Главная » Статьи » Биоптата что это

Биоптата что это


Исследование биоптата

Гистопатологическое исследование биоптата носит субъектив­ный характер и представляет собой область, относя­щуюся равно к науке и к искусству.

Существует множе­ство указаний в печатных работах, свидетельствующих о том, что биоптаты представляют наиболь­шую сложность для гистопатологоанатома, в особенно­сти образцы, взятые при эндоскопии, если ткань, кажу­щаяся патологической при эндоскопии, при гистологи­ческом исследовании оказывается нормальной, и нао­борот. В нескольких исследованиях было показано, что при исследовании биоптата, взятого во время эндоскопии, интерпретации изменений, предло­женные разными патоморфологами, редко совпадают. Более того, отсутствуют четкие гистопатологические критерии для постановки окончательного диагноза, иногда также отличаются критерии и терминология, которыми пользуются в Северной Америке и Европе. Было предпринято всего несколько попыток привести критерии гистопатологической диагностики заболева­ний ЖКТ, печени и поджелудочной железы к единому стандарту.

Заключение патоморфолога после исследования биоптата должно содержать подробное описание предоставленного образца (осо­бенно это касается биоптатов, полученных при лапа­ротомии, или биоптатов, полученных при аутопсии), что дает хирургу дополнительную уве­ренность в том, что биоптат, отправленный в лаборато­рию, является тем же самым образцом, который брал сам врач для исследования. Наряду с комментариями, носящими поясняющий характер, и диагностическим заключением, следует составить отчет по результатам микроскопического исследования биоптатов из каж­дой области. В случае образцов, полученных во время эндоскопии или методом толстоигольной биопсии, патоморфолог может попытаться сделать общий об­зор множественных образцов, но должен выделить каждую локализованную патологию (например, «об­щий вид образцов соответствует норме, но в одном об­разце слизистой из области дна желудка имеется очаг изъязвления и инфильтрации нейтрофилами»). При исследовании биоптатов, полученных при эндоско­пии с помощью биопсийных щипцов, патоморфолог может столкнуться со следующими сложностями (их можно отметить в заключении):

  • правильное размещение биоптата для приго­товления среза обеспечить сложно, поэтому представлен поперечный срез ворсинки вме­сто продольного сечения единицы ворсинка-крипта;
  • фрагментация материала биопсии с отделени­ем эпителиального слоя;
  • артефакт, связанный с раздавливанием матери­ала биопсии, в результате чего произошло раз­рушение тонких клеточных структур.

Кроме того, частыми артефактами образцов, полу­ченных при эндоскопии, являются небольшие очаги поверхностного или периферического кровотечения, связанные с отделением соединительной ткани от собственной пластинки, которые следует отличать от отека. В последних исследованиях описана различная степень качества биоптатов, полу­ченных во время эндоскопии, проведенной в разных диагностических гистопатологических лаборатори­ях, и установлена более тесная связь этих различий с качеством образцов, предоставляемых врачом, а не с техническим процессом приготовления среза.

Была проведена работа с целью дифференциации воспалительных поражений по тяжести воспаления и природе воспалительного инфильтрата. Единой схемы классификации нет, но большинство патоморфологов используют 4-балльную шкалу: норма (0), слабо вы­раженное (2), умеренно выраженное (3), значитель­но выраженное (4), воспаление. Характер воспаления может описываться как нейтрофильный, гранулематозный (доминируют макрофаги), пиогранулематозный (нейтрофилы и макрофаги), эозино­фильный, лимфоплазмацитарный (доминируют лим­фоциты и плазматические клетки) или смешанный. Более того, описываются нарушения микроархитек­туры слизистой оболочки (например, укорочение ворсинок, дилатация млечных протоков, изъязвление, искривление крипты, абсцесс крипты).

Также не существует единой схемы классификации новообразований при исследовании биоптата. Необ­ходимо описать характер клеточной популяции ново­образований (например, эпителиальные, веретено­образные клетки, округлые клетки), гистологического расположения (например, пластинчатое, гроздевид­ное, завитое) и цитологические признаки (например, плеоморфизм, ядерно-цитоплазматическое соотноше­ние, ядрышки, хроматин, митоз). Также должны быть описаны и другие основные параметры, такие как вы­раженность деструктивных изменений ткани, инфиль­трация глубоких слоев (трудно оценить, если материал был взят биопсийными щипцами при эндоскопии) или инвазия кровеносных или лимфатических сосудов.

