Ифа на сифилис

Иммуноферментный анализ является основой диагностики многих инфекций, не только венерических и сифилиса. Основан данный метод на определении антител в сыворотке из крови пациента, взятой из вены.

В крови каждого из нас присутствуют особенные структуры белковой природы – антитела, которые представлены разными классами.

Одна из главных функций антител – связывание с антигенами и образование определенных комплексов, которые трудно растворяются. За выработку антител ответственны клетки крови – лимфоциты.

При появлении инфекционного возбудителя любого заболевания в крови человека, в ответ вырабатываются антитела, которые через свои рецепторы образуют контакт с четко определенными антигенами этого возбудителя.

Такой комплекс называется соединением «антигенов + антител». И именно метод ИФА на сифилис позволяет регистрировать отдельные комплексы антител и антигенов трепонем при сифилисе при наличии ферментов и специальных меток в реагентах.

Определение таких комплексов ИФА методом при инфицировании сифилисом стало возможным только при помощи специальных ферментных составов, которые добавляли к исследуемому материалу.

За счет чего данный диагностический метод стал активно использоваться для определения отдельных классов иммуноглобулинов, которые появляются на фоне определенной инфекции.

Дополнительно при иммуноферментном анализе определяется не только наличие, качественная реакция, но и количественная, число нарастания титров антител.

Такой анализ на сифилис позволяет оценить состояние после инфицирования, и после лечения, для отслеживания динамики на фоне полученной терапии.

При проведении диагностических тестов на сифилис, применяются различные серологические реакции: агглютинации, преципитации, иммунофлюоресценции, связывания комплемента, иммуноферментный анализ и др. В основе всех этих серологических реакций лежит взаимодействие антигенов и антител.

Специфические серологические тесты называются трепонемными потому, что в этих тестах используются бледные трепонемы или их антигены, то есть антигены трепонемного происхождения.

Цель трепонемных тестов — выявление специфических антител к антигенным структурам возбудителя сифилиса, то есть антител, направленные конкретно против самих бактерий T.

Pallidum, а не против тканей организма, поврежденных трепонемой. Специфические противотрепонемные антитела класса IgM могут быть обнаружены уже в конце второй недели заболевания.

Как и в нетрепонемных тестах, при проведении трепонемных тестов используется реакция «антиген-антитело». Для проведения и обнаружения результатов реакции «антиген-антитело» используют более сложные и дорогие методы, чем в случае нетрепонемных тестов.

Своевременное и качественное распознавание сифилитической инфекции связывается в настоящее время с широким внедрением трепонемных тестов.

Трепонемные тесты используют, чтобы подтвердить наличие сифилиса — с их помощью проверяют результаты нетрепонемных тестов, что особенно необходимо при диагностике скрытых форм сифилиса. Трепонемные тесты также применяются для выявления сифилиса на ранних стадиях, когда нетрепонемные кардиолипиновые тесты (реакция Вассермана, реакция микропреципитации и др.) отрицательные.

Трепонемные тесты применяются только для диагностики сифилиса и не используются для проведения контроля излеченности, т/к трепонемные реакции у некоторых больных могут оставаться положительными в течение многих лет после полноценного лечения сифилиса.

Однако, при проведении трепонемных тестов, в небольшом числе исследований могут встречаться ложноположительные результаты, особенно при наличии у пациента таких заболеваний, как инфекционный мононуклеоз, болезни соедининтельной ткани, лепра или инъекционная наркомания.

По клинической специфичности трепонемные тесты сопоставимы с нетрепонемными, по клинической чувствительности – превосходят их.

ИФА или иммуноферментный анализ относится к серологическим исследованиям и предназначен для обнаружения и диагностики патологических микроорганизмов в сыворотке крови.

Посредством анализа определяют различные классы иммуноглобулинов к бактериям: IgM – при остром патологическом процессе, а IgG на стадии выздоровления, которые в отдельных случаях сохраняются на протяжении всей жизни.

Посредством иммуноферментной диагностики выявляют заболевания различной этиологии:

Вирусные. Вирусные гепатиты, цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ), герпес, корь, паротит, ветряная оспа, Т-клеточный лейкоз, краснуха, грипп, парагрипп, аденовирус, мононуклеоз.
Бактериальные. Туберкулез, бруцеллез, сальмонеллез, дифтерия, хеликобактериоз, легионеллез, коклюш. Инфекции, вызываемые стрептококками, стафилококками, пневмококками, менингококками, гемофильной палочкой – это менингиты, пневмонии, тонзиллиты, скарлатина, ревматизм, сепсис, абсцессы, пиелонефрит, пищевые отравления, а также урогенитального тракта: хламидиоз, микоплазма, уреаплазма, гонорея.
Инфекции, вызываемые простейшими. Амебиаз, токсоплазмоз, криптоспоридиоз.

Паразитарные. Эхинококкоз, токсокароз, пневмоцистоз.
Грибковые. Аспергиллез, кандидоз.

Также ИФА показан для диагностирования сифилиса при подтверждении положительных результатов методом РВ, и позволяет отслеживать эффективность лечения при патологическом процессе.

Иммуноферментный анализ назначается по показаниям (при подозрении на заражение микроорганизмами), является обязательным при беременности и перед хирургическими операциями для выявления носительства различных бактерий.

Процедура анализа производится утром натощак, материал (кровь) забирается из вены. Результаты диагностического исследования готовятся до 10 дней.

