Пцр анализ на вич

Анализ пцр на вич. На сколько он точен и достоверен? Методы диагностики

ПЦР - это один из основных методов диагностики инфекционных заболеваний. Применяется он и при определении ВИЧ инфекции.

Используется ПЦР для различных целей.

Это может быть:

первичная диагностика инфекционного заболевания;
оценка прогноза;
определение вирусной нагрузки;
подбор лечения;
определение резистентности к антиретровирусным препаратам.

В ходе реакции ПЦР выявляют РНК вируса или ДНК провируса из клеток крови. Точность исследования достаточно высокая.

Наибольшая точность у метода, предполагающего обнаружение ДНК. Он позволяет выявить провирус при его концентрации от 1 до 5 копий ДНК на 1 миллион клеток. Исследование обладает высокой специфичностью. Она достигает 97%. Причем, если обнаруживается высокая вирусная нагрузка, то специфичность теста достигает 100%.

Ложноположительные результаты всегда дают низкий уровень вирусной нагрузки. Поэтому при обнаружении такого результата может потребоваться повторное определение ДНК провируса.

ПЦР имеет ограниченное применение. Этот анализ используется чаще всего не для первичной диагностики инфекции, а уже в процессе лечения. Тогда как первичная диагностика проводится с помощью серологических исследований. Это анализы, при которых в крови определяется уровень антител к ВИЧ. Они стоят гораздо дешевле.

ПЦР обходится пациенту в частных лабораториях в сумму 150-200 долларов США. Тем не менее, иногда этот способ бывает необходимым и при первичной диагностике инфекции. Он раньше всего становится информативным. С помощью анализа можно диагностировать ВИЧ уже в острый период. В это время человек страдает от повышенной температуры тела, боли в мышцах и суставах, тошноты высыпаний на коже и других симптомов. Хотя иногда они отсутствуют.

Острый период наступает сразу после инфекционного. В это время антитела методом ИФА еще могут не определяться. А ПЦР уже становится положительной. Однако оснований для назначения данного исследования при возникновении у больного ранних симптомов ВИЧ обычно не возникает. Потому что эти симптомы неспецифичны.

Человек просто идет к терапевту и лечится от острой респираторной вирусной инфекции.

Только если у него есть основания считать, что он заражен ВИЧ-инфекцией, может проводиться первичная диагностика методом ПЦР. Например, если человек имел половые контакты с ВИЧ-положительным партнером. А впоследствии у него проявились симптомы, вызывающие подозрение на инфицирование. Тогда ПЦР даст возможность раньше выявить заболевание и получить своевременную терапию. Ему будут назначены антиретровирусные препараты, которые блокируют размножение вируса и предотвращают нарушения иммунитета.

Антитела становятся положительными только в латентный период. Определение ДНК провируса может быть качественным или количественным. Качественный анализ означает, что результат выдается положительный или отрицательный. Вирусная нагрузка не определяется.

В диагностике ВИЧ вирусная нагрузка имеет большое прогностическое значение. Поэтому чаще используется количественный тест. ПЦР таким образом помогает выяснить, насколько много вирусов содержится в крови пациента. Исходя из этого, планируется необходимый объем терапевтических мероприятий.

Тест ПЦР ультрачувствительный. Он почти не дает ложноотрицательных анализов. Потому что благодаря ПЦР можно выявлять даже минимальные концентрации вируса в организме.

Этот метод часто используется для первичной диагностики ВИЧ инфекции у детей, которые рождены от больных матерей.

Анализ на антитела в детском возрасте не информативен. Потому что в их крови могут циркулировать антитела матери. Их наличие не говорит о том, что ребенок болен. Поэтому в первые 2 месяца жизни малыш должен сдать анализ на ВИЧ методом ПЦР. Через несколько месяцев его проводят повторно. Если оба анализа отрицательные, нет оснований полагать, что у ребенка инфекция. Скорее всего, он здоров. Но кормить грудью его нельзя. Потому что вирус передается через грудное молоко.

В возрасте 1 год при отрицательных результатах анализов ребенка снимают с учета. Показанием для обследования детей может быть только их рождение от ВИЧ-позитивных матерей. Потому что симптомов инфекции у них нет до возраста 5 лет и более. Очень редко клинические признаки появляются раньше.

