Посев на микрофлору и чувствительность к антибиотикам


Посев на чувствительность к антибиотикам у мужчин и женщин - подготовка и сдача анализа на бакпосев

Бактериологический посев – это анализ, выявляющий в том числе чувствительность патогенного микроорганизма к антибактериальным лекарственным средствам. С помощью этого метода исследования биологического материала специалисты определяют тип возбудителя инфекции, его концентрацию и патогенность, что помогает врачу назначить адекватное, эффективное для конкретного клинического случая специфическое лечение.

Посев на чувствительность, называемый еще бакпосевом на микрофлору – это вид исследования, применяемый при диагностике венерологических, гинекологических, урологических, дерматологических и других инфекционных заболеваний. После забора биологического материала производится его посев в различные питательные среды. Спустя некоторое время «разросшиеся» на нем в результате искусственного культивирования микроорганизмы тестируют на чувствительность к разным типам антибиотиков или противомикробных препаратов.

Исследование, называемое антибиотикограммой, демонстрирует, от препаратов какой фармакологической группы быстрее всего погибнет возбудитель инфекции. Кроме того, анализ определяет концентрацию патогенных микроорганизмов (выражается в КОЕ/мл, называемых колониеобразующими единицами), их резистентность (устойчивость) по отношению к медикаментозным средствам и внешним факторам. Для проведения исследования могут забираться следующие биоматериалы:

  • кровь;
  • урина;
  • желчь;
  • кал;
  • сперма;
  • спинномозговая жидкость;
  • слизь из уретры;
  • слизь из цервикального канала;
  • слизь из зева;
  • слизь из носоглотки;
  • мокрота;
  • содержимое кисты;
  • содержимое очага воспаления;
  • раневое отделяемое;
  • грудное молоко;
  • секрет простаты.

Выращивание колоний патогенных микроорганизмов на исследуемых материалах проводят в чашках Петри, либо сначала в жидкой среде, а затем на скошенном агаре в термостате на протяжении суток. После штаммы полученной культуры переносят на предметное стекло, окрашивают и изучают морфологические свойства микроорганизма под микроскопом. Внимание обращают на размер и форму клеток и их тинкториальные свойства (отношение к окрашиванию).

Бакпосев на микрофлору широко применяется в медицинской практике при диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний (в гинекологии, урологии, венерологии, отоларингологии, хирургии и других областях), и при риске развития сепсиса (системной реакции на развивающееся воспаление). Анализ на чувствительность к антибиотикам позволяет выявить и вывести возбудителей следующих заболеваний:

  • бактериальный вагинит;
  • инфекционные ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем);
  • хламидиоз;
  • гонорея;
  • трихомониаз;
  • цистит;
  • кишечная инфекция;
  • пневмония;
  • туберкулез;
  • ангина и мн. др.

Определение чувствительности к антибиотикам при беременности проводится как минимум дважды – сразу после постановки на учет и на 36 неделе. Делается мазок из влагалища и со слизистой оболочки зева и носоглотки. Биоматериал исследуют, определяют наличие урологических и мочеполовых инфекций и золотистого стафилококка – возбудитель, провоцирующий гнойный мастит, послеродовой сепсис и др. инфекции в период после родоразрешения. При наличии показаний (заболевания почек, повышенный уровень лейкоцитов в моче и др.) могут назначаться:

  • посев мочи;
  • мазок из шейки матки;
  • соскоб влагалищного эпителия;
  • бактериальный посев из цервикального канала.

Виды исследуемых микроорганизмов

В зависимости от типа биоматериала и показаний к проведению анализа по результатам исследования выделяют следующие виды патогенных возбудителей бактериальных инфекций:

  1. Слизь из носоглотки и зева: золотистый стафилококк, гемолитический стрептококк, менингококк, листерия, коринебактерия дифтерии, гемофильная палочка, синегнойные пневмококки.
  2. Гнойное отделяемое, содержимое ран, биопунктат: синегнойная палочка, псевдомонада.
  3. Урогенитальная слизь: бактериальная флора, возбудители мочеполовых инфекций (микоплазма, гарднерелла, уреаплазма, трихомонада, грибы, гонококк, листерия).
  4. Каловые массы: тифопаратифозная бактериальная группа, кишечная группа (иерсинии, сальмонеллы, шигеллы), анаэробные возбудители пищевых инфекций, условно-патогенные возбудители кишечных инфекций.
  5. Кровь исследуют на стерильность.
  6. Остальные биожидкости – на обсемененность (бактериальную флору).

Подготовка к анализам

По статистике, около 80% ошибок в лабораторных исследованиях вызваны ошибками при сборе и транспортировке материалов для обследования. Как правило, забор осуществляет медицинский персонал, но некоторые биоматериалы больной собирает сам. Поэтому при подготовке к сдаче анализа необходимо соблюдать следующие общие правила:

  • Во время забора биоматериала требуется исключить попадание в него антисептических или дезинфицирующих соединений, обсеменения бактериями и иными организмами. Для этого инструментарий и посуда для сбора должны быть стерильными.
  • На результаты посева на антибиотики влияет прием пациентом антибактериальных и иных медикаментозных препаратов. О терапии необходимо сообщить назначившему анализ врачу, применение лекарств необходимо приостановить за срок не менее 10 суток до назначенной даты анализа.
  • Материалы для обследования должны быть доставлены в лабораторию в специальных герметичных контейнерах в максимально короткие сроки. Во время транспортировки собранные биологические жидкости должны быть защищены от воздействия света, температур, механического воздействия.

