Микроскопическое исследование мокроты


Микроскопическое исследование мокроты

Микроскопическое исследование мокроты включает изучение нативных (естественных, необработанных) и окрашенных препаратов. Для первых отбирают гнойные, кровянистые, крошковатые комочки, переносят их на предметное стекло в таком количестве, чтобы при накрывании покровным стеклом образовался тонкий полупрозрачный препарат. При малом увеличении микроскопа могут быть обнаружены спирали Куршманна в виде плотных тяжей слизи различной величины. Они состоят из центральной плотной блестящей извитой осевой нити и спиралеобразно окутывающей ее мантии (рис. 9), в которую бывают вкраплены лейкоциты. Спирали Куршманна появляются в мокроте при спазме бронхов. При большом увеличении в нативном препарате (рис. 11) можно обнаружить лейкоциты, эритроциты, альвеолярные макрофаги, клетки сердечных пороков, цилиндрический и плоский эпителий, клетки злокачественных опухолей, друзы актиномицетов, грибки, кристаллы Шарко—Лейдена, эозинофилы. Лейкоциты — серые зернистые круглые клетки. Большое количество лейкоцитов можно обнаружить при воспалительном процессе в органах дыхания. Эритроциты — небольшие гомогенные желтоватые диски, появляющиеся в мокроте при пневмонии, застое в малом круге кровообращения, инфаркте легкого и разрушении ткани. Альвеолярные макрофаги — клетки размером в 2—3 раза больше лейкоцитов с обильной крупной зернистостью в цитоплазме. Путем фагоцитоза они очищают легкие от попадающих в них частиц (пыли, распада клеток). Захватывая эритроциты, альвеолярные макрофаги превращаются в клетки сердечных пороков (рис. 12 и 13) с желто-бурыми зернами гемосидерина, дающими реакцию на берлинскую лазурь. Для этого к комочку мокроты на предметном стекле прибавляют 1—2 капли 5% раствора желтой кровяной соли и столько же 2% раствора соляной кислоты, смешивают, накрывают покровным стеклом. Через несколько минут микроскопируют. Зерна гемосидерина окрашиваются в синий цвет.

Цилиндрический эпителий дыхательных путей распознается по клиновидной или бокаловидной форме клеток, на тупом конце которых в свежей мокроте видны реснички; его много при остром бронхите и остром катаре верхних дыхательных путей. Плоский эпителий — большие многоугольные клетки из полости рта, диагностического значения не имеют. Клетки злокачественных опухолей — большие, различной неправильной формы с крупными ядрами (для распознавания их требуется очень большой опыт исследующего). Эластические волокна — тонкие, извитые, двухконтурные бесцветные волоконца одинаковой толщины на всем протяжении, разветвляющиеся надвое на концах. Они часто складываются кольцевидными пучками. Встречаются при распаде легочной ткани. Для более надежного их обнаружения несколько миллилитров мокроты кипятят с равным количеством 10% едкой щелочи до растворения слизи. После остывания жидкость центрифугируют, прибавив к ней 3—5 капель 1%  спиртового раствора эозина. Осадок микроскопируют. Эластические волокна выглядят, как описано выше, но ярко-розового цвета (рис. 15). Друзы актиномицетов для микроскопирования раздавливают в капле глицерина или щелочи. Центральная часть друзы состоит из сплетения тонких нитей мицелия, его окружают лучисто расположенные колбовидные образования (рис. 14). При окраске раздавленной друзы по Граму мицелий окрашивается в фиолетовый, колбочки в розовый цвет. Грибок кандида альбиканс имеет характер почкующихся дрожжевых клеток или короткого ветвистого мицелия с небольшим числом спор (рис. 10). Кристаллы Шарко — Лейдена — бесцветные ромбические кристаллы разной величины (рис. 9), образующиеся из продуктов распада эозинофилов, встречаются в мокроте наряду с большим количеством эозинофилов при бронхиальной астме, эозинофильных инфильтратах и глистных инвазиях легкого. Эозинофилы в нативном препарате отличаются от других лейкоцитов крупной блестящей зернистостью, они лучше различимы в мазке, окрашенном последовательно 1% раствором эозина (2—3 мин.) и 0,2% раствором метиленового синего (0,5 мин.) или по Романовскому — Гимзе (рис. 16). При последней окраске, а также при окраске по Маю — Грюнвальду распознают опухолевые клетки (рис. 21).