В среднем риск передачи ВИЧ от матери к ребенку, если она больна, составляет 30%. Антитела в детском организме к этому возбудителю могут обнаруживаться в течение первых полутора лет жизни. К этому времени ребенок серопозитивный всегда, независимо от наличия у него заболевания. После 2 лет жизни диагностика может проводиться с помощью анализа крови на антитела.

Анализ нет смысла сдавать в первые дни жизни ребенка. Потому что в это время возможны ложноотрицательные результаты. Только у одного ребенка из трех в этот период может быть выявлено ДНК провируса в случае, если малыш инфицирован. А вот спустя месяц чувствительность теста достигает 93%.

Это меньше, чем у взрослых. Именно по этой причине требуется двукратное проведение теста с разрывом в 1-2 месяца. Проведение химиопрофилактики ВИЧ не снижает диагностической ценности исследования, что является одним из его преимуществ.

Помимо ДНК провируса, определяется также РНК вируса иммунодефицита человека. Это исследование проводится в основном не для первичной диагностики. Оно назначается пациентам с уже диагностированным заболеванием. Основная цель - это мониторинг эффективности терапии и прогноз патологии. Для определения РНК - это ранний маркер результативности лечения.

С помощью этого метода:

решается вопрос о назначении антиретровирусной терапии;
оценивается, насколько эффективным является проводимое лечение;
проводится мониторинг клинического течения инфекции;
у беременных с помощью данного теста на месяц до родов определяется риск передачи ВИЧ ребенку, соответственно, оценивается целесообразность кесарева сечения.

Кроме того, с помощью ПЦР тестируют донорскую кровь. Данный метод диагностики указан в соответствующем приказе РФ от 2008 года.

Разные тест-системы выявляют вирус в разных концентрациях. Минимальный порог отличается. Он может быть от 20 копий в мл, тогда как другие системы определяют только от 150 копий в мл.

Вместе с исследованием на РНК вируса иммунодефицита может быть проведена оценка чувствительности к антиретровирусным препаратам. Это возможно только в случае, если вирус определяется в количестве более 1 тысячи копий в мл.

Оценивается чувствительность к таким препаратам:

ингибиторам протеазы;
ненуклеозидным или нуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы.

Показания к исследованию:

снижение эффективности проводимой терапии, если нет других видимых причин уменьшения эффекта от препаратов;
острый период инфекции, до начала антиретровирусной терапии, если точно известно, что человек инфицирован от партнера, у которого лечение стало неэффективным (имеет место резистентность к препаратам).

Резистентность к антиретровирусной терапии может быть первичной или вторичной.

Первичная - это когда человек изначально заражен устойчивым вирусом.
Вторичная развивается в случае, когда человек неправильно лечился.

Например, не вовремя получал препараты, делал перерывы в лечении, получал неадекватные дозы и т.д.

Признаки резистентности:

РНК вируса иммунодефицита не снижается в течение 6 недель лечения;
рецидив заболевания (обнаружение высокой концентрации РНК на фоне непрекращающейся терапии, если ранее была достигнута супрессия).

При этом важно исключить другие возможные причины прогрессирования болезни, за исключением резистентности. Нужно убедиться, что лечение действительно было непрерывным. То есть, что больной не игнорировал рекомендации врача и не прекращал лечение. А также что он не имеет заболеваний, при которых может нарушиться усвоение лекарственного препарата в желудочно-кишечном тракте.

Определение резистентности к антиретровирусным лекарствам дает возможность пересмотреть схему терапии. В неё включают те препараты, к которым вирус чувствительный.

Такое лечение не приводит к полному излечению ВИЧ, но:

продлевает жизнь;
сохраняет трудоспособность пациента;
уменьшает риск передачи инфекции;
нормализует состояние иммунитета.

Через сколько можно

Часто пациенты спрашивают, через сколько времени можно делать анализ методом ПЦР на ВИЧ. Это исследование проводится гораздо раньше, чем ИФА. Патологию можно выявить в остром периоде, а иногда и в инкубационном периоде. Сдавать анализ можно через 2-4 недели. В то время как кровь на антитела сдают не раньше, чем через 6 недель.

ПЦР на ВИЧ может быть положительным уже спустя 14-21 день после возможного инфицирования.