Как сдавать анализ

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотикам проводится на разных видах биоматериала. В зависимости от их типа необходимо соблюдать следующие предписания специалистов при заборе проб:

  1. Сбор мочи производят по утрам, натощак, после предварительно проведенных гигиенических процедур. Необходимый объем урины составляет от 10 до 15 мл. Забор производят в специальную стерильную посуду, материал должен быть доставлен в лабораторию не позднее чем через два часа.
  2. Мазок на чувствительность к антибиотикам из носоглотки или зева проводят по утрам, до приема пищи и воды и до проведения гигиенических процедур (чистки зубов и полоскания рта).
  3. Сбор кала производится утром, стерильной лопаткой в стерильную посуду, необходимый объем биоматериала – до 30 мг. Недопустимо попадание мочи, использование клизмы или слабительных препаратов, замораживание. Срок доставки в лабораторию не должен превышать 3-5 часов.
  4. Проба мокроты доставляется в место проведения исследования на протяжении часа после забора, который проводят натощак, после предварительной чистки зубов и полоскания рта.
  5. Пробу грудного молока берут после проведения гигиенических процедур и обработки кожи вокруг соска спиртом. Перед забором материала в объеме 5 мл (в стерильную посуду) сцеживают от 15 мл жидкости. Время доставки в лабораторию не должно превышать 2 часов.
  6. Мазок со слизистых влагалища и другие виды забора материала на мочеполовые инфекции. Анализ проводят не ранее чем через 2 недели после окончания менструации (точную дату определит врач на основе данных о месячном цикле). Последнее мочеиспускание должно быть проведено за два часа до взятия пробы у женщин и за 5-6 – у мужчин.
  7. Объем забранной для посева крови у детей составляет 5 мл, у взрослых – 15 мл.

Сколько делается посев

Посев на флору и чувствительность к антибиотикам проводится в течение некоторого продолжительного времени (по сравнению с готовностью результатов других анализов). Выделение штаммов проводится не одинаково, потому что разные биологические среды человеческого организма требуют индивидуальных подходов. Примерные сроки результатов анализов для разных типов биоматериала:

  • Кал: от 5 дней до недели.
  • Урогенитальные материалы: 4-10 дней.
  • Кровь: 10-14 дней (первые предварительные данные готовы через 3-4 дня).
  • Слизь из зева или носоглотки: от 5 до 7 дней.
  • Посев на флору: 5-10 дней.

Расшифровка

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотику дает представление о качественной и количественной оценке исследуемого образца. Качественная оценка (наличие возбудителя) классифицируется по следующим четырем степеням роста:

  1. Первая. При этой степени рост на твердой среде отсутствует, на жидкой регистрируется небольшой рост.
  2. Вторая. Небольшой рост на твердой среде (до 10 колоний).
  3. Третья. Значительный рост на твердой среде (10-100 колоний).
  4. Четвертая. Больше 100 колоний.

При обнаружении в результате исследования условно-патогенной микрофлоры (непатогенных грамотрицательных бактерий) первые две степени относят к норме, при третьей или четвертой степени говорят о присутствии в организме микробов-возбудителей инфекции, размножение которых стало причиной возникновения и развития заболевания. При наличии в материале патогенной микрофлоры все четыре степени свидетельствуют о наличии болезни. Например, сапрофитная микрофлора в бакпосеве мочи свидетельствует об инфекции мочеполовой системы.

Количественная оценка проводится в колониеобразующих единицах (КОЕ), обозначающих объединение (сообщество) клеток бактерий, образовавших колонию. Она помогает установить степень обсемененности и проконтролировать достаточность назначенных для лечения дозировок лекарственных средств (адекватность проведенных медикаментозных назначений). Принято следующее условное соотношение КОЕ и миллилитров:

  • 1 колония – это 103 КОЕ/мл.
  • 1-5 колоний – это 104 КОЕ/мл.
  • 5-15 колоний – это 105 КОЕ/мл.
  • более 15 колоний – это 106 КОЕ/мл

Тест на чувствительность к антибиотикам, проводимый одновременно с посевом на определение возбудителя инфекции, называют антибиотикограммой. Выделив патогенный микроорганизм, его пересаживают в благоприятную для роста среду, где исследуется резистентность (чувствительность) конкретного штамма к активным компонентам антибактериальных препаратов. Чувствительные к антибиотику патогенные клетки не растут в зоне его действия, устойчивые показывают рост колоний.

Распространенным методом проведения антибиотикограммы является метод диффузии смоченных в антибактериальном препарате бумажных полосок в чашке Петри с исследуемой средой. Их выкладывают по поверхности, отступая на два сантиметра от края чашки и от друг друга. После 5-7 часов при комнатной температуре чашу помещают в термостат на срок от 3 до 5 дней. По результатам исследования рост колоний оценивается следующим образом:

  • Кольцо вокруг полоски диаметром от 2,5 см говорит о повышенной чувствительности микрофлоры к препарату;
  • 2,5-1,5 см – стандартная чувствительность (средняя клиническая эффективность).
  • до 1,5 см – слабая реакция, лечение с высокой вероятностью не будет эффективным.
  • Отсутствие задержки роста колонии – полная устойчивость к медикаментозному средству.