Виды исследований и биоматериалов для анализа

Наиболее известны следующие трепонемные тесты:

Реакция связывания комплемента (реакция Вассермана) с трепонемным антигеном (РСКт).
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ; Fluorescent treponemal antibody, FTA). Она применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс (FTA-abs; FTA-abs double staining; FTA-abs IgM; РИФ-абс-IgM; 19S-IgM-FTA-abs); РИФц — реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью.
Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА; Treponema pallidum haemagglutination assay, TPHA).
Реакция пассивной агглютинации желатиновых частиц, сенсибилизированных антигенами возбудителя сифилиса (TPPA, Treponema pallidum particle agglutination assay)
Иммуноферментный анализ (ИФА; Enzyme Lynced Immunosorbent Assay, ELISA).
ИХЛ — иммунохемилюминесцентное исследование (ИХЛ; Chemiluminescence immunoassays, CLIA)
Реакция иммобилизации бледных трепонем РИБТ (РИТ), в зарубежной литературе TPI (Treponema pallidum immobilization test). В последние годы используется все реже и только в научных целях и в исследовательских лабораториях.
Иммуноблотинг (ИБ; Western Blot, Line Blot). Как правило, используется метод линейного иммуноблотинга, являющийся вариантом иммуноферментного анализа. Применяется в двух вариантах: для выявления IgG и IgM-антител к возбудителю сифилиса

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) и иммуноферментный анализ (ИФА) на антитела классов IgM, IgG и суммарные имеют универсальное значение и применяются как для скрининга, так и для подтверждения диагноза.

Эти методики просты и доступны в проведении, имеют высокую воспроизводимость, автоматизированы. При применении ИФА или РПГА обязательным условием является использование в повторном анализе той же тест-системы, что и при первичном обследовании.

РИФ (fluorescent treponemal antibody, FTA) основана на визуализации при люминесцентной микроскопии комплексов антигенов с антителами с помощью сыворотки против Ig человека, меченной флюорохромом.

Методы РИФ, ИФА, иммуноблоттинг (ИБ) позволяют выявить специфические антитела к антигенам T. pallidum (при сифилисе результаты тестов становятся положительными) с 3-й недели от момента заражения и ранее, РПГА и РИБТ – с 7–8-й недели.

Из наиболее распространенных специфических трепонемных тестов в мировой практике, в которых используется реакция агглютинации, можно перечислить следующие. В РПГА (Treponema pallidum hemagglutination assay, ТРНА), реакции микрогемагглютинации (microhemagglutination assay for Treponema pallidum, MHA-TP) при положительном результате происходит агглютинация эритроцитов, сенсибилизированных (обработанных) трепонемным антигеном, в присутствии антитрепонемных антител. Использование в качестве носителя латекса или желатиновых частиц в тесте ТРРА (Treponema pallidum particle agglutination) позволяет применять нагрузочный тест в случае лизиса эритроцитов (распада эритроцитов из-за разрушения их мембраны) сыворотками некоторых больных, а также придает стабильность реагентам.

Трепонемные тесты

Антиген	Улавливающая система	Тест
Живые патогенные трепонемы	Взвесь живых трепонем	РИТ, РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем)
Интактные трепонемы	Трепонемы, фиксированные на стеклах	РИФ (реакция иммунофлуоресценции), РИФ-абс (РИФ с абсорбцией), РИФ-ц, РИФ с капиллярной кровью из пальца и т.п.
Очищенные и разрушенные ультразвуком трепонемы	Связаны с эритроцитами	РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)
	Связаны с желатиновыми частицами	Реакция агглютинации частиц (TPPA)
	Связаны с поверхностью лунок микропланшета	ИФА
	Белки, разделенные методом электрофореза в полиакриламидном геле и перенесенные на мембраны методом вестерн-блоттинга	Иммуноблоттинг
Рекомбинантные	Связаны с поверхностью лунок микропланшета	Рекомбинантный ИФА
	Белки, разделенные методом электрофореза в полиакриламидном геле и перенесенные на мембраны методом вестерн-блоттинга	Иммуноблотинг с рекомбинантными АГ
	Связаны с частицами латекса	Латекс-агглютинация

Читайте также: Подскажите, передается сифилис через презерватив?

Лабораторные анализы на выявления трепонемы называются серодиагностикой. Серодиагностика сифилиса условно подразделяется на две группы:

Специфические анализы, дающие положительную пробу даже после излечения заболевания;
Неспецифические анализы, показывающие результат, при наличии в конкретное время заболевания.

Как называется анализ на сифилис? Исследования в зависимости разделают на 2 группы:

Специфические анализы:

Сифилис рпга, что расшифровывается как реакция пассивной агглютинации или сифилис трна, что переводится — Treponema pallidum haemagglutination;
РИФ или реакция иммунофлюоресценции;
РИТ или реакция иммобилизации трепонем;
Иммуноферментный анализ;
Иммуноблот на сифилис или иммуноблоттинг;

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

1Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
2Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
3Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

Прямые методы

1Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
2Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
3ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
4ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

Непрямые методы

Серологические реакции — это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

1Нетрепонемные тесты:
- Реакция Вассермана (РСК);
- Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
- Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
- Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
- Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней — VDRL.
2Трепонемные тесты:
- Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
- Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
- Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
- Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
- Иммуноблоттинг.

Рисунок 1 — Алгоритм серодиагностики сифилиса

Гистоморфологические методы

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра.

Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста.

Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя.

Позднее проводят серологические анализы. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела к болезни.

Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.

Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.

Трепонемные, объединяющие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики. Пациентам, нуждающимся в обследовании, врач назначает тесты индивидуально.

Биоматериал для исследования

Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

венозной крови;
ликвора (секрета из спинномозгового канала);
содержимое лимфатических узлов;
ткани изъязвлений.

Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

Подтверждаем или исключаем сифилис: анамнез, симптомы, анализы

Подтвердить или исключить диагноз может только дерматовенеролог. Уролог или гинеколог могут лишь заподозрить болезнь по внешним признакам. И тогда они должны направить пациента к дерматовенерологу для дальнейшего обследования, лечения и наблюдения.