Эти же основные принципы интерпретации при­менимы для исследования биоптатов печени или поджелу­дочной железы при воспалительных заболеваниях или новообразованиях, а также при сообщении о вы­явленных нарушениях. По возможности производит­ся оценка всего предоставленного образца печени, а в случае исследования биоптатов поджелудочной желе­зы — оценка и эндокринной, и экзокринной ткани.

Специальные патоморфологиче­ские исследования биоптатов

Специальные красители для окрашивания биоптатов

Исследование срезов, окрашенных гематоксилином и эозином (ГЭ-окрашивание), — начало гистопатологического исследования. В большинстве случаев после этого не требуется дополнительная оценка, но во многих гистопатологических лабораториях при­меняется набор специальных красителей для оценки специфических свойств биоптатов. Они выбирают­ся патоморфологом на основе оценки окрашенного гематоксилин-эозином среза, однако врачу они могут сообщить полезную информацию (например, «воз­можно присутствие микобактерий; рекомендуется окраска по Цилю-Нильсену»),

В случае гранулематозных или пиогранулематозных воспалительных изменений, в обычной практи­ке исследования биоптатов используется набор специальных красителей, со­держащий краситель Грама (для бактерий), йодную кислоту — реактив Шиффа (PAS, для грибов), кра­ситель Циля-Нильсена (ZN, для кислотоустойчивых бактерий), чтобы установить этиологию инфекции. Окрашивание серебром по Вартин-Старри может ис­пользоваться для выявления спирохет. Врач дол­жен знать, что окрашивание такими красителями яв­ляется сравнительно малочувствительным методом, и результат может оказаться отрицательным, в то время как посев на питательные среды для культивирова­ния возбудителя или полимеразная цепная реакция (ПЦР), как правило, дает положительный результат. Однако специальные красители, как правило, могут применяться ретроспективно (то есть для образцов, предоставленных для обычного гистопатологического исследования), в то время как для культивирова­ния и ПЦР требуется свежий образец ткани. Краси­тель Гимза может использоваться для идентификации простейших (например, лейшманий). Когда эозинофилы трудно увидеть в некоторых ГЭ-окрашенных срезах, специальные красители, такие как Сириус красный, могут выделить эти клетки и провести оцен­ку их значения при воспалительной энтеропатии. При новообразованиях наиболее известным примером специального окрашивания является использование толуидинового синего красителя для диагностики мастоцитомы.

Использование специальных красителей чаще ре­комендуется для оценки биоптатов печени. Чаще все­го внутри гепатоцитов выявляют гранулярный пиг­мент, после чего необходимо различить, присутствует ли железо (гемосидерин, окраска берлинской лазурью по Перлу) или медь (окраска рубеановодородной кис­лотой). Накопление меди встречается чаще, чем в настоящее время ее выявля­ют, поскольку краситель рубеановодородная кисло­та не всегда есть в наличии. Краситель Фуше может использоваться для выявления желчного пигмента в случае обструкции желчных протоков. Фиброз пе­чени можно увидеть при окраске гематоксилином по Ван-Гизону (HVG), которая позволяет выявить коллаген, и при окрашивании серебром, например по методу Гордона и Свита, при котором окрашива­ются ретикулярные волокна. Липиды печени могут быть окрашены по Ойлу красным О, а гликоген — с помощью реактива Шиффа (PAS), но эти красители применяются для замороженных срезов ткани. На­копление амилоида может быть выявлено при окра­шивании Конго красным для оценки среза в поляри­зованном свете с двойным лучепреломлением. Тот же набор специальных красителей для выявления пато­генных микроорганизмов может быть применен при исследовании биоптата тканей печени в случаях, когда предпо­лагают воспалительное поражение печени, возможно, вызванное бактериями.

Электронная микроскопия биоптатов

Трансмиссионная электронная микроскопия (ТЭМ) редко требуется для исследования биоптата или не всегда может быть выполнена в повседневной диагностике заболеваний. Однако в некоторых случаях ТЭМ полезна для оценки микро­организмов, которые трудно идентифицировать при световой микроскопии (например, энтероиатогенную Escherichia coli или Cryptosporidium), либо для выявле­ния ультраструктурных повреждений (например, па­тологическое накопление лизосом). Для ТЭМ можно использовать заранее приготовленные образцы, взяв их из парафинового блока. Для предстоящего ТЭМ исследования биоптатов оптимальным является фиксация тка­ни в глутаральдегиде, а сотрудникам лаборатории не­обходимо сообщить о специальных требованиях при подготовке данного образца ткани.

