Диагностическая лаборатория в Уфе
Как сделать анализ днк
Анализ ДНК помогает искать преступников и предупреждать рак
В генетической лаборатории можно не только установить родство между предполагаемым отцом и ребёнком. Анализы ДНК помогают находить пропавших детей, раскрывать преступления, выявлять опасные заболевания на ранней стадии, и определять, какой была внешность человека, живущего много веков назад.
В лаборатории полная стерильность. Фото: АиФ / Яна Хватова Нити в прошлое
Генетическая лаборатория «Медикал Геномикс» в Твери — одна из крупнейших в стране. Ежедневно сюда приходят десятки конвертов с биологическими образцами со всей России и стран СНГ. Специалисты устанавливают родство между отцами и детьми, братьями и сёстрами, бабушками и внуками. Родство между людьми можно установить всего за несколько часов. «Если нужно установить родство, например, между дедом и внуком, то одним из подходов является анализ по Y-хромосоме, — объясняет заведующий лабораторией Владислав Заварин. — Она передаётся исключительно по мужской линии. Дед и внук по отцовской линии будут полностью соответствовать. По женской линии передаётся митохондриальная ДНК. Таким образом, можно установить родство напрямую даже через несколько поколений».
Так выглядит конверт для мазков. Фото: АиФ / Яна Хватова Митохондриальная ДНК лучше всего сохраняется в костях и в волосах. Это позволяет провести анализ останков человека, жившего тысячу лет назад и найти его родственниковв современности. По анализу можно будет определить, к какой этнической группе принадлежал человек и составить его приблизительный фоторобот. «Однажды к нам приезжала певица Корнелия Манго, — рассказывает коммерческий директор лаборатории Дарья Попова. — Мы делали ей тест на этническую принадлежность. У неё намешана кровь из разных частей света. В таких случаях можно определить примерную внешность человека: скулы, нос. Также можно узнать, в какой стране зародились гены человека, к какой этнической группе принадлежали его предки».
Лаборант берёт мазок со щеки у заказчика. Фото: АиФ / Яна Хватова Как делают анализ ДНК
В лабораторию обращаются разные люди. Это мужчины, которые сомневаются в верности своих жён, бабушки, подозревающие, что невестка изменяет их сыну, женщины, желающие добиться алиментов от мужей. Часто обращаются состоятельные люди, которых атакуют «голддигершы» — девушки, заявляющие, что имеют ребёнка от известного или богатого человека.
Специалист срезает часть ваты с палочки. Фото: АиФ / Яна Хватова Как правило, анализ ДНК в лаборатории делают за два дня, но при необходимости его можно провести за несколько часов. Начинается всё с того, что в разных городах России у людей, обратившихся в лабораторию, берут соскоб с внутренней стороны щеки с помощью специальной ватной палочки. Многие ошибочно полагают, что генетики берут для исследования слюну, но на самом деле специалистам нужны лишь клетки эпителия слизистой оболочки рта. Часто люди делают такой соскоб самостоятельно, в домашних условиях, затем присылают образец в лабораторию. «Были забавные случаи, — улыбается Дарья, — люди приносили целый пакет жвачек, окурков, воротничков, волосы с расчёски, ногти. Мы говорили им: «Ну почему же вы не позвонили нам, прежде чем это принести?».
Образцы ДНК путешествуют по помещениям через передаточное окно. Фото: АиФ / Яна Хватова Соскоб делается двумя ватными палочками, чтобы при необходимости можно было провести повторный анализ. Это совсем не больно и занимает 1-2 минуты времени. Палочки запечатывают в специальный конверт, на котором указывают имя и фамилию клиента, его возраст и расовую принадлежность. После этого конверт отправляют в лабораторию в Тверь. Здесь образцы регистрируют, присваивая каждому индивидуальный номер, и заносят всю информацию в базу данных. Затем начинается сам анализ.
