Диагностическая лаборатория в Уфе
Группа крови цоликлонами
Определение группы крови цоликлонами — что это и как проводится
Определение группы крови и резус-фактора играет основополагающую роль в случаях, когда речь идет о спасении жизни человека. Именно по этой причине подобное исследование проводят всем пациентам в предоперационный период, беременным женщинам перед родами и во многих других ситуациях, которые могут потребовать срочного переливания. Существует несколько способов определения группы крови с использованием разных лабораторных реагентов, и один из них основывается на применении химических веществ под названием цоликлоны. Что же представляет собой определение группы крови цоликлонами и как проводится процедура?
Определение группы крови цоликлонами
Для чего проводится анализ?
Группа и резус-фактор – генетически обусловленные характеристики крови, которые наследуются от родителей и остаются неизменными на протяжении всей жизни человека. Классификация групп крови осуществляется, исходя из определенного набора биохимических параметров и состава антигенов, и насчитывает 4 основных группы. Переливание пациенту крови несовместимой группы или с другим резус-фактором несет с собой смертельную опасность – иммунная система начинает вырабатывать антитела против чужеродных клеток, которые атакуют и разрушают их. Именно по этой причине в ситуациях, которые несут с собой риск обширной кровопотери, необходимо точное определение принадлежности крови и резус-фактора как у донора, так и у реципиента.
Таблица групп крови и резус-факторов
Что такое цоликлоны?
Цоликлоны – это антитела, которые получают посредством технологий генной инженерии. Обычно для получения цоликлонов берутся лабораторные мыши – животным вводится специальный препарат, после чего производят забор жидкости из брюшной полости – именно она и содержит необходимые для проведения анализа вещества. С научной точки зрения, цилоклоны можно отнести к иммуноглобулинам М, которые способны реагировать с агглютиногенами – специфическими клетками, присутствующими на поверхности красных кровяных телец.
Цоликлоны
Именно агглютиногены, а точнее их типы, и служат основой для классификации групп крови: так, у носителей первой группы данные вещества отсутствуют, у обладателей второй имеются агглютиногены типа А и т. д. В ходе проведения процедуры определенные цоликлоны вступают в реакцию с разными типами агглютиногенов, что и позволяет определить группу крови пациента.
Группа крови и резус фактор – фото
Цоликлоны выпускаются в виде жидкости, разлитой во флаконы по 5 мл или 10 мл, причем каждый ее тип имеет специфические характеристики:
- анти-А представляет собой жидкость красноватого цвета;
- анти-В имеет синий оттенок;
- анти-АВ (анти-D) – бесцветный прозрачный раствор.
Преимущество цоликлонов перед другими химическими реагентами заключается в том, что они не требуют специальной подготовки к анализу и позволяют провести его в кратчайшие сроки. Кроме того, они не являются клетками человеческого организма, поэтому инфекционное заражение медперсонала при контакте с веществами полностью исключено.
Определение групп крови по системе АВ0 при помощи цоликлонов Анти-А и Анти-В
Как проводится исследование?
Для определения группы крови с использованием цоликлонов необходима плоская ровная поверхность (планшетка), смоченная водой, набор химических реагентов и пробы биологической жидкости, причем специалист может использовать любую кровь: капиллярную, венозную, замороженную и т. д.
- Стороны планшета помечают, чтобы не перепутать, на какую из них будет нанесен тот или иной тип цоликлонов.
Процедура определения группы крови цоликлонами
- На поверхность капают по одной капле реагентов (обычно цилоклоны анти-А и анти-В) и крови, причем объем химических веществ должен в 8-10 раз превышать объем биоматериала.
- Подождать 3-5 минут, аккуратно покачивая планшет, чтобы жидкости хорошо смешались, а эритроциты не оседали по краям образцов.
Планшет для определения группы крови
Важно! Спустя несколько минут наступит реакция, по которой можно с высокой точностью определить принадлежность крови к определенной группе.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов процедуры проводится визуально – жидкости либо полностью соединяются, либо наступает склеивание (агглютинация) кровяных телец, вследствие чего биоматериал сворачивается и в нем образовываются мелкие хлопья.