Рис. 9. Спираль Куршмана (вверху) и кристаллы Шарко—Лейдена в мокроте (нативный препарат). Рис. 10. Candida albicans (в центре) — почкующиеся дрожжеподобные клетки и мицелий со спорами в мокроте (нативный препарат). Рис. 11. Клетки мокроты (нативный препарат): 1 — лейкоциты; 2 — эритроциты; 3 — альвеолярные макрофаги; 4 — клетки цилиндрического эпителия. Рис. 12. Клетки сердечных пороков в мокроте (реакция на берлинскую лазурь). Рис. 13. Клетки сердечных пороков в мокроте (нативный препарат). Рис. 14. Друза актиномицетов в мокроте (нативный препарат). Рис. 15. Эластические волокна в мокроте (окраска эозином). Рис. 16. Эозинофилы в мокроте (окраска по Романовскому — Гимзе): 1 — эозинофилы; 2 — нейтрофилы. Рис. 17. Пневмококки и в мокроте (окраска по Граму). Рис. 18. Диплобациллы Фридлендера в мокроте (окраска по Граму). Рис. 19. Палочка Пфейффера в мокроте (окраска фуксином). Рис. 20. Микобактерии туберкулеза (окраска по Цилю— Нельсену). Рис. 21. Конгломерат раковых клеток в мокроте (окраска по Маю — Грюнвальду).

Микроскопическое исследование включает изучение нативных и окрашенных препаратов. Для приготовления нативного препарата мокроту наливают тонким слоем в чашки Петри и на темном фоне отбирают гнойные, кровянистые, крошковатые комочки извитые белые нити, переносят их на предметное стекло и накрывают покровным. При исследовании нативного препарата можно обнаружить клеточные элементы, эластические волокна, спирали Куршмана, кристаллические образования, животных и растительных паразитов.

При малом увеличении обнаруживают спирали Куршмана в виде тяжей слизи различной величины, состоящих из центральной осевой нити и спиралеобразно окутывающей ее мантии (цветн. рис. 9). В последнюю нередко вкраплены лейкоциты, клетки цилиндрического эпителия, кристаллы Шарко—Лейдена. Осевая нить при поворотах микровинта то ярко блестит, то становится темной, может быть незаметна, а часто видна только она одна. Спирали Куршмана появляются при спазме бронхов, чаще всего при бронхиальной астме, реже при пневмониях, раке.

При большом увеличении обнаруживают следующее. Лейкоциты присутствуют всегда в мокроте, их много при воспалительных и нагноительных процессах; среди них встречаются эозинофилы (при бронхиальной астме, астмоидном бронхите, глистных инвазиях легких), отличающиеся крупной блестящей зернистостью (цветн. рис. 7). Эритроциты единичные могут быть в любой мокроте, их может быть много при разрушении ткани легкого, при пневмонии и застое крови в малом круге кровообращения. Эпителий плоский — крупные полигональные клетки с малым ядром, попадающие в мокроту из глотки и полости рта, диагностического значения не имеют. Эпителий цилиндрический мерцательный появляется в мокроте в значительном количестве при поражениях дыхательных путей. Единичные клетки могут быть в любой мокроте, они удлиненной формы, один конец заострен, другой — тупой, несет реснички, обнаруживаемые только в свежей мокроте; при бронхиальной астме встречаются округлые группы этих клеток, окруженные подвижными ресничками, придающими им сходство с реснитчатыми инфузориями.

