Пцр на сифилис


Анализ ПЦР на сифилис

Диагностика сифилиса методом ПЦР получило широкое распространение в практической медицине, в частности в дерматовенерологии.

Как проводится исследование?

ПЦР на сифилис основывается на выявлении генетического материала ДНК возбудителя данной половой инфекции – специфической бактерии бледной трепонемы (Treponema pallidum) в исследуемом материале. Реакция представляет собой множественное копирование нуклеотидных оснований (амплификация) с их накоплением и последующей идентификацией. Для проведения анализа используется различный биологический материал, выбор которого зависит от стадии течения сифилиса.

Показания к проведению ПЦР

ПЦР диагностика сифилиса проводится не всегда, а по определенным медицинским показаниям.

  • Диагностика серонегативного сифилиса, который характеризуется развитием инфекционного воспалительного процесса в органах половой системы без образования антител в крови. По этой причине другие исследования (РМП, реакция Вассермана) могут быть ложноотрицательными.
  • Выявление нейросифилиса – патологический процесс, который характеризуется попаданием возбудителя в структуры центральной нервной системы с их поражением.
  • Диагностика врожденного сифилиса, при котором бледная трепонема проникает в организм развивающегося плода от зараженной беременной женщины.
  • Выявление сифилиса при других патологических состояниях, сопровождающихся снижением функциональной активности иммунитета (вторичный иммунодефицит при развитии СПИДа) – в основном используется исследование ПЦР ВИЧ, сифилис.

Определяет целесообразность данного метода лечащий врач на основании результатов клинического обследования, а  также лабораторных и инструментальных методов диагностики.

Диагностика первичного сифилиса

Первичный сифилис методом ПЦР диагностируется при помощи исследования биологического материала, взятого со слизистых оболочек в области возможного проникновения возбудителя. Для этого у женщин берется мазок со слизистой оболочки уретры (мочеиспускательный канал), влагалища и шейки матки. У мужчин материалом для исследования служит мазок из уретры.

После незащищенного орального секса также может исследоваться мазок со слизистой оболочки рта, а после анального секса – со слизистой оболочки прямой кишки. В сомнительных случаях дополнительно может исследоваться моча у мужчин и женщин, а также сперма и простатический сок у мужчин.

Диагностика других форм сифилиса

Поздние стадии развития инфекционного процесса характеризуются проникновением бледной трепонемы в кровь и ее распространением в организме с поражением структур нервной системы, внутренних органов.

В этом случае проводится ПЦР крови. Сифилис выявляется таким способом не всегда, поэтому исследование проводится совместно с другими методиками лабораторной диагностики.

Эффективность метода ПЦР на сифилис

ПЦР является высокочувствительным и специфическим методом исследования, при котором для выявления и идентификации бледной трепонемы достаточно наличие единичных клеток бактерий в исследуемом материале.

Эффективность такой диагностики сифилиса достигает 98%. В сомнительных случаях врач обязательно назначает дополнительные методики диагностики, включающие серологические, бактериологические исследования, а также микроскопию.

Выявить заболевание даже на ранней стадии можно в нашей клинике.

Анализ ПЦР на сифилис

Сифилис – венерологическое заболевание, вызываемое бледной трепонемой.

Оно передается как половым путем, через любой вид сексуального контакта, так и бытовым (что происходит реже).

Сифилис может передаться бытовым путем через губную помаду, мокрое полотенце, постельное белье и так далее.

У врачей-венерологов, сифилис, из-за контакта с пациентами, может развиться на руках.

Сифилис делится на три стадии, разделенные длительными промежутками:

  1. I.Первичный сифилис. Появление твердого шанкра в местах локализации бледной трепонемы.
  2. II.Вторичный сифилис. Инфекция распространяется по всему человеческому организму вместе с лимфатической жидкостью. Увеличиваются лимфоузлы, появляются папулы и пустулы на коже, а также участки депигментации, повышается температура.

  1. III.Третичный сифилис – последняя стадия. Появляются новообразования, оставляющие после себя рубцы. Выявляются тяжелые органные поражения, в том числе, нервной системы.