Видео

Бакпосев на микрофлору и чувствительность к антибиотикам: показания, расшифровка

Бакпосев на микрофлору – диагностическая процедура, которая подразумевает высеивание мочи или мазков (биологического материала) на определение питательной среды. Проводится такая манипуляция с целью точного установления вида бактерий или грибов, вызвавших развитие той или иной патологии.

Зачастую подобный анализ назначают гинекологи и урологи при подозрении на наличие у пациента венерических болезней, ЗППП и патологических процессов в области мочевыделительной системы и почек. Но показаниями к проведению бакпосева могут стать и другие заболевания, требующие повышенного внимания медиков. Что это за процедура, какова ее суть, и когда она необходима? Давайте разбираться по порядку.

к оглавлению ↑

Зачем нужен анализ

Посев мочи на флору – это анализ, который направлен на выявление в образце биологического материала патогенных и условно патогенных бактерий. После определения вида микроорганизмов, обнаруженных в моче или мазке, пациенту назначается вторая диагностическая клиническая процедура – антибиотикограмма.

Она нужна для определения, к каким группам противомикробных препаратов те или иные бактерии более всего чувствительны. То есть, врач на основании полученных данных может назначить пациенту препарат узкого спектра действия, необходимого для ликвидации конкретного вида болезнетворных бактерий.

Выше мы упоминали такой термин, как условно патогенная микрофлора. Ее выявление в биологическом образце тоже имеет довольно большое значение, поскольку помогает предотвратить или излечить болезнь на ранней стадии ее развития.

Что это такое условно патогенная микрофлора? Если говорить простыми словами, то УПМФ – это группы бактерий, которые в норме обитают в организме человека, не причиняя ему никакого вреда. Однако при создании благоприятных условий они способны стремительно размножаться, вызывая развитие патологического процесса в организме своего носителя. Нередко такие бактерии вырабатывают устойчивость к различным группам медикаментозных препаратов (в том числе, и к антибиотикам), что значительно усложняет и удлиняет процесс выздоровления.

Приведем небольшой пример. В норме в организме у каждого здорового человека обитает небольшое количество грибков рода Кандида. Они являются возбудителями такой неприятной патологии, как молочница, или кандидоз. Пока они мирно обитают в клетках, переживать об этом не стоит.

Но как только возникнут неблагоприятные внешние факторы (стресс, переохлаждение и др.), грибки начнут быстро размножаться, приводя к развитию молочницы. То есть, говоря проще, эти грибы считаются потенциально опасными (условно патогенными), однако пока они находятся в состоянии покоя, приписывать себе мнимый хронический кандидоз не стоит.

к оглавлению ↑

Каковы плюсы бак посева?

Посев на микрофлору имеет ряд преимуществ перед другими клиническими методиками, направленными на исследование мочи и других биологических образцов. Основными преимущества этого анализа являются:

  • высокая точность, что дает возможность получить максимально правдивые данные;
  • возможность провести тест с любым биологическим материалом – мочой, семенной жидкостью, слюной, мокротой и т. д.;
  • возможность назначить максимально эффективный препарат, с помощью которого можно быстро излечить ту или иную патологию.

Посев мочи на микрофлору имеет также свои недостатки, среди которых на первое место выдвигается довольно продолжительное время ожидания результатов исследования. К тому же собрать материал для такого теста не так просто, как для ОАМ или пробы по методу Нечипоренко.

к оглавлению ↑

Показания к проведению бак посева на микрофлору

Анализ на посев – довольно распространенный метод тестирования биологического материала, который каждый день назначают сотням пациентов. Однако для этого должны иметься определенные показания, одним из которых является подозрение на наличие болезнетворных микроорганизмов в крови человека.

Так когда принято назначать бактериальный посев? Показаниями к проведению этого теста являются следующие патологии (или подозрение на наличие таковых):

  1. Цистит. В данном случае проводится не только посев на микрофлору, но и на чувствительность к антибиотикам. Почитайте, что показывает общий анализ мочи при цистите.
  2. Хламидиоз.
  3. Гонорея.
  4. Трихомониаз.
  5. Уреаплазмоз.
  6. Вагинальный кандидоз.
  7. Бактериальные вагиниты.

Эти заболевания мочеполовой системы чаще всего требуют анализа на микрофлору. Но есть и другие, при которых этот тест тоже играет довольно серьезную роль. Это респираторные патологии инфекционного характера.

  1. Ангина. Любой вид тонзиллита – бактериальный, кандидозный, гнойный и др. – может стать основанием для взятия мазка. В этом случае проводится посев из зева на микрофлору.
  2. Воспаление легких или пневмония – анализ мокроты.
  3. Туберкулез.

Это еще далеко не весь список показаний для проведения бак посева на микрофлору. К тому же исследуется не только урина и мокрота, но также кровь, кал, лимфа и другие материалы.

к оглавлению ↑

Цель проведения бактериального посева и расшифровка данных

Бактериологический посев на флору и антибиотикограмма играют важную роль в выявлении болезнетворных бактерий, их разновидности и чувствительности к противомикробным препаратам. Несмотря на то, что эти исследования дополняют друг друга, они имеют разные принципы и способы расшифровки результатов. Для начала давайте разберемся с тем, как проводят бакпосев.

к оглавлению ↑

Суть процедуры

Посев на флору и АЧ – это две тесно взаимосвязанные процедуры, поэтому за первой, как правило, сразу же следует вторая. Исключением являются только те случаи, когда в исследуемом биологическом материале не было обнаружено патогенных микроорганизмов.