Но если анализ отрицательный, это не гарантирует отсутствие инфекции.

Лучше провести подтверждающий тест медом ИФА через несколько недель. А вот если ПЦР положительный, то очень мало шансов, что результаты анализа неправильные. Сдать анализ на ВИЧ методом ПЦР можно в нашей клинике.

Наши преимущества:

нет очередей - сдача анализов по записи на определенное время;
быстрые сроки выполнения анализов;
возможность анонимного исследования;
никому кроме вас мы не сообщим результаты анализов.

У нас используются самые современные методы диагностики, включая определение РНК вируса или ДНК провируса. При необходимости можно оценить результаты терапии и провести оценку резистентности ВИЧ к лечению антиретровирусными препаратами. Результаты вы получите через несколько дней.

ПЦР-исследование — современная диагностика ВИЧ, СПИД

Почему так страшен ВИЧ и СПИД, какие существуют методы диагностики. Углубленная информация про ПЦР-исследования.

Вирус иммунодефицита человека. Чума 20-го века.

По статистике, предоставленной Всемирной организацией здоровья совместно с организацией ООН ЮНЭЙДС, за последние сорок лет более 25 миллионов пациентов скончались от заболеваний ВИЧ и СПИД. Не зря эпидемиологи окрестили ВИЧ чумой 20-го века, так как урон, нанесенный этой инфекцией человечеству, имеет колоссальные масштабы. Наиболее сильно заражению подверглись страны африканского континента. Заражение сильно бьет по экономике и без того нестабильных государств, народ нищенствует.

При появившейся симптоматике чрезвычайно важна оперативная диагностика заражения организма ВИЧ-инфекцией, потому как вовремя пройденный курс терапии способен спасти или хотя бы увеличить срок жизни пациента. В нынешнее время технологический прогресс шагнул далеко: изобретены новейшие способы диагностики вируса ВИЧ и СПИДа, лечение доступно для любого человека планеты, достоверность анализов характеризуется малой долей погрешности, а терапия большим процентов эффективности.

Диагностика инфекции ВИЧ

В нашей стране выявление присутствия в организме пациента ВИЧ-инфекции представляет собой комплекс анализов:

Иммуноферментный анализ
Иммунный блоттинг
Полимеразная цепная реакция
Экспресс-тесты

Иммунофермнтный анализ.

Скрининг (тест ИФА) является первоначальной стадией определения заражения в организме. Он базируется на образованных в искусственных условиях белковых соединениях вируса, которые идентифицируют продуцируещиея иммунными клетками антитела как реакцию на заражение. Происходит химическая реакция между реактивами, вследствие чего индикаторный элемент меняет цвет. Значит, результат теста положительный. Информацию по такому способу можно получить через пару недель с момента инфицирования. Таковой способ выявляет не присутствие инфекции у пациента, а определяет вырабатывающиеся к этой инфекции антитела. Бывает, продуцирование антител стартует через 10-15 дней с момента инфицирования, но в подавляющем большинстве случаев позднее – через 1-1,5 месяца.

Информация по такому анализу обрабатывается от двух до десяти дней.

Достоверность диангоза на ВИЧ подкрепляется анализом ИБ. Исключительно положительный тест ИБ на вирус может служить веской причиной для утверждения инфицирования.

Суть анализа:

В лаборатории берут пробу венозной крови на анализ. Пробу дополнительно подготавливают, белковые соединения, которые в ней присутствуют, электризуются в испытательной камере, далее их распределяют в гелевой субстанции соответственно молекулярной массе. Бумажную полосу с напылением реактива несколько раз помещают в подготовленную пробу. При наличии в пробе антител к вирусу происходит химическая реакция и на тестовой полосе становятся видны черточки. Когда появляются 2 или 3 черточки p24, gp41, и gp120 или gp160, результат теста положительный.

При получении положительного результата по анализу ИБ с погрешностью в один процент можно сделать заключение о наличии инфекции ВИЧ в организме.