Анализ на сифилис: тест крови, РПГА, микрореакция, как называется

Среди заболеваний, передающихся половым путем, сифилис по праву считается одним из самых заразных. При незащищенном сексуальном контакте с больным партнером, шанс заразиться составляет 100%. Именно поэтому врачи рекомендуют регулярно сдавать анализ на сифилис. Заболевание распространяется не только половым путем, но и при использовании зубной щетки, кухонной посуды, полотенца и других бытовых предметов вместе с больным человеком. Иногда болезнь может протекать бессимптомно (пассивный вид), при этом остается риск заражения окружающих. Сдать анализ на сифилис можно в районной поликлинике и частном врачебном кабинете анонимно. Как называется анализ и где его можно сдать.

Материал для исследования

Наиболее часто для анализа на сифилис используется кровь пациента. Иногда в крови содержатся антитела, вызывающие ложноположительную реакцию.

В таких случаях возможный диагноз может быть подтвержден исследованиями другого биологического материала:

  • Распространяются по организму и затрагивают спинной мозг. Специальный анализ крови на сифилис Реакция по Вассерману, может подтвердить наличие болезни.
  • Жидкость, взятая из язвы (твердого шанкра). Исследование вещества имеет высокую достоверность и может быть назначено по клиническим показаниям.
  • Лимфоузлы в паховой области при развитии болезни воспаляются и увеличиваются. Обследование воспаленных участков может помочь диагностике.
  • Венозная или артериальная кровь. Кровь на сифилис должна сдаваться натощак из вены или пальца в зависимости от типа анализа.

Чтобы узнать, где сдать все анализы на сифилис, нужно обратиться к врачу при первых признаках заболевания. Лабораторные исследования проводятся во многих частных и государственных лабораториях. Сдачу крови на сифилис можно провести в медицинском учреждении или вызвать лаборанта на дом. Должный вид теста определяет врач. Лаборатория проведет тест на сифилис и исследование покажет наличие и отсутствие болезни.

Прямые тесты

Какие анализы сдают на сифилис, этот вопрос часто можно услышать от пациентов. Сегодня существует несколько видов тестов, которые могут показать наличие инфекции в крови. Анализ крови на сифилис, известный как темнопольная микроскопия, является современным методом диагностики с достаточно высокой достоверностью результатов. Исследуемый материал изучается при большом увеличении и специальном подсвечивании образца.

Исследование выявляет наличие бледных трепонем (возбудителя сифилиса) на более темном фоне.

При простом исследовании образца под микроскопом достоверность метода составляет 97% и позволяет обнаружить болезнь у 8 из 10 зараженных. Если анализ крови при сифилисе показывает отрицательный результат, но у пациента имеются ярко выраженные клинические симптомы сифилиса, назначается дополнительное исследование.

Самые точные исследования называются ПЦР анализы на сифилис или полимеразная цепная реакция. Для проведения исследования требуется современное медицинское оборудование и квалифицированные специалисты. Где же можно сдать анализы на сифилис по данному методу? К сожалению, анализ ПЦР могут предложить только частные лаборатории. Ввиду сложности проведения и высокой стоимости анализа, немногие лаборатории предлагают исследование с помощью полимеразной цепной реакции.

В предоставленном образце крови определяется наличие или отсутствие молекул ДНК возбудителя болезни. Достоверность ПЦР на сифилис приближена к 100% и является основой для подтверждения или опровержения диагноза лечащим врачом. Современное молекулярное исследование позволяет обнаружить в исследуемом образце наличие всего двух молекул заболевания. Получить самый точный результат ПЦРа на сифилис можно только при соблюдении всех правил и норм лабораторных исследований. Тест на сифилис может быть готов уже через 5 часов после забора крови. Стоит отметить, что общий анализ крови не выявляет данную инфекцию.