Маленькая коробочка в руках заведующего лабораторией – и есть препарат ДНК. Фото: АиФ / Яна Хватова Лаборант срезает ватный наконечник с палочки в стерильную пробирку и добавляет специальный реагент, который позволяет выделить из образца ДНК. Полученный раствор доводят практически до кипения на микроцентрифуге. После этого пробирки передают в следующее помещение, где они подвергаются ПЦР — полимеразно-цепной реакции. С помощью этого метода можно найти бактерии и вирусы. В лаборатории соблюдается полная стерильность. В зону ПЦР пробирки поступают через маленькое передаточное окно, чтобы сотрудники не выходили с раствором в коридор. Сотрудники одеты в полностью закрывающие тело халаты и шапочки. Все манипуляции лаборанты совершают в резиновых перчатках. Все эти меры необходимы для исключения вероятности загрязнения образцов.
Все рабочие зоны освещены ультрафиолетом. Фото: АиФ / Яна Хватова У криминалистов всё строже
В лаборатории хранятся ДНК-профили всех сотрудников, а рабочие зоны стерилизуют ультрафиолетом. «В криминалистической лаборатории ещё строже, — объясняет Владислав Заварин. — Там ДНК-анализ делают всем, кто переступил порог лаборатории. Ведь если ДНК какого-то человека попадет не туда, куда надо, он станет подозреваемым в совершении преступления».
Здесь раствор проходит термическую обработку. Фото: АиФ / Яна Хватова При проведении ПЦР в пробирки с образцами добавляются специальные реактивы. Лаборанты устанавливают пробирки в прибор под названием генетический анализатор. Он устанавливает генотипы участников анализа меньше, чем за час. Результаты анализа переносятся в компьютер. Минимальный показатель подтверждения отцовства — 97,5%. Обычно в лаборатории эта цифра выше, чем 99,9999%.
Весь процесс анализа длится два дня. Фото: АиФ / Яна Хватова После проведения анализа образцы ДНК могут храниться в холодильниках лаборатории в течение нескольких лет. Возможно, за эти годы наука шагнёт вперед, и по образцу можно будет получить много новой информации о человеке.
«Мы отстали от Запада на десять лет»
На установлении родства деятельность лаборатории не заканчивается. Генетики помогают следователям в поиске пропавших детей. Например, в семье пропал ребёнок, а где-то на дороге нашли носовой платок. Специалисты лаборатории за несколько часов сделают анализ ДНК. Если будет установлено, что платок принадлежит пропавшему ребёнку, значит, следствие на верном пути. Первые 48 часов с пропажи ребёнка называют «золотыми». В течение двух суток возможность найти ребёнка живым очень высока. В полицейской криминалистической лаборатории на такой анализ может уйти несколько недель. Тогда уже практически не будет шансов найти ребёнка живым. Такое промедление происходит из-за нехватки сотрудников, их недостаточной квалификации и устаревшего оборудования. Большая часть российского оборудования позволяет сделать анализ ДНК только по взятой у человека крови.
Раствор становится розоватого цвета. Фото: АиФ / Яна Хватова Недавно в лабораторию обратилась женщина, родственник которой попал в аварию. Он сгорел заживо, и его тело находится в морге уже целых семь месяцев. Женщина в отчаянии: она не может похоронить тело, пока не закончится экспертиза. Когда это произойдёт, непонятно: на экспертизу огромная очередь. В тверской лаборатории экспертизу могут провести всего за два дня.
Лаборант вводит в раствор препарат ДНК. Фото: АиФ / Яна Хватова «Российская генетика пока что сильно отстаёт от Запада, по меньшей мере, на 10-15 лет, — говорит Дарья Попова. — Это очень много. Выпускники наших вузов зачастую не изучают последние достижения в области генетики». Лучше всего генетика развита в Англии. Там ДНК-анализ делают всем людям, которые хоть раз привлекались за какое-либо нарушение и заносят его в базу. Если в будущем человек совершит преступление, его личность сразу же будет установлена. В России же ДНК берут только у самых кровожадных преступников — насильников и убийц, которые и так до скончания века не выйдут из тюрьмы. Также в Англии берут ДНК у детей и стариков, страдающих проблемами с памятью. Образец хранится в лаборатории. Если человек потерялся, специалисты возьмут у него образец ДНК и сравнят с лабораторным. На Западе активно развивается поведенческая генетика, которая позволяет проследить, как по наследству передаются привычки и характер человека, его вкусовые пристрастия. ДНК-исследования проводят даже на мухах. В нашей стране этим никто не занимается.