Экспресс-тесты на ВИЧ и СПИД

Новейшими технологиями для определения вируса иммунодефицита в организме являются экспресс-методы. Информацию по такому анализу можно получить через несколько минут после проведения. Наиболее высокая достоверность у иммунохромаграфических тестов – специальных тест-полос, на поверхности которых напыляется слой реагента. Антитела, содержащиеся в испытуемом материале, контактирует с реагентом, изменяя окраску индикатора. Через несколько минут проявляются две полоски, что указывает на наличие инфекции. Наличие единственной полосы означает отсутствие инфекции.

Такой тест можно использовать как дополнительный, информация по такому тесту обязательно подтверждается другими исследованиями.

Сколько стоит экспресс-тест на ВИЧ?

Экспресс-тест на ВИЧ в среднем обойдется в 200-1000 рублей.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР – анализ крови, позволяющий с малым процентом погрешности определить присутствие заражения инфекцией в организме. Практическая суть данного способа тестирования в анализе молекул дезоксирибонуклеиновой и рибонуклеиновой кислоты.

Нередко встречается, что разные инфекции с разной этиологией протекают со схожей симптоматикой. Анализ ПЦР диагностирует инфекцию, причину ее образования, классифицирует степень заражения пациента и количественный состав вредоносных микроорганизмов. С помощью ПЦР специалист способен выявить даже крошечную толику молекул вируса, содержащуюся в организме, а при идеальных условиях одинарные злокачественные бактерии и штаммы вируса. Такая информативность обеспечивает специалисту возможность правильного выбора курса терапии.

Подробно о сути анализа

Анализ основывается га многочисленном повторении отдельно выбранного отрезка цепи ДНК с добавлением ферментов в лабораторной среде. В ходе процесса копируется тот отрезок, который подходит по нужным параметрам и обязательно, чтобы этот отрезок был частью испытуемой пробы. Маленькие отрезки ДНК копируются в специально созданной среде с добавлением химических веществ, ускоряющих процесс.

Компоненты реакции

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

Матрица дезоксирибонуклеиновой кислоты с присутствием отрезка ДНК, готовящегося к амплификации
Пара праймеров – по одному для каждого из отрезков цепи
Специальное химически активное вещество полимераза, которое ускоряет процесс полимеризации ДНК.
Дезоксирибонуклеозидтрифосфаты
Заряженные частицы магния двухвалентного
Буферный раствор, который создает нужные условия для протекания процесса, а именно кислотность, концентрацию соли и заряженных частиц магния в растворе.

Обычно для защиты образца от перегрева в пробу с реагентами помещают вазелин, так как этот продукт содержит жиры и имеет высокую температуру кипения.

Анализ ПЦР диагностирует РНК инфекции. Характерная особенность такого анализа – большая достоверность, он помогает выявить заражение вирусом ВИЧ через полторы недели с момента инфицирования. Иногда бывает, что анализ дал ложные сведения, потому как его сильная чувствительность вызывает реакцию на антитела к другим вирусам в организме.

Сколько стоит сдать ПЦР-исследование?

Такой способ диагностики не дешевый. Он предполагает наличие новейшей медицинской аппаратуры и определенных знаний в этой области. Поэтому ПЦР-диагностика не используется для групповых анализов.

Анализ на ПЦР можно сдать в специализированных клиниках нашей страны в среднем за 3500 рублей.

ПЦР-диагностика. Причины для проведения

ПЦР назначают для:

Диагностики ВИЧ у ребенка, если мать была подвержена заражению инфекцией – вирус мог передаться через плаценту внутриутробно.
Определения вируса, когда иммуноферментный анализ дал размытые сведения
Отслеживания количественного уровня вируса в организме
Тестирования доноров

Результат анализа ПЦР не является достаточным основанием для постановки диагноза. Для этого нужно комплексное обследование наряду с прохождением других тестов. ПЦР скорее используется как вспомогательный метод, позволяющий разобраться в сложных случаях.

Сколько стоит сдать анализ на ВИЧ?

Помощь по диагностике вируса иммунодефицита можно получить абсолютно бесплатно в государственных медучреждениях. В частных клиниках диагностика ВИЧ обойдется от 3 до 5 тысяч рублей.

(1 оценок, среднее: 5,00 из 5) Загрузка...