Альвеолярные макрофаги — округлые клетки в 2—4 раза больше лейкоцита с 1—2 ядрами, часто прикрытыми обильными цитоплазматическими включениями, которые могут быть бесцветными, черными от частиц угля (пылевые клетки), желто-коричневыми от гемосидерина («клетки сердечных пороков», сидерофаги). Клетки злокачественных опухолей могут быть определены в нативном препарате при резко выраженной их атипии (большие клетки уродливой формы с крупным ядром, иногда 2—3 ядрами разной величины и формы); более убедительны для диагностики рака легкого комплексы полиморфных клеток либо описанного выше характера, либо мелких, с четко очерченными ядрами и иным, чем у других клеток мокроты, коэффициентом преломления света. Еще достовернее определение клеток злокачественных опухолей в окрашенных препаратах. Эластические волокна появляются в мокроте при распаде легочной ткани. Это тонкие двуконтурные волоконца, изогнутые, дихотомически ветвящиеся, располагающиеся пучками, нередко кольцевидными. В нативном препарате встречаются редко, для обнаружения их концентрируют: к нескольким миллилитрам мокроты прибавляют равное количество 10% раствора едкой щелочи, нагревают до растворения слизи, остужают и наливают в центрифужную пробирку, в которую налито 5—7 капель 1% спиртового раствора эозина, центрифугируют. Осадок микроскопируют. Эластические волокна выделяются яркой красной окраской (цветн. рис. 11). Гельминты в мокроте обнаруживаются редко, несколько чаще встречаются их яйца, а при прорыве эхинококкового пузыря — сколексы, крючья, обрывки оболочки; иногда с мокротой выделяются мигрирующие личинки аскарид. Из простейших изредка встречаются амебы (Entamoeba gingivalis), трихомонады и токсоплазмы. Из растительных паразитов наибольшее значение имеют лучистые, дрожжевые и плесневые грибки. Для обнаружения лучистого грибка (актиномицета) в мокроте отыскивают мелкие желтоватые плотные крупинки (друзы), переносят их на предметное стекло в каплю глицерина или щелочи и раздавливают под покровным стеклом. Характерным для друзы является состоящая из сплетения мицелия центральная часть, окруженная зоной лучисто расположенных колбовидных образований (цветн. рис. 12). При окрашивании раздавленной друзы по Граму мицелий приобретает фиолетовый, колбочки — розовый цвет. Из дрожжевых грибков наибольшее значение имеет Candida albicans. В нативных препаратах обнаруживают почкующиеся клетки и короткий ветвистый мицелий, на котором споры расположены мутовками (цветн. рис. 10). Плесневые грибки (искать в свежей мокроте) имеют широкие нити мицелия и круглые зеленоватые споры. На среде Сабуро дают характерный рост. Кристаллы Шарко — Лейдена — бесцветные октаэдры разной величины, образуются при распаде эозинофилов; кристаллы гематоидина буро-красные, ромбические или игольчатые появляются после легочных кровоизлияний; кристаллы холестерина, жирных кислот и мыл (см. рис. к ст. «Кал») — при длительном застое гнойной или гнилостной мокроты.

Цитологическое исследование. Изучают нативные и окрашенные препараты. Для исследования клеток комочки мокроты осторожно растягивают на предметном стекле при помощи лучинок. При поисках опухолевых клеток материал отбирают в нативном препарате. Высохший мазок фиксируют метанолом и окрашивают по Романовскому — Гимзе (или по Папаниколау). Раковые клетки характеризуются гомогенной, иногда вакуолизированной цитоплазмой от серо-голубого до синего цвета, большим рыхлым, а нередко гиперхромным, фиолетовым ядром с ядрышками. Ядер может быть 2—3 и более, порой они неправильной формы; характерен полиморфизм ядер в одной клетке.

Наиболее убедительны комплексы полиморфных клеток описанного характера (цветн. рис. 13 и 14). Эозинофилы окрашивают либо по Романовскому — Гимзе, либо последовательно 1% раствором эозина (2 мин.) и 0,2% раствором метиленового синего (0,5—1 мин.).

Микроскопический анализ мокроты

Микроскопическое исследование нативных и фиксированных окрашенных препаратов мокроты позволяет подробно изучить ее клеточный состав, и известной степени отражающий характер патологического процесса в легких и бронхах, его активность, выявить различные волокнистые и кристаллические образования, также имеющие важное диагностическое значение, и, наконец, ориентировочно оценить состояние микробной флоры дыхательных путей (бактериоскопия).