При иммуногистохимии используются антитела (по­ликлональные или моноклональные) для выявления специфических антигенных молекул в образце ткани. Некоторые антитела можно использовать для ткани, фиксированной формалином, что делает возможным ретроспективное исследование тех же биоптатов, что применялись при обычном гистопатологическом ис­следовании. Другие антитела можно применять только для свежей ткани, подвергнутой быстрому заморажи­ванию, эти срезы получают в криостате. Существует специальный порядок мгновенного замораживания образцов ткани для иммуногистохимического исследо­вания, и обычно ее применение невозможно в услови­ях общей практики. Если опыт использования метода иммуногистохимии для исследования биоптатов отсутствует в обычной практике, имеет смысл проконсультироваться с лабораториями относительно их требований при взятии образцов.

Принцип иммуногистохимии — связывание антител с молекулами-мишенями определяется по маркировке первичного или вторич­ного антитела либо флуорохромом (иммунофлюоресценция), либо ферментом (иммунопероксидаза). В данной методике для усиления реакции могут приме­няться различные дополнительные вещества (напри­мер, иммуногистохимическое исследование с приме­нением авидин-биотина). Иммуногистохимия стано­вится все более доступной, так как все большее число лабораторий могут позволить приобретение оборудо­вания для проведения автоматической иммуномар­кировки. Иммуногистохимия, проводимая вручную, представляет собой трудоемкий и дорогостоящий процесс исследования биоптатов, не получивший большого распространения.

Иммуногистохимия может использоваться для выявления специфических возбудителей в тканях и является более чувствительным методом, чем специ­альное окрашивание тканей, описанное выше.

Перспективы развития методов диагностики

Будущее исследования биоптатов тканей не ограни­чивается перспективой развития световой микро­скопии. Экспериментальные исследования показали возможность идентификации ДНК или РНК ми­кробной клетки в свежей или фиксированной ткани с помощью Г1ЦР или реверсивно-транскрипционной ПЦР (РТ-ПЦР) амплификации и количественного определения уровней экспрессии в этих материалах с помощью РТ-ПЦР в реальном масштабе времени. Эти методики исследования ткани пока трудно создать и контролировать, однако уже сегодня можно приобре­сти ПЦР-наборы для выявления генетического мате­риала микроорганизмов в пробах крови.

РТ-ПЦР и РТ-ПЦР в реальном масштабе времени также применимы к биопсийным образцам ткани для выявления (и количественного определения) транс­крипции гена цитокина; возможно, специфический «цитокиновый профиль» соответствует определенно­му заболеванию (например, подтипы ВЗК). Ряд дру­гих основных иммунологических молекул может быть косвенно установлен с помощью РТ-ПЦР, но главное ограничение данной методики исследования биоптатов заключается в том, что продукция информационной РНК необязательно эк­вивалентна синтезу закодированного белка.

Возникли вопросы или что-то непонятно? Спросите у редактора статьи - здесь.

Последние исследования биоптатов по­казали, что можно оценить клональность лимфоидной популяции и отличить лимфому от воспа­ления на основе ограниченного генотипа. В США уже можно приобрести набор для анализа клональности по цитологическим образцам, скоро в продаже также появится набор для исследования биоптатов ткани. В идеале биопсийные образцы по-прежнему будут про­ходить привычную гистопатологическую оценку, но диапазон методик дальнейшего анализа биоптатов в будущем будет существенно расширен.

Статью подготовил и отредактировал: врач-хирург Пигович И.Б.

Исследование и гистологический анализ биоптата в Москве - клиника «ДОБРОМЕД»

В случаях, когда выбранная диагностическая тактика дает нулевой или малоинформативный результат, применяется более радикальный метод исследования пораженных тканей. Речь о биопсии –процедуре, при которой собирают для лабораторных исследований «живой» материал.

Операция прижизненная, не всегда проводится с высокой травматичностью. Ее результат – биоптат, полученный материал – может дать больше информации о заболевании, чем большинство более щадящих методов распознавания патологий.  

Как получают материал для исследований?

Биоптат исследует патоморфорлог. В его же функции входит первичное описание материала по факту получения в зафиксированном виде или без фиксации, рекомендации по точечному гистологическому анализу и постлабораторный анализ изменений.

Получить биоптат можно в ходе операции (пункционной, открытой) или безоперационно (накожные пробы):

  1. Пункционный способ сбора биоптата: тонкая полая игла резко вводится в область пораженного органа, собирая в полуют трубку весь материал, через который проходит. Инвазия малотравматичная, может проводиться без обезболивания (или с местными анестетиками). Минусы: есть риск не попасть в нужную зону или получить недостаточно биоптата.
  2. Аспирационный биоптат получают методом «всасывания» содержимого проколотой области или иного органа.
  3. Биоптат, полученный трепано-иглой. Техника забора материала схожа с первым способом, только вводимая игла снабжена зубцами – на них «оседают» частицы тканей, который проходит инструмент.