В лаборатории самое современное оборудование. Фото: АиФ / Яна Хватова Починить гены пока невозможно
Лаборатория в Твери оснащена самым современным оборудованием. Однако даже оно не всесильно. Существуют разные виды генетического анализа — на родство, на определение риска опасных заболеваний у человека, на его этническую принадлежность, на наличие патологий у ребенка на ранних сроках после зачатия. Для некоторых анализов нужно разное оборудование. Однако наука не стоит на месте: уже появились генетические анализаторы, которые делают всё, что сегодня умеет наука.
После того как лаборанты высчитают точный процент родства, специалист может составить заключение и отправить его заказчику. Фото: АиФ / Яна Хватова В скором времени в лаборатории начнут проводить исследования по медицинской и перинатальной генетике (исследования эмбриона). Уже сейчас по ДНК можно узнать генетический паспорт здоровья человека: какая патология ему грозит и как её избежать. Специалисты могут выявить у человека риск заболевания раком, передающимся по наследству. А взяв кровь беременной женщины, можно увидеть все аномалии ребёнка — от синдрома Дауна до других генетических нарушений. К сожалению, устранить эти заболевания современная наука пока не может. «Сейчас ведутся разработки по устранению и лечению генетических дефектов, — рассказывает заведующий лабораторией. — Говорить о больших успехах в этой области пока рано, но мы стоим на пороге очередной генетической революции».
Цепочка ДНК из 16 фрагментов. Фото: АиФ / Ксения Железнова Ещё один российский центр ДНК-исследований действует в Самаре — здесь специализируются на медицинской генетике. К врачам больницы им. М. И. Калинина обращаются, чтобы спрогнозировать развитие заболеваний и проверить совместимость со своим избранником.
Медико-генетический центр больницы им. М. И. Калинина. Фото: АиФ / Ксения Железнова Генетическая совместимость супругов
«К нам в клинику приходят не более двух пар в месяц — не так много, как хотелось бы. К сожалению, не все врачи знают, что данный анализ весьма информативен, поэтому не применяют его в обследовании», — говорит биолог медико-генетической консультации больницы им. М. И. Калинина Марина Дубинская. Медик приглашает в генетическую лабораторию, где проводятся такие анализы.
В кабинете находится несколько автоматических аппаратов, с помощью которых выделяется ДНК. Биолог помещает анализы крови в термоциклер.
На экране компьютера появляются три ДНК-анализа мужчины и женщины. По рисункам генетик определяет совместимость супружеских пар по системе Ашеля. Такие данные помогают определить возможность возникновения бесплодия.
«Мы делаем три информативных локуса, которые показывают, совместимы или несовместимы партнёры. Даже в случае отрицательного показателя, беспокоиться не стоит, — объясняет медик. — В первую очередь мы отправляем таких пациентов на диагностику, после чего для них подбирается необходимое лечение».
Аппарат для ПЦР-диагностики (полимеразная цепная реакция). Фото: АиФ / Ксения Железнова Примеров абсолютной несовместимости Марина вспомнить не может. Полная генетическая несовместимость встречается крайне редко. Бывает частичная несовместимость, которую можно регулировать во время планирования беременности, в период зачатия и непосредственно в период беременности.
Биолог Марина Дубинская с цепочкой ДНК пациентов. Фото: АиФ / Ксения Железнова Как правило, все супружеские пары совместимы, но у них могут быть проблемы при зачатии и вынашивании беременности на ранних сроках. В организме матери могут вырабатываться антитела иммунные к антителам ребёнка. В таких случаях до беременности проводится терапия женщин специальными клетками.