При микроскопии используют нативные и окрашенные препараты мокроты. Для изучения микробной флоры (бактериоскопии) мазки мокроты обычно окрашивают по Романовскому-Гимзе, по Граму, а для выявления микобактерий туберкулеза но Цилю-Нильсену.

Клеточные элементы и эластические волокна

Из клеточных элементов, которые можно обнаружить в мокроте больных пневмонией, диагностическое значение имеют эпителиальные клетки, альвеолярные макрофаги, лейкоциты и эритроциты.

Эпителиальные клетки. Плоский эпителий из полости рта, носоглотки, голосовых складок и надгортанника диагностического значения не имеет, хотя обнаружение большого количества клеток плоского эпителия, как правило, свидетельствует о низком качестве образца мокроты, доставленного в лабораторию и содержащего значительную примесь слюны.

У больных пневмониями мокрота считается пригодной к исследованию, если при микроскопии с малым увеличением количество эпителиальных клеток не превышает 10 в поле зрения. Большее количество эпителиальных клеток указывает на недопустимое преобладание в биологическом образце содержимого ротоглотки.

Альвеолярные макрофаги, которые в незначительном количестве также можно обнаружить в любой мокроте, представляют собой крупные клетки ретикулогистиоцитарного происхождения с эксцентрически расположенным крупным ядром и обильными включениями в цитоплазме. Эти включения могут состоять из поглощенных макрофагами мельчайших частиц пыли (пылевые клетки), лейкоцитов и т.п. Количество альвеолярных макрофагов увеличивается при воспалительных процессах в легочной паренхиме и дыхательных путях, в том числе при пневмониях.

Клетки цилиндрического мерцательного эпителия выстилают слизистую оболочку гортани, трахеи и бронхов. Они имеют вид удлиненных клеток, расширенных с одного конца, где расположено ядро и реснички. Клетки цилиндрического мерцательного эпителия обнаруживаются в любой мокроте, однако их увеличение свидетельствует о повреждении слизистой бронхов и трахеи (острый и хронический бронхит, бронхоэктазы, трахеит, ларингит).

Лейкоциты в небольшом количестве (2-5 в поле зрения) обнаруживаются в любой мокроте. При воспалении ткани легкого или слизистой бронхов и трахеи, особенно при нагноительных процессах (гангрена, абсцесс легкого, бронхоэктазы) их количество значительно увеличивается.

При окраске препаратов мокроты по Романовскому-Гимзе удается дифференцировать отдельные лейкоциты, что имеет иногда важное диагностическое значение. Так, при выраженном воспалении легочной ткани или слизистой бронхов увеличивается как общее число нейтрофильных лейкоцитов, так и количество их дегенеративных форм с фрагментацией ядер и разрушением цитоплазмы.

Увеличение числа дегенеративных форм лейкоцитов является важнейшим признаком активности воспалительного процесса и более тяжелого течения заболевания.

Эритроциты. Единичные эритроциты можно обнаружить практически и любой мокроте. Значительное их увеличение наблюдается при нарушении сосудистой проницаемости у больных пневмониями, при разрушении ткани легкого или бронхов, застое в малом круге кровообращения, инфаркте легкого и т.д. В большом количестве эритроциты в мокроте обнаруживаются при кровохарканье любого генеза.

Эластические волокна. Следует упомянуть также еще об одном элементе мокроты пластических волокнах, которые появляются в мокроте при деструкции легочной ткани (абсцесс легкого, туберкулез, распадающийся рак легкого и др.). Эластические волокна представлены в мокроте в виде тонких двухконтурных, извитых нитей с дихотомическим делением на концах. Появление эластических волокон в мокроте у больных с тяжелым течением пневмонии свидетельствует о возникновении одного из осложнений заболевания - абсцедировании ткани легкого. В ряде случаев при формировании абсцесса легкого эластические волокна в мокроте можно обнаружить даже несколько раньше, чем соответствующие рентгенологические изменения.

Нередко при крупозной пневмонии, туберкулезе, актиномикозе, фибринозном бронхите в препаратах мокроты можно обнаружить тонкие волокна фибрина.