Нетрепонемные исследования

Серологическая диагностика сифилиса предусматривает анализ крови на наличие антител. Существует несколько видов исследований, кровь на которые можно сдать в лаборатории. При проведении медицинских осмотров и обследовании большого количества пациентов назначаются, как правило, один из нетрепонемных (неспецифических) анализов. Если в крови обнаруживаются антитела к сифилису, результат анализа считается положительным. Какие анализы на сифилис следует сдавать пациенту, зависит от клинической картины. На сифилис анализ должен быть назначен квалифицированным врачом.

Реакция Вассермана широко распространенный тест, который может показать заражение на 6 неделе болезни. Другое название исследования «РВ-тест» или «RW». Для проведения анализа необходимо сдать кровь из вены или пальца натощак. Обычно лаборатории проводят забор крови сутра и рекомендуют пациентам воздерживаться ночь (8-12 часов) от еды и напитков, кроме минеральной воды. Реакция Вассермана определяет заражение по количеству титров антител. Отрицательный результат помечается математическим знаком «минус» (–).

Слабоположительный результат маркируется одним или двумя плюсами (+, ++), положительный тремя плюсами (+++) и четыре плюса (++++) означают резко положительную реакцию.

Также к нетрепонемным методам исследований относится RPR тест. Это исследование считается более современным и точным по отношению к RW анализу. RPR проводится на венозной крови пациента и выявляет наличие антител к фосфолипидам цитоплазматической мембраны. РПР тест можно сделать в частной клинике.

Похожим способом является реакция микропреципитаци, которую используют в современных лабораториях.

Микрореакция преципитации (МРП или МР-тест) проводится спустя 4-5 недель после предполагаемого заражения. Для исследования используется капиллярная кровь. Микрореакция на сифилис не относится к точным методам диагностики. Положительная серологическая реакция на сифилис по МРА должна быть подтверждена одним из специфических тестов. Отрицательный результат теста означает начальную стадию или отсутствие заболевания.

Трепонемные исследования

Почему нужно сдавать анализ на сифилис повторно? Часто трепонемные исследования используются в качестве контрольного анализа, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз после нетрепонемного теста. Сомнительный результат первого теста означает, что придется сдать анализы на сифилис повторно.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА, РНГА). Анализ на сифилис РПГА является быстрым методом исследования, результат можно узнать уже через час. Чтобы проверить кровь на наличие сифилиса по РПГА-тесту, анализ проводится спустя месяц после контакта с больным. Гемагглютинация может давать ложноположительный результат при мононуклеозе и ряде других заболеваний.

Для диагностики болезни на ранних стадиях применяется Реакция иммунофлюоресценции (РИФ-тест). Анализ крови из пальца или вены с помощью РИФ может выявить заболевание спустя 1,5-2 месяца после контакта с больным.

Во время проведения РИФ-теста антитела четко выделяются свечением в ультрафиолетовом свете.

При беременности или наличии системных заболеваний соединительной ткани (ревматоидный артрит и пр.) РИФ-тест может оказаться ложноположительным. Поэтому очень важно предоставить врачу достоверную информацию о себе и медицинскую карту. Положительная реакция обозначается знаками «+» от одного до четырех.

Реакция иммобилизации бледной трепонемы, также известная как РИБТ-тест пользуется высокой популярностью. Серодиагностика по методу РИБТ достоверна в 99% случаев. Однако анализы крови могут быть назначены только спустя 12 недель после контакта с носителем болезни.

РИБТ-исследование проводится спустя 3,5-4 месяца после возможного заражения. Заболевание определяется с вероятностью 99%.

Иммуноблотинг способен дать 100% результат и реагирует даже на очень маленькое содержание антител в крови пациента.

Иммуноферментный анализ или ИФА способен выявить болезнь уже спустя 3 недели после возможного заражения. Достоверность положительного результата составляет 98%. Этот анализ называют одним из самых точных. Как же очистить кровь от сифилиса? Как лечат сифилис какие нужны повторные обследования скажет квалифицированный врач. Не занимайтесь самолечением!

Экспресс-тест

Может называться и выглядеть по-разному в зависимости от производителя, например, «Сифилис-АгКЛ-РМП» или «Профитест». Тест для самодиагностики не предоставит развернутый анализ, но поможет определить наличие или отсутствие болезни с вероятностью более 98% (при условии, что тест проведен правильно).