«Хороший врач-генетик не только проанализирует результаты анализа, но и предложит ряд процедур, которые позволят и забеременеть, но и благополучно выносить ребенка, — говорит биолог Марина. — У нас есть пациентка, которая заранее позаботилась о будущем своего ребёнка, сделала ДНК-анализ на совместимость с партнёром. Она прошла лечение и сейчас уже на 20-й недели беременности».
Современный ДНК-амплификатор. Фото: АиФ / Ксения Железнова «Знание своего ДНК пригодится»
В медико-генетической клинике многолюдно. Одна из пациенток — жительница Ульяновской области, Екатерина Полякова. В их городе не проводят ДНК-исследования, поэтому она специально приехала в самарскую лабораторию.
«У моих родственников наследственное заболевание — сахарный диабет. Я хочу проверить свою предрасположенность к этой болезни. Страшно, конечно, но это важные для меня знания, в случае положительного результата смогу уже сейчас начать профилактику диабета», — говорит пациентка Екатерина.
Фото: АиФ / Ксения Железнова Биолог Марина направляет девушку в кабинет для анализов. Пациентке предлагают сдать кровь из вены, либо сделать соскоб с внутренней поверхности щеки. Екатерина сдаёт кровь. Дальше врачами выделяется ДНК. Потом ставится реакция амплификации и детектируется результат.
«ДНК можно выделить даже из волос и костной ткани. Но для этого нужны трудоёмкие методы, которые занимают целые дни. А с помощью экспресс-метода через кровь — достаточно легко, быстро и недорого, — говорит медик Марина. — ДНК-анализы сильно удешевились. Единичный анализ стоит в районе 300-500 рублей».
Фото: АиФ / Ксения Железнова Чтобы сдать анализы крови, в медико-генетической консультации выстраивается очередь. Марина объясняет это тем, что интерес людей к своему генотипу увеличивается. Биолог уверена, что знание своего генного набора пригодится в обычной жизни.
«Например, для женщин, принимающих оральные контрацептивы. Примерно 1-2% женщин — носители лейденовской мутации, — говорит медик. — Если такая мутация есть у женщины, которая принимает гормональные контрацептивы, процент осложнений возрастает в 15 раз. Врач, знающий о таком генотипе женщины, сто раз подумает, прежде чем назначать эти препараты пациентке».
Гены — дело личное
В кабинет биолога заходит мужчина, спрашивает о готовности анализов. Марина проверяет базу данных и просит пациента забрать результаты в другом кабинете, ДНК-исследование готово. На составление генного набора было потрачено три дня. Медик возвращается в лабораторию с новыми пробирками и погружает их в бокс.
Биолог Марина Дубинская. Фото: АиФ / Ксения Железнова Марина приводит недавний пример о выдающемся научном достижении: расшифровке полной последовательности митохондриальной ДНК мамонта, жившего более 30 тыс. лет назад.
«Попытки выделить ДНК из сохранившихся в вечной мерзлоте костей и мягких тканей мамонтов предпринимаются в последние годы многими генетиками. Но обычно удаётся выделить лишь короткие фрагменты ДНК, которые трудно объединить в более длинные последовательности. А в этом случае российскому профессору удалось невероятное», — рассказывает биолог Марина.
Биолог говорит, что в генной медицине большую популярность набирает исследование генов, которые отвечают за выносливость и силу. Такие ДНК-анализы способны определить расположенность человека к спорту. Самарская клиника пока что не проводит подобные исследования. В больнице им. Калинина работают в основном с генетическими имультифакториальными заболеваниями. Причиной развития генетических заболеваний является мутация в гене.
Готовые ДНК-исследования. Фото: АиФ / Ксения Железнова Для развития мультифакториальных заболеваний нужна определённая комбинация генов и факторов внешней среды. К ним относится онкология, сахарный диабет, сердечно-сосудистые заболевания и ожирение.
К Марине в кабинет стучится ещё один пациент, который просит не записывать его разговор с биологом на диктофон. Гены — дело личное.