Признаками активного воспалительного процесса в легких являются:

  1. характер мокроты (слизисто-гнойная или гнойная);
  2. увеличение количества нейтрофилов в мокроте, в том числе их дегенеративных форм;
  3. увеличение количества альвеолярных макрофагов (от единичных скоплений из нескольких клеток в поле зрения и больше);

Появление в мокроте эластических волокон свидетельствует о деструкции легочной ткани и формировании абсцесса легкого.

Окончательные выводы о наличии и степени активности воспаления и деструкции легочной ткани формируются только при их сопоставлении с клинической картиной заболевания и результатами других лабораторных и инструментальных методов исследования.

Микробная флора

Микроскопия мазков мокроты, окрашенных по Граму, и изучение микробной флоры (бактериоскопия) у части больных пневмонией позволяет ориентировочно установить наиболее вероятного возбудителя легочной инфекции. Этот простой метод экспресс-диагностики возбудителя недостаточно точен и должен использоваться только в комплексе с другими (микробиологическими, иммунологическими) методами исследования мокроты. Иммерсионная микроскопия окрашенных мазков мокроты иногда бывает весьма полезной для экстренного подбора и назначения адекватной антибактериальной терапии. Правда, следует иметь в виду возможность обсеменения бронхиального содержимого микрофлорой верхних дыхательных путей и ротовой полости, особенно при неправильном сборе мокроты.

Поэтому мокроту считают пригодной для дальнейшего исследования (бактериоскопии и микробиологического исследования) только в том случае, если она удовлетворяет следующим условиям:

  • при окраске по Грамму в мокроте выявляется большое количество нейтрофилов (более 25 в поле зрения при малом увеличении микроскопа);
  • количество эпителиальных клеток, больше характерных для содержимого ротоглотки, не превышает 10;
  • в препарате имеется преобладание микроорганизмов одного морфологического типа.

При окраске по Граму в мазке мокроты иногда можно достаточно хорошо идентифицировать грамположительные пневмококки, стрептококки, стафилококки и группу грамотрицательных бактерий - клебсиеллу, палочку Пфейффера, кишечную палочку и др. При этом грамположительные бактерии приобретают синий цвет, а грамотрицательные - красный.

Бактериальные возбудители пневмоний

Грамположительные

Грамотрицательные

  1. Пневмококки Streptococcus pneumoniae.
  2. Стрептококки Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans.
  3. Стафилококки: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.
  1. Клебсиеллы (Klebsiella pneumoniae)
  2. Гемофильная палочка (Пфейфера) Haemophilius influenzae
  3. Синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa)
  4. Легионелпа {Legionella Pneumophilia)
  5. Кишечная палочка (Escherichia coli)

Предварительная бактериоскопия мокроты является наиболее простым способом верификации возбудителя пневмонии и имеет определенное значение для выбора оптимальной терапии антибиотиками. Например, при обнаружении в мазках, окрашенных по Грамму, громположительных диплококков (пневмококков) или стафилококков вместо антибиотиков широкого спектра действия, увеличивающих риск селекции и распространения аитибиотикорезистентных микроорганизмов, возможно назначение целенаправленной терапии, активной в отношении пневмококков или стафилококков. В других случаях выявление преобладающей в мазках грамотрицательной флоры может указывать па то, что возбудителем пневмонии являются грамотрицательные энтеробактерии (клебсиелла, кишечная палочка и т.п.), что требует назначения соответствующей целенаправленной терапии.

Правда, ориентировочное заключение о вероятном возбудителе легочной инфекции при микроскопии можно сделать только па основании значительного увеличения бактерий в мокроте, в концентрации 106- 107 м.к./мл и больше (Л.Л. Вишнякова). Низкие концентрации микроорганизмов (< 103 м.к./мл) характерны для сопутствующей микрофлоры. Если концентрация микробных тел колеблется от 104 до 106 м.к./мл, это не исключает этиологическую роль данного микроорганизма в возникновении легочной инфекции, но и не доказывает ее.

Следует также помнить, что «атипичные» внутриклеточные возбудители (микоплазма, легионелла, хламидии, риккетсии) не окрашиваются по Грамму. В этих случаях подозрение на наличие «атипичной» инфекции может возникнуть, если в мазках мокроты обнаруживают диссоциацию между большим количеством нейтрофилов и чрезвычайно малым количеством микробных клеток.