Диагноз «сифилис» основывается на совокупности следующих признаков:

На наличии или отсутствии внешних проявлений и симптомов.
На результатах минимум двух лабораторных исследований: нетрепонемного (РМП, или RW, или RPR) и трепонемного (РПГА или ИФА) тестов.
На данных о том, был ли сифилис ранее, и проводили ли уже его лечение.

Если симптомы присутствуют

Основные тесты на сифилис — RPR и РПГА

Наиболее очевидным и обоснованным диагноз считается тогда, когда имеются клинические симптомы и подтверждающие результаты двух анализов: RPR (или RW, РМП) и РПГА (или ИФА).
Если же при наличии симптомов результаты анализов расходятся, и RPR отрицательный, а РПГА (или ИФА) положительный, проводят дополнительный трепонемный тест — ИФА (или РПГА, если вначале проводился ИФА). В случае положительного дополнительного анализа диагноз считается доказанным и проводится лечение, в случае отрицательного — кровь отправляют в экспертную лабораторию.Отрицательный RPR при положительном ИФА/РПГА встречается обычно в позднем периоде. Тогда на наличие инфекции обязательно исследуют спинномозговую жидкость (РИФ-ц, РИТ).
Обратная ситуация, когда RPR положительный, а РПГА отрицательный (или сомнительный) встречаются крайне редко. Это возможно в первые 3–4 недели после появления твердого шанкра, а также во вторичном периоде во время иммунной «прозоны» (чрезмерно большого количества антител). В этом случае анализ рекомендуется повторить.

RPR/RW/

РМП

РПГАИФАЛечение проводилосьДиагнозДальнейшая тактика

+	+	+	–	«Сифилис»	Лечение
–	+	+	–	«Поздний сифилис»	Исследование спинномозговой жидкости. Лечение

Если внешних признаков нет

Тогда диагностика усложняется. Здесь врачи опираются только на анализы и сведения о проводимом или непроводимом ранее лечении.

Варианты в этом случае:

Если нетрепонемный (один из РМП/RW/RPR) и трепонемный тест (РПГА/ИФА) — положительны, проводится дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА, если первый тест был РПГА, и наоборот — РПГА, если был ИФА). Если тест становится отрицательным, то кровь пациента направляют в экспертную лабораторию и проводят дополнительные анализы. В случае если второй трепонемный тест становится положительным, ставят диагноз: «скрытый сифилис».Такое состояние может наблюдаться некоторое время после проведенного лечения. Если пациенту было проведено до этого лечение, то для того чтобы подтвердить диагноз, проводят дополнительное исследование на IgM. При положительных результатах — диагноз подтверждается, но исследование все равно рекомендуется повторить через 2 недели. При отрицательных результатах сифилис опровергается.
Если нетрепонемный тест (РМП/RW/RPR) отрицательный, а трепонемный (РПГА/ИФА) положительный, то состояние может оцениваться как «поздний сифилис» или «отсутствие сифилиса», если пациенту было проведено ранее полноценное лечение. Для разграничения этих двух состояний проводят дополнительный тест на IgM (ИФАIgM, РИФ-абс-IgM, Иммуноблоттинг-IgM). Если IgM в крови имеются, ставят «поздний сифилис» и лечат. Если нет — пациент считается здоровым.
Если RPR (или RW/РМП) положительный, РПГА положительный, а ИФА отрицательный (или наоборот: РПГА «-» и ИФА «+»), то результаты анализов вызывают сомнение и рекомендуется отправить кровь в экспертную лабораторию или провести альтернативные анализы (РИФ, Иммуноблоттинг).
Если нетрепонемный тест (PMП/RW/RPR) положительный, а трепонемный (РПГА/ИФА) отрицательный, то проводится дополнительный трепонемный тест (ИФА/РПГА). Если он дает положительный результат, то кровь направляют в экспертную лабораторию. Если отрицательный, то диагноз опровергается, а результат нетрепонемного теста признается ложноположительным.

Классификация методов лабораторной диагностики

Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения.

На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода.

Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес.

— после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении.

Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем.

В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др.

Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя.

Читайте также: Сифилис при беременности

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

1. Нетрепонемные тесты

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные.

Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена.

В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др.

С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения.

Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов.

В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра.

Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии.

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями.

При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%.

РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных.

РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

Таблица 1 — Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице

Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

1Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
2Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
3Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
4Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
5Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

Некоторые пациенты, приходя на обследование к гинекологу или андрологу, не предоставляют объективную информацию о качестве своей половой жизни.

Возможно, причина — в обычном смущении, а может, виной тому является недостаток информации в области венерических заболеваний.

Где сдавать анализ

Результаты анализов и клинические проявления напрямую зависят от иммунного ответа организма.

Ранний сифилис

В условиях оборудованных лабораторий и медицинских центров, определение методом иммуноферментной реакции трепонем может производиться несколькими методами, которые называются прямыми и непрямыми.

Однако в основе данных реакций лежит один способ, который позволяет произвести анализ на сифилис методом ИФА. Проводится данный тест определенным образом.

У врача лаборанта имеется специальный планшет – панель, с лунками в виде углублений округлой формы в количестве до ста. Когда определяется сифилис методом ИФА, используется специально приготовленные концентрированные антигены к сифилису в наборах, для данного анализа, которые помещаются в лунки планшета ИФА.

После взятия крови пациента в утренние часы натощак, из крови отделяется сыворотка и помещается в лунки с антигенами. В лунках происходит реакция связывания антигена с антителами.

ВАЖНО ЗНАТЬ!

Метод ИФА на сифилис основан на реакции связывания иммунных соединений первого этапа и конъюгатов со специальной ферментной меткой, которая нужна для считывания качества реакции.

На данном этапе помимо ферментной пероксидазы вносится хромогенные красящие вещества, для окрашивания материала в зависимости от исхода реакции. На основании появившихся окрашенных лунок в планшете производится расшифровка ИФА сифилиса.