Самым информативным способом получения биоптата сегодня является открытая биопсия – инцизионная или эксцизионная. В первом случае часть ткани, которая будет биоптатом, иссекается в ходе хирургической операции, чтобы взять ее кусочек. Во втором биоптатом становится весь пораженный орган или новообразование.

По скорости обработки результатов биопсию делят на срочную (цито) и плановую. В первом случае биоптат исследуется в момент доставки в лабораторию, во втором – может изучаться до 10 дней.

В практике срочной диагностики опасных заболеваний или выявления критических болезней (онкология) для раннего лечения широко распространена прицельная биопсия. В этом случае биоптат забирается многоразовым шприцем с «лапкой захвата» на конце. Для гисто и цитологического исследования может собираться до 5-6 участков.

В случаях, когда орган, чей биоптат требуется, расположен глубоко, процедуру выполняют с визуальным контролем. Это реализовывается через применение эндоскопа, аппаратуры УЗИ.  

Условия проведения и допуск к биопсии

Правила забора биоптата.

  1. Биоптат здорового участка берется на границе с пораженными тканями, часто – с подлежащими волокнами.
  2. Зоны кровотечений, некроза не могут стать местом сбора биоптата.
  3. После сбора – немедленная доставка для исследований. При невозможности доставки в лабораторию биоптат должен быть помещен в так называемый фиксирующий раствор (обычно это формалин + спирт в соотношении биоптата с фиксирующим объемом – 1 к 20-30).

Ограничить круг показаний к исследованию биоптата сложно. Если обобщить, то данный метод исследования актуален во всех случаях, в которых высок риск серьезного поражения ключевых органов, или неэффективны прочие методы распознавания болезни.

Наиболее распространена практика забора и изучения биоптата в целях онкологии, гинекологии, урологии (очаговые и абсцессные поражения печени, почек, селезенки). Эффективно исследование биоптата в практике изучения характера новообразований – полипов, кист, опухолевидных тел.  

В перинатальной диагностике биоптат собирают, когда:

  • в семье есть ребенок с хромосомными отклонениями;
  • один из родителей имеет признаки мутации;
  • будущей маме 35 и больше лет;
  • есть генетические нарушения, связанные с половой принадлежностью;
  • при наличии отдельных моногенных отклонений у женщин.

У кого нельзя собирать биоптат?

Запретительными условиями для проведения биопсии и сбора внутреннего биоптата являются нарушенная свертываемость крови, высокая температура, сильная слабость, коматозное состояние. Открытый биоптат не берут при наличии накожных образований, схожих с признаками меланомы.

Будущим мамам нельзя проводить любые инвазии при обильных выделениях, влагалищных кровотечениях, высокой угрозе выкидыша, обострениях ОРЗ и фиброматозных узлов на матке. Биоптат у женщин, которые ждут ребенка или планируют в будущем беременность, не рекомендовано собирать при уже перенесенных операциях на матке.

Медицинская энциклопедия - биоптат

Биоптат

биоптат

материал, полученный путем биопсии.

1. Малая медицинская энциклопедия. — М.: Медицинская энциклопедия. 1991—96 гг. 2. Первая медицинская помощь. — М.: Большая Российская Энциклопедия. 1994 г. 3. Энциклопедический словарь медицинских терминов. — М.: Советская энциклопедия. — 1982—1984 гг

Медицинская энциклопедия

Комментарии:

См. в других словарях

1.

  Биоптат материал, полученный путем биопсии. См. также:Гастроцитограмма, Антитела Гибридные, Брюнинга-бурденко Метод, Гельминтоларвоскопия, Операция Диагностическая, Биопсия Пункционная ...

Большой медицинский словарь

2.

  материал, полученный путем биопсии. ...

Медицинский словарь

Вопрос-ответ:

Определение термина биоптат

Ссылка для сайта или блога:

Ссылка для форума (bb-код):

Морфологическое исследование биоптата

Морфологическое исследование биоптата – это гистологический процесс срезов тканей, которые были получены в период оперативного вмешательства или эндоскопии. Данный анализ позволяет определить причину возникновения заболевания, наличие возбудителя инфекционного типа. С помощью правильного интерпретирования этиологии заболевания, доктор в дальнейшем подбирает эффективное лечение.

Такой вид исследования зачастую обладает решающим характером. Например, пациенты, которые болеют хроническим гастритом, могут быть досконально осмотрены, только посредством морфологического исследования биоптата. Метод диагностики позволяет определить предраковое состояние и наличие иных новообразований на ранних стадиях.