К сожалению, метод бактериоскопии и целом отличается достаточно низкой чувствительностью и специфичностью. Hе предсказательная ценность даже в отношении хорошо визуализируемых пневмококков едва достигает 50%. Это означает, что в половине случаев метод дает ложноположительные результаты. Это связано с несколькими причинами, одной из которых является то, что около 1/3 больных до госпитализации уже получали антибиотики, что существенно снижает результативность бактериоскопии мокроты. Кроме того, даже в случае положительных результатов исследования, указывающих на достаточно высокую концентрацию в мазке «типичных» бактериальных возбудителей (например, пневмококков), нельзя полностью исключить наличие ко-инфекции «атипичными» внутриклеточными возбудителями (микоплазмой, хламидиями, легионеллой).

Метод бактериоскопии мазков мокроты, окрашенных по Грамму, в отдельных случаях помогает верифицировать возбудителя пневмонии, хотя в целом отличается весьма низкой предсказательной ценностью. «Атипичные» внутриклеточные возбудители (микоплазма, легионелла, хламидии, риккетсии) вообще не верифицируются методом бактериоскопии, так как не окрашиваются по Грамму.

Следует упомянуть о возможности микроскопической диагностики у больных пневмониями грибкового поражения легких. Наиболее актуальным для больных, получающих длительное лечение антибиотиками широкого спектра действия, является обнаружение при микроскопии нативных или окрашенных препаратов мокроты Candida albicans в виде дрожжеподобных клеток и ветвистого мицелия. Они свидетельствуют об изменении микрофлоры трахеобронхиального содержимого, возникающем под влиянием лечения антибиотиками, что требует существенной коррекции терапии.

В некоторых случаях у больных пневмониями возникает необходимость дифференцировать имеющееся поражение легких с туберкулезом. С этой целью используют окраску мазка мокроты по Цилю-Нильсену, что в отдельных случаях позволяет идентифицировать микобактерии туберкулеза, хотя отрицательный результат такого исследования не означает отсутствия у больного туберкулеза. При окраске мокроты по Цилю-Нильсену микобактерии туберкулеза окрашиваются в красный цвет, а все остальные элементы мокроты - в синий. Туберкулезные микобактерии имеют вид топких, прямых или слегка изогнутых палочек различной длины с отдельными утолщениями. Они располагаются в препарате группами или поодиночке. Диагностическое значение имеет обнаружение в препарате даже единичных микобактерий туберкулеза.

Для повышения эффективности микроскопического выявления микобактерий туберкулеза используют ряд дополнительных методов. Наиболее распространенным из них является так называемый метод флотации, при котором гомогенизированную мокроту взбалтывают с толуолом, ксилолом или бензином, капли которых, всплывая, захватывают микобактерии. После отстаивания мокроты верхний слой пипеткой наносят на предметное стекло. Затем препарат фиксируют и окрашивают по Цилю-Нильсену. Существуют и другие методы накопления (электрофорез) и микроскопии бактерий туберкулеза (люминесцентная микроскопия).

Микроскопическое исследование (анализ) мокроты позволяет обнаружить слизь, клеточные элементы, волокнистые и кристаллические образования, грибы, бактерии и паразиты.