За прошедшее столетие генетики исследовали стволовые клетки, клонировали овцу Долли, расшифровали ДНК мамонта и успешно завершили проект «Геном человека». Полученные в ходе экспериментов данные могут привести к новым революционным способам диагностики, лечения и предотвращения тысяч болезней. Главное, как говорит биолог самарского генетического центра Марина Дубинская, узнать о своём ДНК-наборе раньше, чем проявится заболевание. Убийцу выдаст ДНК. Бороться с преступниками помогают генетики
И в Самаре, и в Твери генетики жалуются на нехватку единого банка ДНК, который мог бы обеспечить учёных данными, которые пригодятся как для развития науки, так и на практике.
Если бы в России был создан единый банк ДНК, содержащий в себе образцы всех жителей, это помогло бы не только находить пропавших людей, но и диагностировать болезни на самых ранних стадиях. Однако в ближайшие годы банк ДНК в нашей стране вряд ли появится.
«Технической сложности в этом нет, — говорит заведующий тверской лабораторией Владислав Заварин. — Единственная проблема состоит в финансировании и в законодательной базе такого банка. На это потребуется очень много денег и времени. Пока что есть научные результаты, которые говорят о том, что лечение генетических заболеваний возможно. Это может произойти довольно скоро. Надеюсь, что в будущем генетика навсегда избавит человечество от онкологии».
❶ Как сделать анализ днк?
В судебной, медицинской, и гражданской практике нередки спорные случаи, требующие установления биологического родства (чаще всего отцовства). Самый точный метод - это анализ ДНК. Учеными установлено, что каждый 13-й мужчина или около 8% отцов воспитывают чужого ребенка. Поэтому популярность подобных исследований постоянно растет. В России в настоящее время проводят 6—8 тысяч исследований в год, а в США – значительно больше - 200 тысяч подобных экспертиз.
Инструкция
Генетическая экспертиза основана на сравнении фрагментов молекулы ДНК (так называемых аллелей в локусах ДНК) между предполагаемым родственником и ребёнком. В каждой клеточке ребёнка половина генетического материала от матери, а другая половина - от отца. Достоверность анализа ДНК при подтверждении родства составляет 99,99%, если при сравнении 16 разных, случайно выбранных участков ДНК совпадают аллели.Если аллели в 3-х из 16 выбранных локусах не совпадают с аналогичными в отцовской ДНК, тогда дается отрицательное заключение о генетическом родстве, что на 100% исключает биологическое отцовство. Современные лаборатории способны проанализировать в каждом образце ДНК от 16 до 40 различных локусов. Такие лаборатории есть практически во всех крупных городах РФ. Биологическим материалом для исследования служит кровь (венозная или капиллярная), буккальный эпителий (соскоб внутренней поверхности щеки) или ногти. Забор материала проводится сотрудником лаборатории или самостоятельно. У несовершеннолетнего ребенка забор биопроб производится только с согласия официального опекуна и в его присутствии. При спорных судебных вопросах взятие биоматериала у предполагаемых родственников осуществляется в присутствии двух понятых - сотрудников лаборатории.
В каждом случае составляется акт-договор на проведение генетического исследования. В случае взятия материала в домашних условиях и самостоятельного забора материала необходимо строго следовать инструкции, то есть соблюсти правила взятия, порядок маркировки, хранения и доставки. Исследование в этом случае проводится анонимно. Окончательный результат ДНК анализа можно узнать через 2 недели, в случае необходимости срочного исследования - через 3 дня. Стоимость планового исследования около 12000 рублей, срочного - около 18000 рублей.
Видео по теме
Распечатать
Как сделать анализ днк?
Статьи медицинского характера на Сайте предоставляются исключительно в качестве справочных материалов и не считаются достаточной консультацией, диагностикой или назначенным врачом методом лечения. Контент Сайта не заменяет профессиональную медицинскую консультацию, осмотр врача, диагностику или лечение. Информация на Сайте не предназначена для самостоятельной постановки диагноза, назначения медикаментозного или иного лечения. При любых обстоятельствах Администрация или авторы указанных материалов не несут ответственности за любые убытки, возникшие у Пользователей в результате использования таких материалов.
Как правильно сделать анализ ДНК на отцовство?
Сделать анализ ДНК на отцовство можно не только для установления отца будущего ребенка. Когда встает вопрос, где сделать анализ ДНК, речь обычно идет об установлении отцовства для выплаты алиментов.