Примечание. Патогенная флора – это группы различных бактерий, которые не присутствуют в организме у здоровых людей. Их попадание в него происходит под воздействием внешних факторов, и приводит к развитию инфекционных патологий.

Именно на их обнаружение нацелен бактериальный посев.

к оглавлению ↑

Как проводится исследование?

Бак посев на флору подразумевает культуральный посев образца биологического материала на питательную среду. При этом учитывается приблизительная группа микроорганизмов, которая, по мнению врача, привела к развитию заболевания у пациента.

Например, если речь идет о герпесвирусной инфекции, соскоб с везикулярной сыпью вживляется в куриный эмбрион. Если на протяжении нескольких суток положительная динамика роста вируса не наблюдается, результат считается отрицательным.

То же самое касается и других патогенных микроорганизмов и грибов. Для каждой группы используется особая среда, которая будет способствовать росту бактерий.

Следующим этапом анализа мочи (или другой биологической жидкости) на микрофлору является помещение питательной среды с проросшей культурой в специальный аппарат – термостат. Там емкость находится на протяжении определенного периода времени.

После окончания положенного отрезка времени емкость извлекается из термостата, затем лаборантом проводится визуальная оценка цвета, количества и плотности прорастания бактериальных колоний. При расшифровке и записи полученных данных используется такое понятие, как колониеобразующая единица, или КОЕ (1 бактериальная клетка). Именно по этому критерию исчисляется количество микроорганизмов в образце биологического материала пациента.

к оглавлению ↑

Как прочитать полученные данные?

Расшифровка посева на флору и АЧ играет первостепенную роль в диагностике различных заболеваний. Различают 4 степени бактериальной обсемененности в образце биологического материала.

  1. При первой степени рост микрофлоры очень медленный, практически незаметный. Ее произрастание происходит исключительно в условиях жидкой среды.
  2. Вторая степень характеризуется рост микроорганизмов, относящихся только к одному определенному виду. При этом их число не превышает 10 колоний, и растут они только в довольно плотной среде.
  3. При третьей степени патогенная микрофлора произрастает в плотной твердой среде, но их число не превышает 100 колоний.
  4. При четвертой степени число колоний превышает 100 бактериальных клеток, произрастающих на твердой питательной среде.

Как понять эти данные? Первая и вторая степени свидетельствуют о том, что микрофлора несколько загрязнена, но это не является критическим показателем. Третья и четвертая степени указывают на наличие явного воспалительного или инфекционного процесса, протекающего в организме человека. При этом патологию вызвали именно те микроорганизмы, которые проросли в искусственно созданной лаборантами среде.

к оглавлению ↑

Мазок из зева – как прочитать результат?

Расшифровка мазка из зева на микрофлору несколько отличается от той, которая рассчитана под другой биологический материал (сперму, влагалищные выделения, мочу и др.). Чтобы понять данные, записанные на специальном медицинском бланке, необходимо знать, какие показатели считаются самыми оптимальными.

Если лаборант указал на листе, что количество тех или иных бактерий не превышает 10 в 4 степени, это означает, что переживать не о чем. Это допустимая норма для любого пациента.

При превышении количества колоний показателей 10 в 5 степени, то это считается тревожным звонком, извещающим об активном росте условно патогенной микрофлоре в ротовой или носовой полости (в зависимости от того, для подтверждения какого диагноза был взят мазок из зева). Крайне редко лаборант может указать количество микроорганизмов 10 в 1 степени. Это говорит о том, что уровень бактерий слишком мал, чтобы вызвать ту или иную ЛОР патологию.

к оглавлению ↑

Как расшифровать данные антибиотикограммы?

Немаловажную роль играет также посев на чувствительность к антибиотикам. Он помогает установить, к каким именно группам противомикробных лекарств более всего чувствителен проросший вид бактерий.

Суть процедуры проста. После определения с помощью бакпосева типа бактерий, вызвавших возникновение у пациента недомогание, с этими микроорганизмами проводится тест на их чувствительность к антибиотикам. Для этого используются те препараты, которые, по мнению врача, целесообразно применять в данном конкретном случае.

Расшифровка данных о чувствительности к антибиотикам может проводиться несколькими способами. Каждый из них довольно информативен, поэтому разобраться с обоими сможет даже человек без медицинского образования.

к оглавлению ↑

Способ первый – плюсы

Лаборант выдает бланк, где указан тип возбудителя инфекции, а также список препаратов, которые к нему чувствительны. Возле каждого названия лаборант ставит плюсы – от 1 до 3. Далее расшифровка анализа на чувствительность к антибиотикам проводится по такой схеме (цифра в списке означает количество плюсов).

  1. Резистентность микроорганизмов к данному препарату высока, поэтому применять его нецелесообразно.
  2. Микроорганизмы не слишком чувствительны к медикаментозному средству, поэтому его использование также не приведет к быстрому выздоровлению.
  3. Бактерии высокочувствительны к лекарству, что означает высокую вероятность его эффективности при лечении недуга у больного.

Иногда вместо плюсов могут ставиться «птички» (галочки), расшифровка числа которых соответствует количеству плюсиков, указанных в вышеприведенном списке.

к оглавлению ↑

Система обозначения S, R, I

В некоторых бланках вместо галочек и плюсов можно встретить условные буквенные обозначения S, R, I. Многие пациенты ломают голову над тем, что бы это могла означать. На самом деле все довольно просто, к тому же практически во всех медицинских документах, где записываются полученные данные, сбоку дано объяснение, как их трактовать.