В наборах к различным методам ИФА прилагаются таблицы цветовых схем, по которым определяется количество, уровень иммуноглобулинов, антител из сыворотки пациента в 1 единицы объема.

Также для оценки исхода реакции используется специальное оборудование, спектрофотометр для проведения фотометрирования и оценки плотности материала в лунках по сравнению с контрольными пробами.

На основании плотности и получают результат, четко установленный для каждого возбудителя сифилиса в пределах норм и патологии.

Для получения максимально точных результатов лабораторной диагностики венерического заболевания сифилиса рекомендуется использовать сразу несколько тестов, правда продолжительность такого исследования занимает немного больше времени, однако это того стоит.

Чаще всего сданный анализ крови на сифилис после исследований выдается в виде цифр, расшифровка которых имеет следующее обозначение:

«4+»- говорит о резко положительном результате;
«3+» — просто положительный результат;
«2+» — слабоположительный результат;
«1+» — сомнительный результат;
«-» — отрицательный результат.

Однако получив результаты анализов с положительными данными, не стоит сразу отчаиваться, как уже было отмечено выше, не все тесты способны дать полную информацию о наличии именно сифилиса.

К примеру, клинический анализ RW в силу своей недостаточной специфичности, может давать ложноположительные результаты в том случае если пациент страдает другими заболеваниями. Такими как:

красная волчанка;
ревматоидный артрит;
склеродермия;
мононуклеоз;
корь;
гепатит;
инфаркт;
злокачественное образование на каком-либо органе.

Также ложноположительные результаты могу быть выявлены у полностью здоровых людей или людей злоупотребляющих алкоголем и наркотиками.

Именно поэтому хочется подчеркнуть сказанное ранее, о том, что необходимо проводить анализ крови на сифилис сразу несколькими методами и желательно с помощью трепонемного тестирования.

Не маловажную роль в достоверности результатов полученного анализа сыворотки крови на сифилис играет и правильная подготовка к его сдаче, а также выбор лаборатории для диагностики. Сегодня подобный анализ проводится как в государственных, так и частных медицинских лабораториях.

Безусловно, в частных учреждениях такая диагностика будет иметь определенную стоимость, как правило, цена анализов зависит от выбранного метода и срочности исследования. Также здесь вы сможете сделать это анонимно.

Чтобы анализ крови на сифилис был максимально точным, следует соблюсти несколько простых правил:

Во-первых, сдавать кровь исключительно натощак и лучше в первой половине дня.
Во-вторых, накануне сдачи анализов категорически запрещается употреблять какие-либо алкогольные напитки, даже с самым низким составом.
В-третьих, кроме сыворотки крови, которую обычно берут из локтевой вены, в качестве материала для лабораторных исследований на предмет наличия у вас сифилиса могут стать отделяемое шанкра (характерных сифилитических высыпаний) или пункция лимфоузлов.

Если у вас есть подозрение на то, что вы или кто-то из ваших близких инфицировались сифилисом, но по каким-либо причинам сделать лабораторный анализ крови больного на сифилис не представляется возможным, то для первичной диагностики можно воспользоваться специальным экспресс-тестом в домашних условиях.

Приобрести подобный тест можно в любой аптечной сети и проводить его строго соблюдая прилагаемую инструкцию. Только в этом случае вам удастся получить достоверный результат.

Как правило, экспресс-диагностика сифилиса в домашних условиях проводится на основе крови. Потребуется буквально одна капля, чтобы получить ожидаемый результат, который, не заставит себя ждать (буквально несколько минут).

Также существуют наборы для диагностики сифилиса в домашних условиях с дальнейшей отправкой взятого биологического материала в специализированное учреждение.

При этом не следует пренебрегать консультацией специалиста, и, проведя самостоятельное диагностирование, заниматься самолечением, или напротив, отказаться от него, полагая, что болезни у вас нет. В любом случае, для прояснения полной картины, необходимо в обязательном порядке обратиться к врачу.

Иммуноферментный анализ (ИФА; The enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) является одним из многочисленных методов серологической диагностики инфекционных заболеваний.

Иммуноферментный анализ (ИФА) в серодиагностике сифилиса — это тест на антитела классов M, G и A (IgM, IgG, IgA) против антигенов бледной трепонемы. Возможна постановка ИФА с ликвором.

Внедрение в практику иммуноферментного анализа (ИФА) вместо реакции Вассермана и других кардиолипиновых тестов значительно повысило качество лабораторной диагностики сифилиса. Существенным преимуществом данного метода является возможность автоматизации процесса исследования, что позволяет снизить влияние человеческого фактора.

1. История метода ИФА

Основные принципы иммуноферментного анализа на поверхности твердофазного носителя разработали E. Engvar и соавтор.

(1971), B. Van Weeman и A.

Schuurs (1971). Разработанный ими иммуноферментный анализ впервые был предложен для диагностики сифилиса в 1975 г.

J. Veldkamp и A.

Visser, которые оценили потенциал этого автоматизированного теста. ИФА начал повсеместно использоваться в диагностике сифилиса в 1980-е гг.

, когда были разработаны и сертифицированы диагностические тесты и стандартизированы методики тестирования. В СССР методику постановки ИФА для диагностики сифилиса разработали B.

Н. Беднова, А.

В. Бабий и А.

В. Котровский (1982, 1983).

2. Принцип метода ИФА

Иммуноферментный анализ (ИФА) по механизму реакции близок к РИФ (выявляются те же антитела). Реакцию иммуноферментного исследования относят к иммунологическим реакциям, основанным на высокоспецифическом взаимодействии антигенов бледной трепонемы с антителами больного сифилисом.

В сифилидологической практике используется в основном непрямой вариант ИФА. Принцип наиболее часто используемого непрямого варианта реакции состоит в следующем.