Интерпретация результатов
Расшифровка осуществляется следующим образом:
- если реакция отсутствует во всех образцах биоматериала, его можно причислить к I группе (это означает, что агглютиноген в клетках крови отсутствует);
- вступление кровяных клеток в реакцию с цоликлоном анти-А свидетельствует о том, что кровь исследуемого человека относится к II группе;
- склеивание эритроцитов с цоликлоном анти-В – признак III группы крови;
- если биоматериал вступил в реакцию со всеми веществами, то он принадлежит к IV группе.
Исследуемая кровь группы О(I)
Для проверки точностии результатов и определения резус-фактора к образцам биоматериала добавляют цоликлон АВ – если произошла реакция агглютинации, он в крови определяется как положительный (отсутствие склеивания эритроцитов говорит об отрицательном резус-факторе). Чтобы исключить заболевания, при которых агглютинация происходит при контакте с любыми раздражителями, капля крови пациента смешивается с физраствором. В случаях, когда визуально определить результат невозможно, анализ переделывают, а образцы рассматривают под микроскопом.
Таблица. Реакции разных групп крови с цоликлоном анти-А и анти-В.
| I группа | Отсутствует | Отсутствует |
| II группа | Положительная | Отсутствует |
| III группа | Отсутствует | Положительная |
| IV группа | Положительная | Положительная |
Цоликлон Анти-B флакон-капельница
Что следует учитывать при проведении анализа?
Чтобы результат анализа был максимально достоверным, при проведении процедуры необходимо соблюдать ряд условий:
- реагенты должны храниться в холодном месте при температуре +2-8 градусов во флаконах с плотно закрученной крышкой (в случае нарушения правил хранения они быстро теряют свои свойства);
- для проведения анализа нельзя использовать цоликлоны с истекшим сроком хранения (он составляет около 30 дней) или жидкости, которые содержат осадок, хлопья или мусор;
- исследование выполняется в хорошо освещенном помещении при температуре воздуха не ниже +15 и не выше +25 градусов, причем в нем не должно быть грязи, пыли и других факторов, способных исказить результат;
Температура воздуха во время процедуры должна соответствовать
- при нанесении биоматериала и реагентов на поверхность планшетки следует точно соблюдать пропорции – если крови будет слишком много, реакцию сложнее отследить, а в противоположном случае (при малом объеме) она будет слишком медленной;
- нельзя допускать, чтобы капли крови, смешанные с разными типами цоликлонов, сливались вместе – если это случилось, исследование проводят заново; по этой же причине для смешивания реагентов с биоматериалом следует использовать разные палочки.
Процесс определения группы крови
Продолжительность реакции должна составлять не менее 3 минут, а при сомнительном результате время наблюдения за образцами биоматериала следует продлить до 5 минут. Однако по истечении 10 минут может произойти подсыхание биоматериала и естественное выпадение эритроцитов в осадок, поэтому доверять такому исследованию не стоит.
Что может повлиять на результат?
Цоликлоны чувствительны к факторам окружающей среды, соответственно, при проведении исследования необходимо соблюдать температурный режим и правила гигиены – помещение должно быть чистым и сухим, а отдельные образцы крови не должны контактировать друг с другом. Кроме того, при некоторых патологиях кровь человека способна менять свои характеристики, вследствие чего проведение исследования существенно усложняется. Так, при дисфункции печени, селезенки, септических процессах и обширных ожогах у пациентов наблюдается так называемая панагглютинация крови – эритроциты выпадают в осадок даже при реакции с физраствором. У больных лейкозом и новорожденных младенцев наблюдается иная картина – кровяные тельца не реагируют на раздражители, из-за чего отследить реакцию склеивания становится невозможно.
Что влияет на результаты процедуры
Обратите внимание! Кроме того, у близнецов, людей с пересаженным костным мозгом или у тех, кто перенес неоднократное переливание крови, в биологических жидкостях уживаются разные типы эритроцитов – соответственно, при проведении анализа наблюдаются непредсказуемые результаты. Для определения группы в вышеперечисленных случаях требуются дополнительные лабораторные анализы с использованием специального оборудования.
Анализ с использованием цоликлонов – один из наиболее простых и точных способов определения группы крови человека. При соблюдении всех правил и условий проведения процедуры вероятность ошибочного результата сводится к минимуму, поэтому химические реагенты данного типа применяются практически во всех современных лабораториях.