Диагностика и анализ крови на ВИЧ разными методами: методом ПЦР, ИФА, общий анализ крови, Экспресс-анализ. Показатели и расшифровка анализов ВИЧ

Своевременная диагностика любого заболевания облегчает лечение и снижает риск серьезных осложнений. Относительно ВИЧ, несмотря на неизлечимость болезни, раннее выявление инфицирования... Сифилис и ВИЧ относят к социальным болезням, поэтому РВ (RW) входит в любой стандартный набор исследований. Когда назначают и какие... Определим понятие вирусной нагрузки, ее норму на разных стадиях заражения ВИЧ. Когда показатель вирусной нагрузки растет и чем это грозит... Полимеразная цепная реакция или ПЦР - один из современных методов диагностики ВИЧ. Проведение анализа ПЦР на ВИЧ и расшифровка результатов... Ошибки при диагностике могут привести к плачевным последствиям. ИФА на ВИЧ наиболее доступный метод исследования. Следует разобраться, насколько он эффективен,...

Сколько времени делается ПЦР анализ на ВИЧ?

Вирус иммунодефицита человека никак не проявляет себя на протяжении от двух до 15 лет. Вирус атакует иммунную систему, снижая защиту организма от болезней. Симптомы иммунодефицита проявляются только в стадии СПИДа. Найти возбудителя в крови на ранних стадиях позволяет анализ на ВИЧ.

Исследования проводятся во всех государственных медицинских учреждениях, многих коммерческих центрах. Люди группы риска регулярно проходят диагностику, другим исследуют сывороточные пробы при подозрении на заражение.

РНК-вирус из группы ретровирусов встраивается в хозяйские молекулы ДНК. Возбудитель распространяется несколькими путями: гематогенным, половым, вертикальным. Своевременное выявление вирусоносителей препятствует массовому заражению.

Выявление вируса иммунодефицита

На тестовое исследование пациенты традиционно сдают венозную кровь для анализа на ВИЧ и СПИД. Первичная диагностика заболевания заключается в определении антител к 1 и 2 типу вируса, антигена p24. По статистике порядка 15% больных СПИДом являются вирусоносителями гепатита С, В.

Анализ на anti-HIV1, 2/Ag p24, антитела при подозрении на инфицирование проводится совместно с тестом на гепатиты. Методы молекулярной диагностики вируса ВИЧ отличаются высокой точностью. Когда тест положительный, обязательно проводится повторное исследование сыворотки для подтверждения или опровержения первичного результата.

Какой анализ позволяет выявить вирус иммунодефицита в организме?

Тесты сыворотки определяют:

РНК-вирус иммунодефицита;
ДНК-геном вируса;
антитела 1 и 2 типа.

Методом иммуноферментного исследования выявляется антиген Р24. ПЦР-анализом на ВИЧ возбудитель выявляется на ранних стадиях, через две недели после заражения. По общему анализу крови при ВИЧ судят о состоянии здоровья пациента, присутствие вируса по результатам не установить.

Что сдают для анализа на ВИЧ?

В опасной концентрации вирус присутствует в половом секрете, грудном молоке, кровяной сыворотке, раневом экссудате. Лабораторными методами выявить возбудитель можно в любых биологических жидкостях:

моче;
испражнениях;
соскобах;
слюне;
тканях, извлеченных при биопсии;
спинномозговой жидкости;
плевральных скоплениях.

Когда врач назначает анализ крови на ВИЧ или СПИД?

Тест делается пациентам с:

половыми инфекциями;
гепатитами, им каждые три месяца необходимо сдавать анализы на ВИЧ и гепатиты В, С.

В обязательном порядке обследуются:

медицинские работники;
доноры крови, биологического семенного материала (яйцеклеток, спермы);
беременные женщины;
поступающие на стационарное лечение больные;
призывники в ряды вооруженных сил.

Обследование рекомендовано:

инъекционным наркоманам;
лицам, имеющим контакт с инфицированными;
людям, подвергшимся половому насилию
после случая повышенного риска заражения.

Принцип действия диагностических тестов

По общему анализу крови при ВИЧ судят о развитии иммунодефицита. Повышение уровня лейкоцитов и лимфоцитов характерно на начальных стадиях. Затем развивается лимфопения – организм уже не сопротивляется возбудителю. Снижается уровень гемоглобина, развивается анемия.

Кровь хуже сворачивается из-за снижения количества тромбоцитов. Еще один показатель – нейтрофилы, они продуцируются костным мозгом. Их тоже становится меньше. Через 12-14 дней после заражения концентрация вируса достигает уровня чувствительности прибора.