Мама, папа и малыш. Как хорошо, когда в эту формулу не вписывается некто четвертый, а в душу родителей не закрадываются сомнения. По анонимным тестам ДНК, каждый тринадцатый мужчина воспитывает чужого ребенка.
В наше время все больше родителей надеются найти истину с помощью этой процедуры. И перед ними встает вопрос: где сделать анализ ДНК?
Ранее проведение теста было связано с немалыми психологическими травмами для всех участников этой процедуры. Необходимо было с исковым заявлением обратиться в суд, получить решение суда. Затем всем членам семьи приехать в строго определённый судом медицинский центр, сдать кровь из вены и очень долго ждать результата анализа.
Теперь очень многие медицинские центры могут помочь родителям в решении этой серьезной и очень интимной задачи. Анализ можно провести инкогнито или с заверением протестированных лиц.
Бывают ситуации, когда необходимо установить отцовство в рамках судебного процесса. Тогда процедура несколько усложняется. Тест проводится врачом, который не только делает забор материала, но и письменно подтверждает (заверяет) личность предполагаемого отца ребенка.
Для проведения теста ДНК с заверением личностей тестируемых лиц нужно предоставить паспорт или документ, удостоверяющий личность предполагаемого отца; обеспечить присутствие матери или другого лица, которое может подтвердить личность ребенка. Личность ребенка может быть также подтверждена фотографией ребенка в загранпаспорте одного из родителей.
Сделать анализ ДНК на отцовствоможно даже для установления отца еще не родившегося ребенка. Это иногда делается либо для душевного спокойствия одного или обоих родителей, либо для юридических сделок. В том случае, когда тестирование ДНК проводится для юридических сделок, обязательно соблюдаются все юридические процедуры и человек получает в результате все документы, необходимые для любых юридических действий.
В случае определения отцовства еще до родов, возможно провести тест и для будущей матери, неспособной конкретно ответить на вопрос об отце ожидаемого ребенка. Этот способ вовсе не опасен для здоровья будущей матери и базируется только на отборе небольшого количества венозной крови матери и предполагаемого отца.
Установление отцовства уже родившегося ребенка теперь значительно упрощено. Исследование ДНК на предмет отцовства основывается на сравнении участков ДНК ребенка и предполагаемого отца. ДНК человека обладает довольно сложным строением и состоит как бы из двух частей-спиралей. Первую половину своей ДНК ребенок получает от матери, вторую – от биологического отца.
Раньше для проведения ДНК-анализа на предмет отцовства использовали только кровь из вены. Сейчас набор методов проведения генетической экспертизы значительно расширился. Можно использовать любой материал от человека. Так как ДНК одного человека абсолютно одинаков во всех органах и тканях, следовательно, можно использовать любой вид тканей или органов: волос, слюну, соскоб с внутренней поверхности щеки и т. д. , в том числе и кровь.
Чаще всего используют следующий способ: с помощью ватной палочки делают соскоб эпителия с внутренней поверхности щеки. Мазок высушивают при комнатной температуре в темном месте и отправляют на анализ. Это очень удобно тем, что забор исследуемого материала можно сделать даже дома и принести мазки вероятного отца, матери и малыша в лабораторию медицинского центра в подписанных конвертах.
Возможность получить совершенно достоверный, обоснованный с научной точки зрения, результат, являющийся серьезным доказательством в решении многих юридических проблем – вот что такое исследование молекулы ДНК. И это заключение практически невозможно опровергнуть.
Тест предполагает точность результата при отрицательном ответе 100%, а при положительном - только 9,9%. Это объясняется тем, что гипотетически может существовать некий брат-близнец, ДНК которого сходно с ДНК возможного отца. Причем, при получении отрицательного результата, анализ повторяют, чтобы исключить возможность ошибки.
Стоимость анализа варьируется от 12000руб. до 30000руб. в зависимости от медицинского центра, где проводится анализ, и количества STR генетических маркеров, которые являются стандартными для определения отцовства.