Набор РМП на сифилис состоит из пластиковой формы с тестовой полоской, острого инструмента для прокалывания кожи на пальце, одноразовой пластиковой пипетки, бутылочки с раствором для разведения крови и подробной инструкции на русском языке. Перед проведением анализа нужно придерживаться тех же правил, что и в медучреждении, очищать руки и поверхность стола перед работой.

При помощи острого приспособления из набора прокалывают палец, одноразовой пипеткой набирают 1 каплю крови и помещают на обозначенное место тест-полоски. Затем добавляют 2 капли раствора и оставляют тест-полоску на 10 минут. Спустя указанное время, будет готов результат. Какие могут быть варианты? Результата всего два: одна полоса означает отсутствие заболевание, две полосы свидетельствуют о положительной реакции и являются поводом обратиться к врачу.

Подтвердить или опровергнуть результаты домашнего теста может серодиагностика.

Стоит отметить, что тест может показать положительный результат и уже после успешного лечения сифилиса. Все дело в том, что организм помнит о перенесенной инфекции еще несколько лет и продолжает вырабатывать антитела к сифилису. Однако количество этих антител постепенно снижается, и при отсутствии повторного заражения перестают вырабатываться в среднем в течение 2-3 лет после успешного лечения. Однако некоторые факторы могут замедлять этот процесс. К ним относится прием алкоголя и наркотических средств. Поэтому задумываясь, как очистить кровь после сифилиса, в первую очередь откажитесь от вредных привычек.

Лечение

Как избавиться от сифилиса и какое лечение нужно пройти? Сразу стоит отметить, что лечение должен назначать только опытный врач. Терапия от сифилиса проводится с помощью антибиотиков в течение долгого времени. Чтобы кровь очистилась от антител нужно не менее 2 лет. Кровь очищается медленно и постепенно. То есть после полученного лечения антитела вырабатываются все меньше и в конце концов перестают определяться в крови. Чтобы контролировать этот процесс пациентам приходится сдавить анализы в течение 3 лет.

Исследование крови на сифилис обязательно для людей многих профессий (врачи, военные, повара и пр.) для получения допуска к работе. В таком случае постоянно, при каждом медосмотре, будет назначена серология или другой тип анализа. При беременности также обязательно проводится исследование на сифилис, анализы назначает врач. Некоторые типы анализов, например РИФ, часто бывает ложноположительным. Какие сегодня самые точные анализы на сифилис, вам подскажет врач.

Прямые методы диагностики сифилиса: микроскопия, РИФ-Тр и ПЦР

Прямые методы диагностики основаны на обнаружении в организме человека конкретных представителей инфекции. Достаточно найти хотя бы кусок микроба — его ДНК. Положительные результаты таких анализов будут самыми достоверными: если возбудитель найден, то болезнь считается доказанной, а диагноз обоснованным. Однако для диагностики сифилиса этот тип исследований используется не так широко, как для диагностики других половых инфекций. Дело в том, что бледную трепонему не так-то легко найти: при заражении она не задерживается в очаге поражения на коже, а быстро проникает внутрь и укрывается в тканях и лимфатических путях. И «ловить» ее уже остается только непрямыми методами, ориентируясь по реакции организма — антителам, которые образуются в крови в ответ на ее появление.

И все же, прямые методы применяются не только на самой ранней стадии, но и при вторичном сифилисе, и даже третичном. Зачем и как — рассказываем дальше.

Прямые методы диагностики – когда их назначают?

В диагностике сифилиса прямое обнаружение возбудителя не является основным. Эти исследования используют только для подтверждения результатов анализов крови. Такое второстепенное положение обусловлено тем, что если выявить микроб не удалось — результат их будет отрицательным, но наличия болезни этот факт не исключит. То есть, положительный результат — это точно сифилис, а отрицательный — совсем не обязательно отсутствие болезни.

Чаще всего прямые методы используются для подтверждения сифилиса в ранний период.