Клетки

  • Альвеолярные макрофаги - клетки ретикулогистиоцитарного происхождения. Большое количество макрофагов в мокроте выявляют при хронических процессах и на стадии разрешения острых процессов в бронхолёгочной системе. Альвеолярные макрофаги, содержащие гемосидерин («клетки сердечных пороков»), выявляют при инфаркте лёгкого, кровоизлиянии, застое в малом кругу кровообращения. Макрофаги с липидными каплями - признак обструктивного процесса в бронхах и бронхиолах.
  • Ксантомные клетки (жировые макрофаги) обнаруживают при абсцессе, актиномикозе, эхинококкозе лёгких.
  • Клетки цилиндрического мерцательного эпителия - клетки слизистой оболочки гортани, трахеи и бронхов; их обнаруживают при бронхитах, трахеитах, бронхиальной астме, злокачественных новообразованиях лёгких.
  • Плоский эпителий обнаруживают при попадании в мокроту слюны, он не имеет диагностического значения.
  • Лейкоциты в том или ином количестве присутствуют в любой мокроте. Большое количество нейтрофилов выявляют в слизисто-гнойной и гнойной мокроте. Эозинофилами богата мокрота при бронхиальной астме, эозинофильной пневмонии, глистных поражениях лёгких, инфаркте лёгкого. Эозинофилы могут появиться в мокроте при туберкулёзе и раке лёгкого. Лимфоциты в большом количестве обнаруживают при коклюше и, реже, при туберкулёзе.
  • Эритроциты. Обнаружение единичных эритроцитов в мокроте диагностического значения не имеет. При наличии свежей крови в мокроте определяют неизменённые эритроциты, если же с мокротой отходит кровь, находившаяся в дыхательных путях в течение длительного времени, обнаруживают выщелоченные эритроциты.
  • Клетки злокачественных опухолей обнаруживают при злокачественных новообразованиях.

Волокна

  • Эластические волокна появляются при распаде ткани лёгкого, который сопровождается разрушением эпителиального слоя и освобождением эластических волокон; их обнаруживают при туберкулёзе, абсцессе, эхинококкозе, новообразованиях в лёгких.
  • Коралловидные волокна выявляют при хронических заболеваниях лёгких, таких как кавернозный туберкулёз.
  • Обызвествлённые эластические волокна - эластические волокна, пропитанные солями кальция. Обнаружение их в мокроте характерно для распада туберкулёзного петрификата.

Спирали, кристаллы

  • Спирали Куршмана образуются при спастическом состоянии бронхов и наличии в них слизи. Во время кашлевого толчка вязкая слизь выбрасывается в просвет более крупного бронха, закручиваясь спиралью. Спирали Куршмана появляются при бронхиальной астме, бронхитах, опухолях лёгких, сдавливающих бронхи.
  • Кристаллы Шарко-Лейдена - продукты распада эозинофилов. Обычно появляются в мокроте, содержащей эозинофилы; характерны для бронхиальной астмы, аллергических состояний, эозинофильных инфильтратов в лёгких, лёгочной двуустки.
  • Кристаллы холестерина появляются при абсцессе, эхинококкозе лёгкого, новообразованиях в лёгких.
  • Кристаллы гематоидина характерны для абсцесса и гангрены лёгкого.
  • Друзы актиномицета выявляют при актиномикозе лёгких.
  • Элементы эхинококка появляются при эхинококкозе лёгких.
  • Пробки Дитриха - комочки желтовато-серого цвета, имеющие неприятный запах. Состоят из детрита, бактерий, жирных кислот, капелек жира. Они характерны для абсцесса лёгкого и бронхоэктатической болезни.
  • Тетрада Эрлиха состоит из четырех элементов: обызвествлённого детрита, обызвествлённых эластических волокон, кристаллов холестерина и микобактерий туберкулёза. Появляется при распаде обызвествлённого первичного туберкулёзного очага.

Мицелий и почкующиеся клетки грибов появляются при грибковых поражениях бронхолёгочной системы.

Пневмоцисты появляются при пневмоцистной пневмонии.

Сферулы грибов выявляют при кокцидиоидомикозе лёгких.

Личинки аскарид выявляют при аскаридозе.

Личинки кишечной угрицы выявляются при стронгилоидозе.

Яйца лёгочной двуустки выявляются при парагонимозе.

Элементы, обнаруживаемые в мокроте при бронхиальной астме. При бронхиальной астме обычно отделяется малое количество слизистой, вязкой мокроты. Макроскопически можно увидеть спирали Куршмана. При микроскопическом исследовании характерно наличие эозинофилов, цилиндрического эпителия, встречаются кристаллы Шарко-Лейдена.

Микроскопия мокроты: что это такое и как проводится

Микроскопическое исследование мокроты является основным методом диагностики туберкулеза легких в странах с низким и средним доходом, где, по статистике, происходит почти 95% случаев туберкулеза и 98% смертей от туберкулеза в мире.