На поверхности лунок полистиролового планшета фиксируются иммунные комплексы, образующиеся при взаимодействии антител больного сифилисом с антигенами бледной трепонемы.

После этого их выявляют их в цветной реакции с помощью специфических коньюгатов и соответствующих субстратно-хромогенных добавок.

Порядок выполнения теста следующий: на твердофазный носитель с присоединенным к нему антигеном помещается сыворотка больного. При наличии в ней антител, на поверхности носителя образуется комплекс антиген-антитело.

Для «проявления» результатов реакции используются антивидовые антитела к Ig человека, конъюгированные с ферментными маркерами. В случае положительной реакции фермент, присоединившийся к комплексу антиген-антитело, разлагает добавленный в систему субстрат, в результате чего развивается цветное окрашивание разной интенсивности.

В реакции определения комплекса сорбированных на твердой фазе АГ и АТ проводят с помощью антиглобулиновых антител, меченных ферментом, по цветной реакции фермента с субстратом.

В реакции определение комплекса сорбированных на твердой фазе антигенов и антител проводят с помощью антиглобулиновых антител, меченных ферментом.

ИФА представляет возможность выявления сывороточных Ig разных классов. На рынке представлены системы, позволяющие определять раздельно IgM и IgG и суммарные антитела.

С развитием лабораторной диагностики в условиях модернизации здравоохранения РФ в практику лабораторий вошла автоматизация лабораторных исследований, которая позволяет стандартизовать аналитические этапы исследований.

Это способствует повышению качества диагностики. С внедрением автоматизации стали применяться новые высокотехнологичные методы, обладающие высокой чувствительностью и специфичностью, такие как иммунохемилюминесцентный анализ (ИХА) (chemiluminescence immunoassay — CLIA).

Определить сифилис методом ИФА, достоинства:

Высокая чувствительность метода – более 90%;
Возможность отслеживать динамику заболевания, сравнивая количество антител в разные промежутки времени;
Доступность метода практически в любом медучреждении.

Для исключения риска искажения результатов при прохождении анализа необходимо соблюдать правила. Если этого не сделать, возможен ложноположительный анализ на сифилис. Для исключения погрешности, необходимо:

Сдавать кровь натощак;
Воздержаться за несколько дней от спиртного, жирной пищи и физической утомляемости;
Не курить за 2 часа до анализа;
Рассказать о принимаемых препаратах, о проведенных недавно прививках, о наличии заболеваний, о состоянии беременности и прочих имеющихся обстоятельствах.

Длительность проведения ИФА на сифилис зависит от загруженности лаборатории и наличии в ней медицинского оборудования.

Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы.

Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы.

Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

Рисунок 4 — Схема ИФА (иммуноферментного анализа)

Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

Для исследовательских манипуляций зачастую используют кровь из вены. При определенных ситуациях лаборант может взять нужный образец для диагностики из пальца, либо из спинного мозга.

Промежуток от момента сдачи до получения результатов может быть различным: от одного дня до двух недель. Все будет определяться видом тестирования.

При подготовке к сдаче анализа крови на выявление рассматриваемого недуга нужно придерживаться следующих рекомендаций:

Начинать исследование организма на выявление рассматриваемого недуга следует с неспецифических тестов.

В большинстве случаев врач выписывает направление на МР. Даже, если результат слабоположительный («+»), пациент продолжает обследование — но на этот раз он будет сдавать специфические анализы (зачастую это РИФ и РПГА).

Ни один тест не может дать 100% гарантии того, что человек заражен сифилисом.

Положительный анализ не всегда свидетельствует о заболевании.

Он может быть ложным при следующих явлениях:

Инфицирование организма (мононуклеоз, туберкулез).
Беременность.
Онкозаболевание.
Аутоиммунные патологии.
Человек ранее был заражен сифилисом и прошел успешное лечение.

Отправляет пациентов на анализ врач-венеролог. Частные лаборатории делают анонимные исследования на сифилис по желанию клиента. Для сдачи теста в них не нужно направление врача.

Правила проведения исследования:

Кровь в лаборатории берут утром на пустой желудок (едят после процедуры). До анализа разрешено пить только воду.
За 2 суток до обследования запрещено: питаться жирной едой и употреблять спиртное.
Кровь берут из пальца или вены.
Сколько длится исследование? Обычно не больше суток. Расшифровку анализов на сифилис получают у лаборантов либо лечащего врача.
Сколько действителен тест? По прошествии 3 месяцев результаты анализов теряют силу. Их сдают снова.

Если расшифровка анализа показывает, что тест положителен, необходимо посетить венеролога, который назначит дополнительное обследование для точного подтверждения диагноза и подберет схему необходимого лечения.

Анализ ИФА на сифилис

Сифилис – серьезное венерическое заболевание. Оно способно вызвать множество осложнений и поэтому требует определенного внимания и тщательно подобранной терапии. Лечение зависит от своевременной и полной диагностики заболевания.

Одним из наиболее информативных специфических методов диагностики является анализ крови на сифилис методом ИФА. Нередко ИФА используют без предварительного проведения неспецифических тестов. Ввиду быстроты выполнения и своей высокой надежности.

Анализ ИФА на сифилис: достоинства и недостатки

ИФА - метод иммуноферментного анализа. Является лабораторным иммунологическим тестом. Оценивает количество определенных соединений в организме (белки, бактерии, вирусы). В основе лежит реакция антигена и антитела.

Результат выдается в качественной или количественной оценке.

В настоящий момент является одним из наиболее современных анализов на сифилис. Широко используется в повседневной врачебной практике. Анализ ИФА на сифилис зарекомендовал себя как один из наиболее информативных методов диагностики.

Обладает большим количеством преимуществ при относительно малых недостатках.