Исследование гистологического типа проводится с помощью мощного микроскопа. Лаборант на иссеченные ткани наносит специальный раствор, и для того, чтобы их обезводить, обрабатывает образцы парафином. Далее с помощью микротома (инструмента для приготовления срезов биологических тканей) лаборант снимает слой (толщина несколько микрометров).

Отделенные ткани размещают на специальном стекле и проводят процедуру окрашивания – данный этап позволяет максимально рассмотреть каждую клетку. После того как гистолог получит результаты исследования, он пишет свое заключение, и только на основании него лечащий доктор ставит диагноз и назначает соответствующее лечение.

В медицине не редкость проведение морфологического исследования биоптатов в срочном порядке – когда ткани на гистологию иссекаются в период проведения операции. Срочная диагностика делается в том случае, когда необходимо максимально быстро определить ход хирургического вмешательства. Метод срочной диагностики заключается в мгновенной заморозке тканей (обезвоживание не проводится). После чего происходит стандартное рассматривание клеток. Стоит отметить, что длительность мгновенного исследования составляет не менее получаса. Основанием для него может являться только низкий уровень достоверности заключения.

Еще один вариант проведения МИБ – цитология. Анализ на цитологию подразумевает не иссечение тканей, а забор на исследование клеток. Кусочек слизистой оболочки получается взять не всегда. Данный метод исследования чаще всего используется в гинекологии – мазок слизистых шейки матки. Он назначается для выявления новообразований на ранних стадиях. Стоит отметить, что на практике биопсия намного эффективнее и результативнее, чем цитология.

Показания и противопоказания к проведению исследования

Обычно биопсия назначается пациентам тогда, когда есть подозрение на развитие онкологических заболеваний. Морфологическое исследование биоптатов обладает следующими показателями:

  • патология пищеварительного тракта, мягких тканей, забрюшинного пространства, средостения, стенок грудной клетки, плевральной полости легких, гематомы;
  • «холодный» узел или киста щитовидной железы;
  • злокачественное новообразование;
  • опухоли неизвестной этиологии в области надпочечников;
  • абсцесс и очаговые поражения селезенки;
  • патологии печени.

Морфологическое исследование биоптатов противопоказано при:

  • наличии угрозы прерывания беременности;
  • подозрении на меланому;
  • отказе пациента в письменном виде на проведение процедуры;
  • наличии возможности провести диагностическое исследование неинвазивного типа;
  • нарушении свертывания крови тяжелой формы.

Стоит отметить, что в период забора тканей для проведения МИБ могут возникнуть осложнения: воздушная эмболия, рассеивание опухоли и, в редких случаях, летальный исход.

Самым малотравматичным способом исследования на сегодняшний день считается пункционная аспирационная биопсия. Для ее проведения выполняют чрескожный прокол полой иглой, через которую и осуществляется забор тканей из патологического очага. Чаще всего данный вид забора тканей происходит под контролем УЗИ. Среди недостатков такого метода стоит отметить: отсутствие стопроцентной гарантии точного попадания в патологический очаг, для исследования может не хватить «добытого» материала.

Толстоигольная трепан-биопсия – используются специальные иглы с резьбой. В исследуемые ткани они как-бы ввинчиваются и резко выдергиваются.

Инцизионная биопсия – это данный вид иссечения тканей, который проводится в ходе хирургического вмешательства. Стоит отметить, что процедура происходит не с лечебными, а с исключительно диагностическими целями. Хирург видит патогенный очаг и выполняет иссечение биоптата для анализа с нескольких участков.

Эксцизионная биопсия – проводится в условиях хирургического вмешательства и предусматривает полное удаление новообразования или поврежденного органа.

Для того, чтобы полученные материалы были пригодны к диагностике, пациенту рекомендуют: перед процедурой как минимум три дня не употреблять алкогольные напитки, за неделю отказаться от острой и кислой пищи. Проведение биопсии ЖКТ проводится полностью на голодный желудок. Важно предупредить доктора о приеме каких-либо препаратов.

Чаще всего забор биоптата проходит под местной анестезией, следовательно, если у пациента есть нарушения ЦНС, ему предлагают принять седативное средство. Длительность процедуры займет от нескольких минут до часа, все напрямую зависит от локализации патологического очага.

Результат морфологического исследования биоптата покажет наличие воспалительного и инфекционного патогена, а также тип новообразования и т.д. Результаты передаются непосредственно к лечащему доктору (он указан в направлении), или же их может забрать пациент (обычно на следующие сутки). Важно, помнить, что своевременная диагностика поможет максимально быстро и эффективно убрать патологию.

Морфологическое исследование биоптата

обновлено:

Июнь 6, 2018

Смотрите также