет собой ПЦР-диагностика и в каких случаях она применяется?

Принцип работы

Суть метода анализа ПЦР заключается в распознавании возбудителей инфекционных патологий путем определения их генетического материала (ДНК или РНК) в пробах, взятых у пациента. Во время исследования образец биологического материала, в котором предположительно находятся ДНК микроорганизмов, помещают в специальный реактор. Далее к этому образцу добавляют специальные ферменты, которые обеспечивают связь с ДНК возбудителя заболевания и которые способны синтезировать его копию. Последний процесс происходит по принципу цепной реакции в два этапа: на первом из одной молекулы ДНК образуются две новые молекулы, а на втором из этих двух молекул образуются четыре новые, и т.д. По окончании нескольких циклов реакции синтеза из одной копии ДНК формируются несколько сотен или даже тысяч копий. Полученное количество копий ДНК возбудителя инфекции можно с легкостью проверить и сравнить с базой данных, содержащей информацию о структуре ДНК разных микроорганизмов.

Материалом для выполнения анализа методом ПЦР может служить:

  • Сыворотка крови, плазма, кровь.
  • Слизь и иные биологические выделения.
  • Моча (необходима первая порция мочи собранная утром).
  • Соскоб эпителиальных клеток (из уретры у женщин и у мужчин, а также из цервикального канала).
  • Мокрота.
  • Биологические жидкости (суставная, плевральная, околоплодная, спинномозговая жидкости, сок простаты, слюна).
  • Биопаты двенадцатиперстной кишки и желудка.

С помощью анализа крови на ПЦР можно диагностировать множество инфекций: хеликобактериоз, гепатит B, C, ВИЧ (СПИД), герпесную инфекцию, туберкулез, папилломавирусную инфекцию, бактериальный вагиноз, трихомониаз, микоплазмоз, кандидоз, хламидиоз, уреаплазмоз.

Достоинства

Безусловно, одно из основных достоинств метода — это его универсальность. Анализ ПЦР помогает обнаруживать любые РНК и ДНК, даже если другие методы остаются бессильными. Причем оборудование, с помощью которого проводится исследование стандартно и абсолютно не зависит от того, где именно и что конкретно нужно найти.

Еще одно достоинство — высокая специфичность (достигает 100%). В образце, направленном на анализ, распознается уникальная последовательность нуклеотидов, типичная лишь для конкретного возбудителя. Кроме того, метод характеризуется высочайшей чувствительностью – можно обнаружить всего одну часть генетического материала возбудителя.

Также при помощи анализа ПЦР определяют наличие самого микроорганизма, а не реакцию организма на его внедрение. Таким образом, еще в инкубационном периоде, когда никаких лабораторных или клинических симптомов болезни не отмечается, появляется возможность безошибочно диагностировать заболевание.

Главное преимущество – это оперативность. Постановка реакции длится всего несколько часов, благодаря чему все исследование, с момента сдачи материала до получения результата, занимает всего один день.

Недостатки

Естественно ПЦР – не идеальный метод, он имеет и некоторые недостатки. Он достаточно высокотехнологичен и требует соблюдения строгих правил оснащения лаборатории. Так, к примеру, в помещении обязательно должен быть установлен специальный фильтр биологической очистки. Это объясняется тем, что в воздухе постоянно находится невероятный коктейль из частиц ДНК различных живых организмов, и во время подготовки к выполнению реакции образец материала может быть загрязнен, а это, в свою очередь, станет причиной «ложного срабатывания».

Еще один недостаток – это отрицательный результат ПЦР-диагностики даже при наличии ярко выраженной клинической картины. Причиной такого явления может быть неправильно взятый материал для исследования. Образец должен брать только квалифицированный врач, следуя всем необходимым инструкциям, которые ему выписывает лаборатория.

Оценивать результаты анализа ПЦР также должен специалист, который назначает лечение конкретному пациенту. Дело в том, что положительный ответ далеко не всегда означает наличие патологии. К примеру, больной пролечился от какой-либо болезни, однако защитная система организма будет еще некоторое время «разбирать на запчасти» погибший возбудитель. Если в этот период сделать -диагностику – результат окажется положительным.

Показания к анализу

Специалисты рекомендуют проводить данное исследование в следующих случаях: дискомфорт при мочеиспускании, резко изменившийся запах и чувство жжения в половых органах, зуд, выделения, необычный характер выделений (консистенция, количество, цвет), случайный половой контакт без использования презерватива.

Также очень важно сделать анализ ПЦР при беременности, чтобы вовремя обнаружить и провести лечение возможного заболевания, тем самым предотвратив развитие серьезных осложнений. Исследование назначается женщинам с большим количеством лейкоцитов в мазке и после перенесенного аборта. Зачастую, анализ ПЦР при беременности проводят во время постановки на учет. Поскольку эта процедура делается не во всех лабораториях и женских консультациях, то врач может выписать направление в частную клинику.

Анализ ПЦР — эффективный и мощный диагностический инструмент, помогающий быстро и точно обнаружить возбудителей многих инфекций. Как правило, его применяют для диагностики именно болезней, передающихся половым путем. В любом случае ограничиваться лишь одним методом нельзя. Желательно комбинировать различные способы диагностики – кроме определения самого возбудителя следует учитывать и иммунный ответ организма (определяется серологическими методами исследования).

Смотрите также