Преимущества анализа на сифилис методом ИФА:

Высокая информативность
Доступность в каждом медицинском учреждении
Низкий процент ошибочных результатов
Возможность определения не только заболевания, но и его стадии
Удобен в отслеживании динамики болезни

К недостаткам можно отнести:

Определение антител, но не самого возбудителя

Впрочем, данный недостаток является весьма спорным. Так как наличие антител к возбудителю ясно дает понять о том, что сам возбудитель находится или находился в организме человека. В данном случае это бледная трепонема.

Следует отметить, что иногда можно наблюдать ложноположительный результат. Это происходит в том случае, если клетки организма вырабатывают антитела, схожие с антителами к сифилису.

Подобные явления могут происходить при наличии следующих заболеваний:

Инфекционные заболевания
Диабет I и II типа
Беременность
Злоупотребление алкогольными и наркотическими веществами
Прививки, выполненные за несколько месяцев до анализа
Патологии соединительной ткани
Перенесенный ранее сифилис (результат может быть положительным в течение года)

Суть анализа ИФА на сифилис заключается в определении антител, которые вырабатывают к возбудителю сифилиса: IgG, IgM, IgA.

Каждый из иммуноглобулинов показывает разные характеристики заболевания:

IgG – нахождение иммуноглобулина G свидетельствует о том, что болезнь находится на своем пике, либо недавно была начата массивная терапия
IgM – показывает насколько давно протекает инфекционный процесс
IgA – присутствие данного иммуноглобулина говорит о том, что заражение произошло не более месяца назад

Для проведения теста берется венозная кровь, натощак (пациент не ест и не пьет за 8 часов до анализа). За сутки до анализа, запрещается употребление спиртных напитков, копченных и острых продуктов. Тест проводится в лабораторных условиях с использованием планшетов с антителами к иммуноглобулинам. Смешивают сыворотку крови пациента с различными реагентами. О положительном результате говорят, если после смешения в лунке наблюдается желтый цвет. При неизменённом цвете анализ является отрицательным.

При присутствии любого из перечисленных выше иммуноглобулинов, признается положительным анализ на сифилис ИФА методом. Также имеет значение их различные комбинации.

Сочетания антител позволяет судить о давности заражения:

Присутствие всех трех иммуноглобулинов говорит о том, что инфицирования произошло более месяца назад
Если положителен IgG и IgA, то от начала болезни прошло не более месяца
При присутствии только IgA считается, что заражению не более 2 недель
Только IgG встречается в тех случаях, когда заражение было давно, либо сифилис был адекватно вылечен

Дальнейшие действия врача и пациента зависят от полученных данных. Отрицательный результат говорит об отсутствии заболевания. Ложноотрицательные пробы при иммуноферментном анализе практически не встречаются.

При положительном результате назначаются дополнительные методы исследования для исключения ложноположительного образца. Если подтверждается диагноз, то назначается интенсивная терапия, зависящая от формы и стадии сифилиса. А также общего состояния больного.

При подозрении на сифилис обращайтесь к опытному венерологу!

Метод диагностики сифилиса: иммуноферментный анализ крови – ИФА (положительный)

Опубликовано: 26 авг 2013, 15:36

Ни для кого не является секретом, что своевременная диагностика любого заболевания означает едва ли не половину успеха его лечения. Очень важно подобрать именно те анализы, методы или способы диагностики, которые действительно помогут поставить точный диагноз, а не запутают врача еще сильнее. Иммуноферментный анализ крови давно зарекомендовал себя методом, позволяющим не только получить положительный или отрицательный ответ на вопрос – болен ли человек какой-либо половой инфекцией, но и определить, на какой стадии развития находится заболевание, а также понять, была ли подобная проблема у пациента в анамнезе. ИФА на сифилис на сегодняшний день – один из наиболее чувствительных и специфичных анализов, при этом его точность составляет около 90%.

Тест-системы, которые использует метод иммуноферментной диагностики, предназначены для выявления не только сифилиса, но и множества других инфекций: гепатит, ВИЧ, ЦМВ, герпес, токсоплазмоз и т.д. Анализ ИФА на сифилис позволяет определить антитела (IgG, IgA, IgM) к бледной трепонеме, содержащейся в крови больного человека. Этот метод позволяет увидеть взаимодействие антител со специальными препаратами, в которых заложены антигены, способные в комплексе с антителами образовать признак заболевания, хорошо заметный при различных способах диагностики.

В основе иммуноферментного анализа на сифилис лежит метод взаимодействия выявляемых в крови антител с антигеном возбудителя инфекции. Диагностика будет зависеть от того, какие именно антитела использовались: могут выявляться либо антитела определенного класса, либо в общем. Для диагностики этим методом кровь берется натощак из вены.

ИФА анализ крови на сифилис подразумевает использование трех классов иммуноглобулинов: G, M, A. Указанные иммуноглобулины имеют одно важное для диагностики сифилиса методом ИФА свойство: они вырабатываются в строго определенной последовательности, благодаря чему ИФА позволяет определить, на какой именно стадии находится процесс и какова динамика его развития:

Иммуноглобулин М в крови показывает, сколько времени прошло с момента заражения. Однако не всегда положительные результаты его наличия означают наличие венерического заболевания: возможно, у человека произошло обострение какой-либо хронической болезни, вызвавшее подобную реакцию.
Наличие антител IgA означает, что с момента заражения прошло не менее месяца.
Поскольку иммунитет к данному заболеванию не вырабатывается, положительный результат обследования на IgG может показывать как пик заболевания, так и период после пройденной терапии.

Что означает ИФА на сифилис положительно?

Следует отметить, что ИФА положительный на сифилис – это не повод для паники. Дело в том, что такой метод позволяет определить лишь наличие антител, но не возбудителя. Следовательно, если результат ИФА сифилис – положительно, это еще не является основанием для того, чтобы поставить диагноз. Однако в научном мире тест-системы совершенствуются ежедневно, и на сегодняшний день это означает, что в большинстве случаев результатам анализов все же можно доверять.