Видео — Определения групп крови с помощью цоликлонов
Источник
Определение группы крови и резус фактора цоликлонами - алгоритм действий
Содержание
Определение группы крови цоликлонами сегодня считается одной из самых простых техник анализа принадлежности крови пациента к той или иной группе. Знать группу крайне важно – это значимое исследование, проводимое всем пациентам, которым назначены хирургические операции. В обязательном порядке делают определение группы крови и резус-фактора военнослужащим, беременным матерям и других людям, для которых может стать необходимым срочное переливание донорской крови.
Принцип действия
Рассматриваемые вещества представляют собой специфические реагенты, которые применяют в анализе человеческой крови на групповую принадлежность и выяснении резус-фактора. Свое название они получили по месту разработки: реагенты были созданы в Москве, в стенах ЦОЛИПК – Центрального Ордена Ленина Института Переливания крови. Ранее использовались другие, существенно более трудоемкие и сложные техники диагностики, но появление цоликлонов позволило исключить их, увеличив скорость анализа.
Чтобы понять, что представляют из себя цоликлоны, механизм их работы, нужно уяснить разницу между группами человеческой крови. Таковые различаются присутствием (или, наоборот, отсутствием) специфических веществ – агглютиногенов, на поверхности красных кровяных телец. Агглютиногены делятся на типы, обозначаемые латинской A и латинской B.
Таблица соответствий:
- I группа. Ее носители не имеют агглютиногенов, по этой причине ей присваивают цифровое значение 0.
- У ее обладателей имеется агглютиноген типа А, и эта группа также обозначается данной буквой.
- III группа. Носители ее имеют на поверхности эритроцитов агглютиногены типа B, буквенное обозначение этой группы аналогично.
- IV группа характеризуется содержанием обоих типов веществ, и ей присвоен буквенный шифр AB.
Именно на этом различии базируется определение групп крови с помощью цоликлонов. Они представляют собой особые жидкости, в составе которых есть вещества, способные реагировать с определенным типом агглютиногенов. Проба крови при этой реакции сворачивается. К примеру, цоликлон, реагирующий на агглютиноген типа А, носит имя Анти-А.
Цоликлон Анти-В реагирует, соответственно, на B-агглютиноген, а анти-АВ содержит смесь всех веществ и служит в качестве контрольного, когда нужно подтвердить или опровергнуть результат предыдущего исследования.
Анти-А выпускается в виде красной жидкости, анти-В – синей, анти-АВ разливается в тару как бесцветная субстанция. Все они поставляются либо во флаконах из стекла, либо в сосудах из пластика со встроенной капельницей, для упрощения работы с ними.
Для определения группы крови методом цоликлонов не требуется какое-либо специальное оборудование: достаточно иметь чистую плоскую поверхность (планшет или тарелку), набор цоликлонов и две пробы крови испытуемого. Годится как свежевзятая из вены/пальца кровь, так и законсервированная ранее. Перед исследованием стороны рабочей поверхности (планшета и тд.) помечаются, чтобы не перепутать, на какую сторону будет наноситься тот или другой цоликлон.
Далее приступают к анализу. На левую и правую стороны наносят по капле цоликлона: анти-А – слева, анти-В – справа. К жидкостям добавляют по капле крови, в соотношении 2 части на 10 частей реагента. Далее поверхность легонько покачивают, чтобы кровь смешалась с веществом, но пробы с разных сторон планшета не перемешались друг с другом.
Через несколько минут можно наблюдать результат: кровь либо смешается с цоликлоном, либо произойдет ожидаемая агглютинация, когда кровь станет сворачиваться.
По увиденному интерпретируют полученный результат диагностики:
- отсутствие реакции на цоликлоны говорит о принадлежности к I группе;
- сворачивание наблюдалось в пробе с Анти-А – II группа;
- в пробе с анти-В – III группа;
- если свернулись обе пробы, группа крови — IV.
Для надежности, при подозрении на реакцию A+B проводят дополнительный анализ группы крови с помощью цоликлонов, вводя пробу в раствор с цоликлоном Анти-АВ. Если наблюдалась реакция, результат предыдущей диагностики подтверждается.
Для полного исключения вероятности склейки эритроцитов, что может проявляться в пробах крови на фоне определенных заболеваний и не зависеть от введения цоликлонов, кровь пациента смешивают с простым физраствором. Если реакция отсутствует, подтверждается IV группа.