Так какой же является расшифровка антибиотикограммы S, R, I?

S – микроорганизмы чувствительны к тому или иному препарату.

R – лечение выбранным лекарством не даст результата по причины высокой резистентности микробов к нему.

I – бактерии умеренно чувствительны, поэтому лучше поискать более эффективное лекарство.

Как видно, «все гениальное – просто». Бак посев мочи и других образцов биологических материалов на чувствительность к антибиотикам помогает не только назначить правильное лечение, но и сохранить драгоценное время, предотвратив тем самым возникновение осложнений имеющегося у пациента заболевания.

Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам

Нередко в медицинской практике пациентам назначается посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам. При этом пациенты сами испытывают трудности с тем, чтобы подготовиться к сдаче анализа, и не всем понятно, для какой цели он служит. Подробнее об этом виде лабораторного исследования мы расскажем далее в статье.

Что такое посев на микрофлору?

Посев на микрофлору, он же бак посев, он же посев на антибиотики – это лабораторное исследование, при помощи которого можно определить тип возбудителя инфекции, его концентрацию в организме, а также устойчивость к лекарственным веществам. Эти сведения позволяют врачам точно диагностировать заболевание и максимально эффективно спланировать стратегию лечения.

Бактериологический посев может проводиться при использовании различного вида субстрата. В зависимости от предполагаемого заболевания или органа поражения, в качестве материала для исследования может использоваться практически любая биологическая жидкость: кровь, эякулят, выделения различных слизистых, спинномозговая и суставная жидкости, содержимое патологических образований (гнойников, кист), моча, как и т.д.

Бакпосев заключается в высевании бактерий из образца (диагностического материала) в питательную среду с последующим наблюдением за количественными изменениями бактериальных колоний. Счисление результатов определяют в КОЕ – колониеобразующих единицах, т.е. количестве жизнеспособных бактериальных клеток, способных к образованию новых колоний.

Где используют метод посева на микрофлору?

В соответствии с различным материалом для исследования, в результатах могут быть обнаружены различные типы возбудителей. Например, посев кала может показать такие группы бактерий, как сальмонеллы, шигеллы, тифопаратифозные бактерии, анаэробные бактерии. Часто посев кала на дисбактериоз с определением чувствительности к антибиотикам проводится пациентам, которые испытывают кишечные расстройства после длительного приема пероральных антибиотиков. Расшифровка этого анализа позволяет разграничить инфекционные кишечные расстройства от дисбактериоза.

В венерологической, гинекологической, урологической практиках используют анализ урогенитальной слизи на бактериальный посев. В этом виде анализируемого материала можно обнаружить, помимо бактерий, грибки. Среди бактериальных групп наиболее вероятны к обнаружению гоококки, листерии, уреаплазмы, и при подозрении на конкретную половую инфекцию врач может назначить посев на микоплазму или иную бактериологическую культуру.

Часто в общетерапевтической и пульмонологической практиках производится посев мокроты на микрофлору и чувствительность к антибиотикам. Этот анализ позволяет установить истинную причину бронхитов, и разделять инфекционные формы от аллергических и иных. В качестве анализируемого материала используется отделяемая при отхаркивании мокрота.

Такие жидкости организма, как грудное молоко, кровь, моча, желчь, суставная жидкость по своей природе являются стерильными, поэтому для них проводится посев на обсемененность, т.е. на выявление любых форм бактерий, т.к. они в любом случае будут являться патологичными.

Отдельно следует упомянуть посев эякулята, или, иначе говоря, спермы на флору. Посев спермы используется в урологической практике и позволяет эффективно выявлять половые инфекции. Может использоваться как посев на обсемененность эякулята на флору, так и анализ на наличие конкретного возбудителя – например, посев на хламидии с определением бактериологической чувствительности к антибиотикам.

Как происходит процесс диагностики?

После забора диагностического материала на флору и чувствительность к антибиотикам, его «сеют» в различные питательные среды. Выбор среды определяется возможностями конкретной диагностической лаборатории, а также целями диагностики. К примеру, для определения наличия конкретного возбудителя используется наиболее подходящая для него среда, а для разграничения различных возбудителей – дифференциально-диагностические среды. Для идентификации различных бактериальных колоний используется твердая питательная среда.

После произведения посева флоры на чувствительность к антибиотикам, субстрат помещают в термостат, который функционирует с заданными значениями температуры, влажности и времени. После этого полученные колонии антибиотиков извлекают, окрашивают, производят контрольный подсчет и осмотр. При необходимости количественного подсчета бактерий, субстрат несколько раз подряд разбавляют, после чего дается оценка определяемой культуре (или культурам) бактерий в целом.

Нередко пациенты задаются вопросом, почему выполнение посева на флору с определением чувствительности к расширенному спектру антибиотиков занимает у лаборатории длительное время (до 10 дней, например, при определении крови на стерильность). Это связано со спецификой роста бактерий: сам процесс их созревания в термостате не может быть ускорен без риска гибели колонии. Кроме того, если требуется провести количественный анализ нескольких видов бактерий, это занимает много времени в связи с количественной обработкой результатов.

Как правильно собрать материал для анализа?