Результатов диагностики бывает всего два: «положительный» и «отрицательный». В первом случае положительные данные означают, что у пациента заболевание в одной из стадий, либо что он совсем недавно окончил курс лечения. Отрицательный же результат иммуноферментного исследования крови означает либо отсутствие заболевания, либо очень раннюю стадию его развития.

загрузка...

Интересные материалы по этой теме!

26 авг 2013, 11:54Симптомы сифилисаПервые симптомы сифилиса проявляются через 3-5 недель после инфицирования. До этого момента заболевание протекает без каких-либо внешних проявлений.... 26 авг 2013, 14:44Анализы на сифилисОчень часто после незащищенного полового акта, человек, подозревающий у себя сифилис, ВИЧ или гепатит,...

загрузка...

Оксана - 01 фев 2018, 21:14

Муж сдал анализы на сифилис, ИФА на сифилис - положительно, РМП на сифилис - отрицательно. И что это означает?

Мария - 28 июл 2017, 09:25

Во время беременности (срок был 37 недель) ИФА бал положительный 2,1. После родов 2 раза сдавала анализы - все было отрицательно. Спустя 6 месяцев сдала повторно, ИФА - положительно, КП=1,9.(IgM+IgG). Что это значит??????

Оксана - 17 ноя 2016, 16:16

Здравствуйте! Что означает: анализ крови на сифилис ИФА (суммар.ат.) положительный?

Светлана - 10 ноя 2016, 17:44

Подскажите пожалуйста, что означает рмп1+, рпга 1+ ифа в сумме отрицательно! Заранее спасибо.

Маша - 07 апр 2016, 16:13

ИФА бывает ложноположительный!

Диагностика сифилиса: как врачи определяют болезнь

Диагностика сифилиса намного сложнее диагностики других половых инфекций. Это объясняется тем, что возбудитель болезни не задерживается в половых путях, а проникает в организм и успешно прячется в теле человека, до определенного времени не выдавая себя симптомами и внешними проявлениями. И «поймать за хвост» эту инфекцию удается редко. Поэтому медики пользуются косвенными методами — серологическими реакциями, которые показывают не наличие самого возбудителя, а иммунный ответ организма.

Структурное изображение антител

Иммунный ответ — это сложный биохимический процесс, основу которого составляют антитела (белки-защитники) — IgM и lgG. Вначале появляются IgM, где-то спустя 7–10 дней после появления твердого шанкра, и сохраняются они в течение всего раннего сифилиса (то есть первые 2–4 года болезни). В позднем сифилисе IgM постепенно исчезают. Если болезнь обнаружена в раннем периоде, и проведено полноценное лечение, то IgM также исчезают. IgG вырабатываются в организме позже, примерно через 3–4 недели после появления твердого шанкра. Эти антитела сохраняются на всем протяжении болезни и остаются в течение нескольких лет даже после лечения.

Этим объясняется зависимость результатов разных анализов от периода болезни. Нетрепонемные тесты (РМП или RPR) реагируют на IgM. Поэтому они становятся положительными раньше трепонемных, и отрицательными — после проведенного лечения (или в третичном периоде). Трепонемные тесты (например, РПГА) реагируют на IgG, и, соответственно, выдают положительную реакцию позже и остаются положительными после лечения.

Кроме того, IgM, в отличие от IgG, являются очень крупными белками и менее специфичными, тесты на них часто ошибаются — IgM можно легко спутать с другими белками в крови. Поэтому нетрепонемные тесты часто выдают ложноположительные результаты.

Серологические реакции — анализы, которые показывают иммунный ответ организма. На разных периодах сифилиса активизируются разные типы антител. По этим типам врачи определяют стадию сифилиса.

Как результаты анализов связаны с клиническими проявлениями

Результаты анализов и клинические проявления напрямую зависят от иммунного ответа организма.

Ранний сифилис

Первичный период характеризуется возникновением твердого шанкра — сифилитической язвы. В это время организм только начинает реагировать на инфекцию. Сразу после появления твердого шанкра иммунного ответа еще нет, и анализы крови будут отрицательными (серонегативная фаза первичного периода). Затем постепенно появляются антитела, иммунитет нарастает, и уже скоро серологические реакции дают положительный результат (серопозитивная фаза первичного периода).Нетрепонемные тесты покажут болезнь через семь–десять дней после возникновения твердого шанкра, трепонемные — через 3–4 недели.
До того, как анализы крови станут положительными, диагноз можно подтвердить с помощью прямых методов диагностики — темнопольной микроскопии или ПЦР. Материалом для этих исследований служит соскоб с твердого шанкра. Эти анализы покажут, есть ли в язве бледные трепонемы или нет. Подробнее о том, как ведет себя иммунитет человека при сифилисе, читайте в отдельной статье.
Наиболее напряженный иммунитет к сифилису вырабатывается во вторичном периоде, когда тело человека полностью покрывается сыпью. В этот период становятся положительными все анализы — и трепонемные, и нетрепонемные. Еще в это время возможно исследование высыпаний с помощью прямых методов диагностики: бледную трепонему можно обнаружить во рту или в мокнущих элементах сыпи.

Поздний сифилис

В третичном периоде иммунная система перестраивается, реакция организма приобретает аллергический характер: на коже появляются бугорки и гуммы. Снижаются и исчезают lgM, соответственно становятся отрицательными нетрепонемные тесты. Кроме того, в этот период поражается нервная система, и потому становятся положительными анализы при исследовании спинномозговой жидкости.