Особенности анализа
Определение группы крови с помощью данной техники обладает довольно высокой точностью. Существует некоторая вероятность ошибок, но большинство из них вызывается неточностями и ошибками в процедуре проведения.
Чтобы исключить этот фактор, нужно принимать во внимание следующее:
- Хранение цоликлонов допускается только в холодильнике, в диапазоне температур от 2 до 7 градусов. Вскрытую упаковку можно хранить до 3 дней, но она должна быть плотно закупорена. Если не соблюдать это правило, свойства реагентов существенно меняются, и результаты искажаются. Запрещено применять цоликлоны, чей срок годности истек, и такие реагенты, которые хранились неправильно.
- Условия проведения диагностики предполагают хорошее освещение и температуру в лаборатории в диапазоне 15-25 градусов. Если ситуация вынуждает делать анализ на жаре, планшет, где будет проводиться реакция, следует охладить.
- Нельзя забывать, где на планшете находится тот или иной цоликлон, именно с этой целью подписываются его стороны. Хотя цвета исходных реагентов различны, смешиваясь с кровью, они приобретают примерно схожий оттенок, и их легко перепутать.
- Нужно соблюдать приведенное ранее отношение объемов крови, вводимой в реагент, к самим цоликлонов.
- Нельзя смешивать жидкости из разных проб. Когда смешение все же случилось, диагностику проводят снова.
- Палочки из стекла, которые применяют для перемешивания проб, должны быть свои для каждой отдельной капли.
Период наблюдения за течением реакции составляет от 3 минут, желательно довести это время до 5, для лучшей точности. Хотя красные тельца склеиваются уже через 10 секунд, нужно провести наблюдение до конца, получив окончательное подтверждение.
Методы как определить группы крови (стандартными сыворотками, цоликлонами) - kardiobit.ru
В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность.
Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.
Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции. Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур. Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.
Состав крови различных групп крови
Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».
Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.
Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.
Выделяются следующие группы крови по составу:
- I (0) – ά, β — поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов,
- II (А) – β — на поверхности имеется антиген А и антитело β,
- III (В) – ά — поверхность содержит В с антителом типа ά,
- IV (АВ) – 00 — поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.
Определение групп крови
Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.
Методы определения
Стандартный метод
Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.
Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.
Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.
Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система — посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.
Разведение производится так:
- В пробирку, содержащую 1 миллилитр 0.9 %-го раствора пищевой соли, необходимо добавить 1 миллилитр плазмы. Раствор тщательно перемешать.
- Затем пипеткой отбирают полученный раствор плазмы в объеме 1 миллилитр. Добавляют его в пробирку, которая содержит изотонический раствор. Так необходимо достигнуть разведения плазмы с соотношением 1 к 256. Применение других разведений несет риск возникновения диагностической ошибки.
Непосредственно исследование проводится таким образом:
- На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
- Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.
Правила расшифровки результатов
Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.
Видео: Определение группы крови и резус-фактора
Здесь возможны варианты:
- Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) — определение первой группы,
- Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II — определение второй,
- При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы — определение III,
- Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной — определение IV.
Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.
В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.
Метод перекрестной реакции
Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.
Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.
На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.
Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.
Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:
| Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками | Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами | Группы крови |
| 0(I) | A(II) | B(III) | AB(IV) | 0(I) | A(II) | B(III) | |
| – | – | – | — | – | + | + | 0(I) |
| + | – | + | — | – | – | + | A(II) |
| + | + | – | — | – | + | – | B(III) |
| + | + | + | – | – | – | – | AB(IV) |
+ агглютинация,
– агглютинация отсутствует,
реакцию не проводят.
Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.
Определение группы крови цоликлонами
Цоликлоны — синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.
Цоликлоны
Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.
| Вид цоликлонов | Группа крови |
| Результат агглютинации | Анти-А | Анти-В | |
| — | — | 0(I) | |
| + | — | A(II) | |
| — | + | B(III) | |
| + | + | AB(IV) |
IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.
Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»
Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.
При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:
- Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0,
- Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования,
- Стеклянные палочки для перемешивания образцов,
- Чистая пипетка для набора растворов.
Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.
Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.
В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.