В первичный период исследуют материал, взятый из твердого шанкра — тканевую жидкость со дна сифилитической язвы. В это время прямые методы имеют большое преимущество над непрямыми: они могут подтвердить диагноз уже в первые недели твердого шанкра, когда другие анализы еще «не видят» сифилис в крови.

Во вторичный период исследуют соскоб, взятый из элементов сифилитической сыпи. В этот период прямые тесты назначаются редко, только в сомнительных случаях. В этот период непрямые методы работают гораздо точнее.

Поздний сифилис часто путают с пролеченным сифилисом, после которого многие непрямые тесты остаются положительными. Для подтверждения диагноза иногда прибегают к прямым методам диагностики. С помощью них исследуют пунктат лимфоузлов, в которых еще могут сохраняться бактерии.

Еще прямые методы диагностики используют для постановки диагноза «врожденный сифилис». С этой целью исследуют амниотическую жидкость, ткань пуповины, плаценты и органы плода.

Что относится к прямым методам диагностики, и какой из них самый лучший?

К прямым методам диагностики сифилиса, применяющимся в клинической практике, относятся:

       ТПМ — темнопольная микроскопия        РИФ–Тр — прямая реакция иммунофлюоресценции        ПЦР — полимеразная цепная реакция

Темнопольная микроскопия основана на обнаружении бледных трепонем под световым микроскопом. Бледная трепонема плохо окрашивается лабораторными красителями (отсюда и название — бледная), поэтому ее рассматривают в необработанном, живом состоянии на темном фоне. Направленный луч света преломляется, проходя через бледных трепонем, и подсвечивает их. Лаборант оценивает размер, форму и типы движения бактерий, а также подсчитывает их количество. Недостатки метода:

  • субъективность, зависит от внимательности лаборанта;
  • зависит от качества приготовления материала: бактерии должны быть живыми и в большом количестве;
  • повышенная вероятность ложноположительных результатов: бледную трепонему можно визуально спутать с другими непатогенными микробами.

Достоинство этого метода только одно — дешевизна.

РИФ-Тр основан на специальном окрашивании бледных трепонем с помощью флюорисцирующих антител. Если бледные трепонемы имеются в изучаемом материале, то под микроскопом и специальным освещением они проявятся в виде яркого свечения. Этот метод менее субъективен, чем ТПМ, но дороже. В России он почти не применяется.

ПЦР основан на обнаружении ДНК бледной трепонемы в исследуемом материале. Он намного точнее, чем ТПМ и РИФ. Приготовление материала не вызывает трудностей: если в материале есть бледные трепонемы, то не важно, единственная это бактерия или их множество, живые они или нет — ПЦР должен показать положительный результат. Кроме того, этот метод полностью автоматизирован и не зависит от человека. Однако ложноотрицательные результаты встречаются все же часто, для скрининга на сифилис метод непригоден. Еще он, также как и РИФ, является дорогим и применяется редко.

  1. Материалы для исследования — отделяемое твердого шанкра и высыпания вторичного периода или пунктат лимфоузла.
  2. Устанавливается присутствие самой бледной трепонемы или ее ДНК.
  3. В диагностике сифилиса являются второстепенными, и используются только для подтверждения болезни.
  4. Могут быть положительными уже в первые недели с момента появления твердого шанкра.
  5. После выздоровления всегда будут показывать отрицательный результат (непрямые методы могут оставаться положительными).

Достоинства:

  • Возможность диагностики на самом раннем этапе, когда серологические тесты ещё отрицательны.
  • Высокая специфичность (97–100%): при положительных результатах сифилис считается доказанным.

Недостатки:

  • Нельзя использовать для контроля эффективности лечения: они не имеют количественной оценки и не способны оценить — стало ли бактерий в организме в целом меньше или нет.
  • Довольно большое количество ложноотрицательных результатов: Если взять всех больных свежим сифилисом и провести его диагностику с помощью прямых методов, то 7–8 результатов из 10 будут положительными, и 2–3 отрицательными.
  • Невозможность подтверждения скрытого сифилиса.
назад к разделу «Сифилис» Записаться на прием к венерологу   назад к разделу «Сифилис»


Смотрите также