ПЦР-исследование крови на ДНК выявляет молекулу провируса, определяет вирусную нагрузку. ИФА методом, комбинированными тестами обнаруживают антитела к вирусу, антиген р24. Они появляются в сыворотке крови через две недели после инфицирования. Затем их концентрация растет до месяца. Потом их уровень остается неизменным на протяжении многих лет.

Подготовка к исследованию

В течение 4-х дней перед сдачей анализа крови на ВИЧ и гепатиты В, С необходимо разгрузить организм:

снизить пищевую и медикаментозную нагрузку;
отказаться от алкоголя;
убрать из рациона вредные продукты с химическими добавками, канцерогенами;
воздержаться от половых контактов.

Для сдачи анализа на ВИЧ необходим пустой желудок, тогда снижается риск ложных результатов.

Сроки выполнения анализа

Для получения результата экспресс-анализа на ВИЧ необходимо меньше суток, срочное исследование крови в центрах проводится в течение двух часов. Для проведения иммуноблота (двойного исследования ИФА) требуется от трех до 10 дней. Такие исследования проводятся в референс-лабораториях или СПИД-центрах.

Если проводят полимеразную цепную реакцию на определение иммунных окончаний, для получения нужного числа копий требуется до трех дней. Сколько будет делаться анализ на ВИЧ, зависит от удаленности от лаборатории. С учетом хранения, транспортировки биоматериала срок исполнения может затянуться до 10 рабочих дней.

Стоимость обследования

Расценки на тестирование указываются в прайсах клиник. Стоимость зависит от сложности теста, вида диагностического оборудования (от 350 рублей стоит иммуноблот, от 700рублей – ИФА, до 9 тысяч – количественный ПЦР).

Государственные учреждения проводят диагностику бесплатно. Но сдать кровь анонимно в этом случае не получится. Необходимо предъявить паспорт или другое удостоверение личности, миграционную карту.

Анонимное обследование на ВИЧ

Если возникли подозрения на заражение, сначала необходимо оценить общее состояние. Отклонения в общем анализе крови при ВИЧ – повод пройти дополнительное тестирование. Настораживает снижение уровень лейкоцитов, тромбоцитов, других показателей.

Анонимные анализы на ВИЧ проводятся в специализированных центрах. При необходимости для забора крови специалисты выезжают на дом. Пациенту присваивается регистрационный номер. Для граждан предусмотрено бесплатное обследование на ВИЧ анонимно в центрах СПИДа, приезжим придется платить. Экспресс-тесты проводят многие частные клиники.

Результаты анализа

Трактуются экспресс-анализы на ВИЧ по четырем показателям: положительный, отрицательный, ложноположительный, ложноотрицательный. Методом блоттинга определяются гликопротеины gp160, gp120, gp41. Метод ИФА выявляет антиген р24, антитела типа 1, 2. Два метода одновременно снижают процент ошибки до 0,1%.

Что делать, если анализ положительный?

При сомнительном результате проводится ПЦР. Он позволяет определить присутствие антител в крови, их концентрацию в пробе. Если повторное тестирование подтвердит факт инфицирования, необходимо начинать поддерживающую терапию, сохраняющую качество жизни больного.

Через полгода делается повторное исследование мочи, слюны, крови. Если результат по-прежнему положительный, необходимо продолжать лечение, соблюдать рекомендации врача. Человек возлагает на себя добровольные обязательства по сохранению мер безопасности, чтобы не стать распространителем возбудителя. Необходимо соблюдать сроки, когда сдавать кровь на очередное исследование.

Ложноположительный и ложноотрицательный результат при исследовании

Анализы на ВИЧ и гепатит В, С придется проходить повторно при ложных результатах. Основные причины ложноположительных оценок:

беременность, в 23% случаев плод воспринимается организмом как чужеродный объект;
гормональные изменения при приеме противозачаточных препаратов, менструация;
недавние прививки;
донорство;
склеротические поражения;
заболевания легких (туберкулез, саркома);
печеночные патологии;
раковые образования;
герпес;
лихорадочное состояние.

В этих случаях не стоит паниковать, необходимо повторно обследоваться.