Видео: Определения групп крови с помощью цоликлонов
(Пока оценок нет) Загрузка...Определение группы крови с помощью цоликлонов — алгоритм и интерпретация результатов
Определение группы эритроцитарных антигенов и резус-фактора давно стало одним из обязательных исследований для большинства пациентов, поступающих на стационарное лечение. Его проведение возможно на любом уровне оказания медицинской помощи при условии наличия необходимых реагентов и инструментов.
Обычно, определение группы проводится с помощью стандартных сывороток, хотя, конкуренцию ему составляет еще один метод, сходный по методике проведения с эталонным – использование цоликлонов.
Что это такое?
Цоликлон – моноклональное антитело, образующееся путем генной инженерии. Чаще всего, для его получения используют мышей – животному вводят специальный антиген, а после получают асцитную жидкость грызуна, в которой и содержатся указанные антитела.
Морфологически, они относятся к иммуноглобулинам класса М, т.е. антителам острой фазы. Механизм действия их обусловлен образованием комплекса антиген-антитело, где в качестве антигена выступают некоторые молекулы (в данной ситуации – белки, определяющие группу крови и ее резус), расположенные на мембране клетки.
Какие существуют препараты цоликлонов?
В настоящее время, в лабораторной диагностике используется 3 типа стандартных цоликлонов – анти-А, анти-В и анти-АВ. Каждый из них вступает в реакцию со специфичным для него антигеном, обуславливая развитие иммунной реакции.
Эти препараты выпускаются в виде ампул или флаконов, содержащих 5 или 10 мл раствора антител. Все они имеют специфическую окраску, по которой и проводится определение каждого типа:
- анти-А окрашен в красный цвет;
- анти-В выпускается в виде раствора синего цвета;
- комбинированный цоликлон анти-АВ (или анти-D) специфической окраски не имеет.
Цоликлон анти-АВ может быть модифицированным и использоваться для определения резус фактора.
Методика исследования
Алгоритм исследования достаточно прост, специальной подготовки к исследованию от пациента не требуется.
Определение группы может проводиться в нативной крови как с использованием консерванта, так и без него. Для исследования берут капиллярную кровь из пальца пациента.
Обязательно соблюдать условия окружающей среды для получения достоверной информации: анализ проводится в хорошо освещенном помещении с умеренной влажностью и температурой не ниже 20 градусов.
Кроме того, следует удостовериться, что кровь была взята у пациента правильно, а срок годности используемых реагентов еще не истек.
На специальную пластину (или планшетку), на расстоянии друг от друга с помощью специальной пипетки наносят по 1 крупной капле каждого из антител (для удобства, лучше располагать их так – А, В, АВ). Возле каждой из капель цоликлонов необходимо поместить по одной капле исследуемой крови и при покачивании планшетки постепенно их перемешать.
Визуально, результаты исследования можно определить уже через 5-10 секунд после начала анализа. В исследуемой крови обнаруживаются так называемые “красные конгломераты” – склеившиеся эритроциты. Образуются они в результате реакции агглютинации, т.е. в том случае, когда цоликлон соответствует антигену (в том числе и при исследовании на резус-фактор). Если же агглютинации не наблюдается, то соответственно имеется расхождение между исследуемыми антигенами и имеющимися антителами.
Шаг 3. Происходит реакция слипания эритроцитов Интерпретация результатов
Как проводится оценка результатов исследования и определение групповой принадлежности?
Как уже говорилось выше, результат исследования определяется по наличию реакции агглютинации визуально или с помощью анализаторов:
- если ее нет ни в одной из капель, значит исследуемая кровь имеет первую группу.
- когда она наблюдается в ячейке, где расположен цоликлон анти-А, значит в исследуемой крови содержится данный антиген. Таким образом, исследуемая кровь может быть как второй (генотип АА или А0) или 4 (АВ) групп.
- если агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-В, то исследуемая кровь 3 (ВВ, В0) или 4 группы.
Шаг 4. Определение группы крови Для проверки правильности результатов на планшетке и добавляется цоликлон анти-АВ (обладающий свойством определять и резус-фактор). Он, в какой-то мере является контрольным, так как именно по наличию в нем агглютинатов судят о правильности проведенного анализа. Если реакция произошла во всех ячейках, значит исследуемый образец относится к 4 группе крови.
Возможна ситуация, когда агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-АВ, а в других образцах ее нет. В таком случае можно говорить о неправильно проведенном анализе, и проводят повторное определение группы и резус-фактора.