Требования к пациентам, сдающим материал для анализа, столь же высоки, как и к лаборантам в медицинском учреждении. Посев на выявление бактерий требует большой тщательности по отношению к исследуемому материалу, т.к. в случае несоблюдения стерильности произойдет обсеменение бактериями, которые не имеют клинического значения, и результат анализа будет испорчен. Поэтому, первое требование – это использование специализированной стерильной посуды.

Второе – это то, что диагностируемый материал, если он по каким-то причинам собирается вне лаборатории, необходимо доставить туда как можно скорее. Чем более свежей будет исследуемая среда, тем выше будет шанс получить клинически верный результат исследования. Такое правило предусматривает приоритетность забора материала непосредственно в условиях лаборатории, или в непосредственной близости от нее.

Третье – это то, что персонал, собирающий материал для анализа, должен обладать определенными навыками. Это касается двух предшествующих пунктов: сохранение стерильности собранного материала и скорость его отправки на исследовании. Кроме того, сам посев и подсчет КОЕ может производиться только высококвалифицированным персоналом.

Требования к сбору диагностического материала

Сбор мочи для анализа следует производить утром, после гигиенических процедур половых органов, в стерильную посуду. Сбору подлежит первая утренняя порция мочи, объем которой должен составить от 10 до 15 мл. Сдавать материал нужно не позже, чем через 2 часа после его получения.

Забор кала производят в утренние часы, без применения клизм и слабительных, стерильной лопаткой в стерильную посуду. Объем собранного материала должен составлять 15-30 г. Сдавать кал можно в течение 5 часов после сбора, при этом не допускается его охлаждение или замораживание, т.к. это может привести к гибели бактерий.

В случае назначения анализа на мазок из носа и зева не допускается промывание этих слизистых антибактериальными растворами, питье, прием пищи, нельзя чистить зубы до забора анализа. Диагностируемый материал сразу после забора в условиях лаборатории отправляется на исследование. Напротив, если пациенту показан анализ мокроты, то ему необходимо чистить зубы и регулярно ополаскивать рот антибактериальным раствором до сдачи материала.

При проверке крови на стерильность не допускается предварительный прием антибиотиков. Материал собирается в условиях лаборатории, с соблюдением правил стерильности. Грудное молоко же можно собрать в домашних условиях или в палате. Для этого сначала проводятся водные гигиенические процедуры, затем кожа вокруг соска обрабатывается дезинфицирующим раствором, и молоко сцеживается в стерильный контейнер. Доставить его в лабораторию необходимо за 2 часа.

Мазок половых органов для женщин проводится в середине менструального цикла (не раньше 14 дней после завершения менструаций). При этом до пробы женщинам нельзя мочиться 2 часа, мужчинам – 5-6 часов. Забор пробы производится врачом. Аналогично, сбор эякулята должен проводиться в стерильных условиях.

Результаты посева на флору

При выявлении какой-либо конкретной бактериальной культуры нормальной реакцией будет являться результат, который может быть обозначен словами «нет роста» или «результаты пробы отрицательны». Если же определялась микрофлора какой-либо субстанции в целом, то хорошим знаком является обозначение «норма». Чувствительность к антибиотикам обозначается перечислением тестируемых препаратов и словами «да» и «нет», обозначающими наличие или отсутствие эффективности к конкретному препарату.

При выражении значений бактерий в КОЕ, следует различать показатели патогенной и условно-патогенной флоры. Последняя может довольно широко варьировать в своих показателях, не нанося человеческому организму никакого вреда. При нормальных показателях рядом с количественным значением указывается слово «норма». В случае же с патогенной флорой, «норма» теряет свое значение, т.к. патогенные организмы в принципе не должны обнаруживаться в здоровом организме, и значение КОЕ тут становится не важно.

Так или иначе, доверить расшифровку полученных результатов лучше своему лечащему врачу, так как ему в точности известно, какую цель преследовала диагностика и как в дальнейшем распорядиться этими результатами. В целом следует отметить, что посев на флору является одним из самых точных, хоть и трудоемких, лабораторных исследований, которое позволяет диагностировать и прогнозировать болезнь, а также разрабатывать эффективную тактику ее лечения.

Расшифровка посева на флору с определением чувствительности к антибиотикам

--> Информативность основывается на том, что разные клетки и бактерии окрашиваются в различные цвета. Эта особенность позволяет провести качественный и количественный анализ состава флоры и выявить патологические отклонения.

При помощи мазка определяют:

  • содержание в выделениях эритроцитов и лейкоцитов;
  • качественный состав микрофлоры и степень чистоты влагалища;
  • возбудителей заболеваний, передающихся половым путём (гонорея, трихомонада, уреаплазма);

Бак посев на флору и чувствительность к антибактериальным средствам осуществляют при подозрении на воспалительный процесс в органах малого таза и нарушениях чистоты влагалища 3-4 степени.

Посев является культуральным методом и отличается от мазка тем, что материал помещается в благоприятную для потенциальных возбудителей среду, с последующим проведением исследования на их реакцию к применяемым противомикробным средствам.

Значительным минусом исследования является его длительность. В зависимости от возбудителя, посев на микрофлору с определением чувствительности к антибиотикам может проводится от 3-5 дней до нескольких недель.

С этим связна высокая частота эмпирического назначения антибактериальных препаратов, основанного на выборе средств с максимально широким спектром действия, затрагивающего всех предполагаемых возбудителей.

Для быстрой диагностики специфических возбудителей (заболевания, передающиеся половым путём) используют полимеразную цепную реакцию (ПЦР) или иммуноферментный анализ (ИФА).