Пролеченный сифилис

После полноценного лечения все кожные проявления исчезают, а нетрепонемные тесты становятся отрицательными. Трепонемные тесты могут оставаться положительными в течение нескольких лет и даже в течение всей жизни. О том, что ждет проболевших сифилисом, читайте в статье «Жизнь после лечения сифилиса».

Скрытый сифилис

Скрытой болезнь может быть как в раннем периоде, так в позднем. В раннем периоде, как правило, становятся положительными трепонемные и нетрепонемные тесты. Исследование спинномозговой жидкости дает отрицательный результат, так как нервная система еще не поражена. В позднем периоде постепенно остаются положительными только трепонемные тесты. Результаты исследования спинномозговой жидкости становятся положительными.

Поздний скрытый и пролеченный сифилис между собой очень похожи: отсутствуют клинические симптомы и остаются положительными серологические реакции. Чтобы различить эти два диагноза, проводят анализ на определение IgM: если антитела «М» есть, то сифилис считается скрытым, если нет — то пролеченным.

Подтверждаем или исключаем сифилис: анамнез, симптомы, анализы

Диагноз «сифилис» основывается на совокупности следующих признаков:

На наличии или отсутствии внешних проявлений и симптомов.
На результатах минимум двух лабораторных исследований: нетрепонемного (РМП, или RW, или RPR) и трепонемного (РПГА или ИФА) тестов.
На данных о том, был ли сифилис ранее, и проводили ли уже его лечение.

Основные тесты на сифилис — RPR и РПГА

Наиболее очевидным и обоснованным диагноз считается тогда, когда имеются клинические симптомы и подтверждающие результаты двух анализов: RPR (или RW, РМП) и РПГА (или ИФА).
Если же при наличии симптомов результаты анализов расходятся, и RPR отрицательный, а РПГА (или ИФА) положительный, проводят дополнительный трепонемный тест — ИФА (или РПГА, если вначале проводился ИФА). В случае положительного дополнительного анализа диагноз считается доказанным и проводится лечение, в случае отрицательного — кровь отправляют в экспертную лабораторию.Отрицательный RPR при положительном ИФА/РПГА встречается обычно в позднем периоде. Тогда на наличие инфекции обязательно исследуют спинномозговую жидкость (РИФ-ц, РИТ).
Обратная ситуация, когда RPR положительный, а РПГА отрицательный (или сомнительный) встречаются крайне редко. Это возможно в первые 3–4 недели после появления твердого шанкра, а также во вторичном периоде во время иммунной «прозоны» (чрезмерно большого количества антител). В этом случае анализ рекомендуется повторить.

RPR/RW/

РМП

РПГА ИФА Лечение проводилось Диагноз Дальнейшая тактика

+	+	+	–	«Сифилис»	Лечение
–	+	+	–	«Поздний сифилис»	Исследование спинномозговой жидкости. Лечение

Если внешних признаков нет

Варианты в этом случае:

Если нетрепонемный (один из РМП/RW/RPR) и трепонемный тест (РПГА/ИФА) — положительны, проводится дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА, если первый тест был РПГА, и наоборот — РПГА, если был ИФА). Если тест становится отрицательным, то кровь пациента направляют в экспертную лабораторию и проводят дополнительные анализы. В случае если второй трепонемный тест становится положительным, ставят диагноз: «скрытый сифилис».Такое состояние может наблюдаться некоторое время после проведенного лечения. Если пациенту было проведено до этого лечение, то для того чтобы подтвердить диагноз, проводят дополнительное исследование на IgM. При положительных результатах — диагноз подтверждается, но исследование все равно рекомендуется повторить через 2 недели. При отрицательных результатах сифилис опровергается.
Если нетрепонемный тест (РМП/RW/RPR) отрицательный, а трепонемный (РПГА/ИФА) положительный, то состояние может оцениваться как «поздний сифилис» или «отсутствие сифилиса», если пациенту было проведено ранее полноценное лечение. Для разграничения этих двух состояний проводят дополнительный тест на IgM (ИФА IgM, РИФ-абс-IgM, Иммуноблоттинг-IgM). Если IgM в крови имеются, ставят «поздний сифилис» и лечат. Если нет — пациент считается здоровым.
Если RPR (или RW/РМП) положительный, РПГА положительный, а ИФА отрицательный (или наоборот: РПГА «-» и ИФА «+»), то результаты анализов вызывают сомнение и рекомендуется отправить кровь в экспертную лабораторию или провести альтернативные анализы (РИФ, Иммуноблоттинг).
Если нетрепонемный тест (PMП/RW/RPR) положительный, а трепонемный (РПГА/ИФА) отрицательный, то проводится дополнительный трепонемный тест (ИФА/РПГА). Если он дает положительный результат, то кровь направляют в экспертную лабораторию. Если отрицательный, то диагноз опровергается, а результат нетрепонемного теста признается ложноположительным.

Для более простого понимания материала приведем таблицу расшифровки результатов клинико-лабораторного исследования пациента:

RPR/RW/

РМП

РПГА ИФА Лечение проводилось Диагноз Дальнейшая тактика

+	+	+	–	Скрытый сифилис	ИФА/РИФ на IgM
+	+	+	+	Состояние после лечения	Рекомендуется наблюдение у врача, повтор анализов через 2 недели
+	–	+	–	Сомнительный результат анализов	Рекомендуется направить кровь в экспертную лабораторию
+	+	–	–	Сомнительный результат анализов	Рекомендуется направить кровь в экспертную лабораторию
–	+	–	–	Сомнительный результат анализов	Рекомендуется направить кровь в экспертную лабораторию
+	–	–	–	Ложноположительный результат. Пациент здоров	Лечение не требуется
–	+	+	+	Состояние после лечения, пациент здоров	Снятие с учета

назад к разделу «Сифилис» Записаться на прием к венерологу назад к разделу «Сифилис»

Ифа на сифилис