Подготовка к анализам

Для максимальной информативности, рекомендовано за двое суток до забора материала отказаться от:

  • половых контактов и использования вагинальных методов контрацепции;
  • спринцеваний, введения влагалищных кремов и суппозиториев.

Мазок желательно проводить минимум через две недели после отмены антибактериальных препаратов в связи с высоким риском ложноотрицательных результатов на фоне противомикробной терапии.

Также рекомендуют отложить забор материала на 2-3 дня, если накануне проводилась кольпоскопия.

Период менструаций и два дня после их окончания считаются противопоказаниями к данному исследованию.

Особенности взятия клинического материала

Микробиологический анализ проводят с целью подтверждения или исключения воспалительных поражений инфекционной природы, определения состава микрофлоры с выявлением транзиторных (условно-патогенных) представителей, их количественного соотношения со здоровыми бактериями.

В нормальных условиях слизистая оболочка матки и труб стерильна за счет содержания в секрете цервикального канала лизоцима, имеющего противомикробное действие.

Состав нормальной микробиоты половых органов у женщин относительно стабилен. Незначительные изменения и различия, не считающиеся патологией, могут обуславливаться:

  • возрастными особенностями;
  • беременностью;
  • гормональными изменениями.

Влагалищные мазки

Образцы для микроскопии собирают со слизистой заднего свода или с воспалительно-изменённых участков. После того, как было введено зеркало, выделения набирают на стерильный тампон из ваты. Для дальнейшего изучения окрашенного мазка отделяемое переносят на стёклышко путём перекатывания тампона по стеклу. Далее мазок сушат и производят фиксацию этанолом.

При необходимости проведения культурального исследования (посев на антибиотики из влагалища с определением восприимчивости патогенных микроорганизмам к различным препаратам) тампон необходимо сразу поместить в стерильную ёмкость и отправить в лабораторию.

Читайте далее: Препараты для лечения зуда в интимном месте после антибиотиков

Уретра

Забор образцов проводится бак. петлёй, после очищения наружного отверстия уретры стерильной марлей. Петлю вводят в уретру, не глубже двух сантиметров. Далее, для микроскопии и ИФА, образец распределяют по предметному стёклышку. При выполнении культурального анализа и полимеразной цепной реакции, материал помещают в ёмкость, содержащую специальную среду и доставляют в лабораторию.

Шейка матки

Забор проводится после открытия шейки матки в зеркалах и аккуратной обработки её влагалищной части физ. раствором. Тампон необходимо ввести в цервикальный канал, стараясь не касаться влагалищных стенок.

Если необходимо выполнить бак посев из цервикального канала на чувствительность к антибиотикам, тампон помещается в специальную среду для дальнейшей транспортировки и отправляется в лабораторию.

При заборе материала для микроскопии, ИФА, ПЦР и вирусологического исследования используют специальную тампонощёточку с целью получения клеточного соскоба. Забор необходимо проводить крайне аккуратно, чтобы не травмировать слизистую и не допустить попадания крови на тампон.

Вопреки расхожему мнению, процедура не противопоказана беременным женщинам и не может стать причиной выкидыша или нанести вред будущему ребёнку.

Матка

Через цервикальный канал в матку вводят специальный зонд, с дальнейшей аспирацией патологического содержимого. Необходимо строжайшее соблюдение правил асептики. Процедура не проводится при наличии воспалительных заболеваний шейки и влагалища, из-за риска заноса инфекции в полость матки.

Также, противопоказана в период беременности.

Придатки

Проведения забора материала осуществляется во время пунктирования опухолевидных образований или оперативного вмешательства. Как правило, для посева используют гной и экссудат.

Наружные половые органы

Образец берётся из воспалительно-изменённых участков. В случае поражения бартолиновых желез (больших желез преддверья) выполняют пункцию, с последующим взятием гноя на посев.

Показатели здоровой микрофлоры

Состав флоры напрямую зависит от:

  • возраста пациентки;
  • гормонального фона;
  • наличия инфекционно-воспалительных заболеваний;
  • фоновых патологий;
  • приёма лекарств, нарушающих здоровый баланс микроорганизмов и бактерий (антибактериальные препараты, длительное употребление противогрибковых и нестероидных противовоспалительных средств, цитостатиков, гормонов).

Влагалищный микробиоценоз у ребёнка начинает формироваться после рождения за счет полученных в родах от матери лактобактерий (анаэробных лактобацилл-палочек Дедерлейна). Такой состав сохраняется до нескольких недель, поддерживая кислую реакцию. Далее, рН становится нейтральным и остаётся таким до полового созревания. На этом этапе, в состав флоры включаются условно патогенные бактерии (коринебактерии, стрепто-, стафилои энтерококки, анаэробы).

После наступления полового созревания и усиления влияния эстрогенов повышается количество гликогена (субстрата для размножения лактобактерий). В следствие дальнейшего преобладания лактобацилл и продуцирования ими кислот из расщеплённых углеводов, происходит понижение рН до 4.0-4.5.

Поддержание лактобациллами рН влагалищных выделений на этом уровне, обеспечивает здоровый баланс флоры, подавление активности условно патогенных палочек и поддерживает естественную резистентность.

Степени чистоты

Содержание бактерий в влагалищном секрете у здоровой женщины составляет приблизительно от 6 до 8 * 104 КОЕ/мл.

Разделение на степени чистоты основано на качественных показателях микрофлоры и количественном соотношении здоровых и условно патогенных бактерий.

Степени Характеристика
Первая Микроскопически, влагалищный секрет имеет вид вареного крахмала. Отличается кислой реакцией среды, за счёт высокого содержания молочнокислых бактерий (палочек Дедерлейна). Характерно малое содержание эпителия и слизи. Лейкоциты отсутствуют. Этот тип встречается очень редко и свидетельствует об идеальном состоянии иммунитета.

рН в пределах от 4.0 до 4.5.

Вторая Характеризуется слабокислой реакцией, сниженным содержанием лактобактерий. Увеличено содержание других микроорганизмов (стрепто-, стафило-, энтерококков, присутствуют дрожжевые грибки). Количество слизи и эпителия умеренное. Возможно появление единичных лейкоцитов. Выделения жидкие, имеют белесоватый оттенок. рН находится от 5.0 до 5.5.

Такие показатели свидетельствуют о незначительных отклонениях в составе флоры и считаются нормальными. Встречается у большинства женщин.

Третья Реакция среды будет нейтральной или слабощелочной. Палочки Дедерлейна практически отсутствуют, кокковая и дрожжевая флора превалирует.Выявляется значительное содержание эпителия, лейкоцитов (не более 40 на поле зрения) и слизи. Влагалищный секрет приобретает желтоватый цвет. Значения рН от 6.0 до 7.2.

Такая картина свидетельствует о наличии воспалительного процесса, требующего обязательного лечения.

Четвёртая Резко щелочная реакция среды. Полностью отсутствуют полезные лактобактерии. Значительное количество патогенных микроорганизмов, слизи, эпителия и лейкоцитов. Возможно обнаружение трихомонад, уреаплазмы, гонококков и т.д. Выделения приобретают резкий, неприятный запах, пенистые или гнойные, вязкие. рН более 7.3

Такие результаты говорят об остром воспалительном процессе, требующем немедленного лечения антибактериальными средствами.

Преобладание дрожжевой флоры характерно для молочницы.

Такое состояние может свидетельствовать о нарушении влагалищного микробиоценоза после длительного курса антибиотиков, цитостатиков, НПВС или гормонов.

Читайте далее: Молочница после антибиотиков: как лечить и чем лечить

По характеру микроорганизмов в мазке может определятся флора:

  • смешанная (характерно для периода полового созревания, начала и конца менструаций, климакса, синдрома гиперфункции яичников, некоторых венерических заболеваний). Для уточнения диагноза необходимо провести подсчёт лейкоцитов в поле зрения и сделать ИФА или ПЦР;
  • палочковая (гарднелёз или дисбактериоз влагалища);
  • лактобациллярная (полностью здоровые показатели);
  • коккобациллярная (вен. заболевания, бактериальный вагиноз).

Бак посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам: расшифровка, нормы.

Наиболее простым в проведении и распространённым в клинической практике, является метод диффузии стандартных бумажных дисков, смоченных антибактериальными препаратами, в чашку Петри, заполненную питательной средой. Диски выкладывают по поверхности агара, соблюдая расстояние два сантиметра от края чашки и друг от друга.

После того, как чаша постоит при комнатной температуре, её перемещают в термостат.

Время выдерживания в термостате для каждых представителей флоры разное. Стандартный срок инкубации составляет от трёх до пяти дней.

Далее, оценивается подавление роста тестируемых бактерий:

  • отсутствие задержки роста, указывает на полную устойчивость микроба к применяемому средству;
  • кольцо, вокруг бумажного диска, диаметром до 1.5 см, свидетельствует в пользу слабой реакции. Данный препарат, также не будет эффективен в лечении;
  • зона от 1.5 до 2.5 см, говорит о стандартной чувствительности и умеренной клинической эффективности;
  • сверхчувствительность к препарату, характеризуется зоной более 2.5 см.

Пример

Пациентке установлен диагноз: хламидийный цервицит. Для эмпирической терапии, в данном случае, рекомендованы Азитромицин или Доксициклин. Выбор остановлен на первом препарате. Начато лечение. Клинически состояние больной улучшилось. В результатах посева:

Расшифровка посева на микрофлору и чувствительность к антибиотикам:

Данные результаты показывают, что лечение было подобрано правильно.

  • возбудитель имеет высокую чувствительность в отношении Азитромицина, также для лечения можно было использовать Эритромицин и Джозамицин;
  • умеренная чувствительность к Докициклину допустимо использовать;
  • устойчивость к Левофлоксацину, Офлоксацину, Моксифлоксацину, Амоксициллина/клавуланату;
  • абсолютная резистентность к Цефтриаксону.

Проведение Е-теста

Определение восприимчивости к противомикробным средствам проходит аналогично дискодиффузионному методу, однако, вместо смоченных антибактериальными средствами дисков, в агар помещается полоска Е-теста. На ней размечены различные уровни концентрации антибиотика, начиная от максимальной и заканчивая минимальной.

Показатель минимальной концентрации подавления определяют в месте перекреста полоски теста и зоны подавления роста.

Этот метод является простым, но достаточно дорогостоящим, в связи с этим, диффузия дисков применяется чаще.

Автор материала: Врач-инфекционист Черненко А. Л.

Читайте далее: Эксклюзив об антибиотиках при цистите у женщин и мужчин со списками и сравнением


Смотрите также