Что такое микроскопия мокроты

Микроскопия мокроты — это простой, быстрый и недорогой метод, который очень помогает врачам при постановке диагноза и назначении правильных препаратов в районах с высокой распространенностью туберкулеза. Он также выявляет наиболее инфекционных пациентов. Следовательно, данный метод является неотъемлемой частью глобальной стратегии борьбы с туберкулезом.

Тем не менее, микроскопия мокроты имеет существенные ограничения по эффективности.

Чувствительность значительно снижается, когда бактериальная нагрузка составляет менее 10 000 организмов / мл в образце мокроты. Она также не слишком эффективна при внелегочном туберкулезе, педиатрическом туберкулезе и у пациентов, инфицированных ВИЧ и туберкулезом одновременно.

Врач может назначить микроскопию мокроты, если считает, что у пациента есть микобактериальная инфекция, грибок или паразит. Микобактерии представляют собой микроорганизмы (их почти 100 известных видов). Наиболее распространенным типом является микробактерия Mycobacterium tuberculosis, которая вызывает туберкулез.

Общие симптомы туберкулеза включают:

  • кашель с кровью или слизью;
  • отсутствие аппетита;
  • потерю веса;
  • усталость;
  • лихорадку;
  • озноб;
  • ночную потливость.

Другим довольно распространенным типом этих бактерий является Mycobacterium leprae, которая вызывает проказу. За исключением двух микроорганизмов, вызывающих туберкулез и проказу, большинство микобактерий существуют в воде и почве во всем мире. Они называются нетуберкулезными микобактериями (НТМ). НТМ можно найти в водопроводной воде, воде в бассейнах и грунтовой почве. Их жесткая, восковая клеточная стенка делает их устойчивыми к антибактериальным средствам.

Хотя НТМ и чрезвычайно широко распространены, большинство людей не болеют по их вине. Однако люди с проблемами иммунитета, такими как СПИД, уязвимы к инфекции. У некоторых людей может быть инфекция без каких-либо симптомов. У других людей есть инфекции, которые вызывают симптомы, похожие на туберкулез. Микроскопия мокроты поможет врачу выяснить, действительно ли у пациента туберкулез или же заболевание вызвано другой микробактерией.

Подготовка к сбору

В ночь перед анализом нужно выпить много жидкости, например, воду или чай.

Это поможет организму произвести больше мокроты.

Сбор утренней мокроты делает тест более точным. Утром в мокроте появляется больше бактерий.

Нельзя есть, пить и курить перед сбором образца мокроты.

Процесс сбора материала

Мокроту собирает либо пациент, либо врач. Если у пациента есть проблемы с откашливанием мокроты, ему может помочь паровая ингаляция.

Для сбора материала для микроскопии мокроты врач даст пациенту стерильную емкость. Не нужно открывать ее до полной готовности собрать пробу.

Чтобы собрать образец мокроты, пациенту нужно сделать следующее:

  • почистить зубы и промыть рот, не используя антисептическую жидкость для полоскания рта;
  • сделать пару длинных глубоких вдохов;
  • начать кашлять, пока не появится мокрота;
  • выплюнуть мокроту в чашку для образца;
  • продолжать откашливать мокроту, пока чашка не будет заполнена до маркера, что составляет приблизительно 1 чайную ложку;
  • закрыть емкость крышкой;
  • написать свое имя, дату рождения и дату сбора мокроты на этикетке емкости;
  • отнести образец в поликлинику или частную лабораторию.

Образец для микроскопии мокроты может быть охлажден в течение 24 часов, если это необходимо. Не нужно замораживать его и не надо хранить при комнатной температуре. Если пациент не может откашлять мокроту, можно попробовать принять горячий душ или подышать над картошкой. Мокрота должна поступать из глубины легких, чтобы тест был точным. Если пациент все еще не может откашлять мокроту, врач сделает бронхоскопию для сбора мокроты непосредственно из легких.

Бронхоскопия — простая процедура, которая занимает от 30 до 60 минут.

  • Врач распылит местный анестетик в нос и горло пациента, чтобы обезболить их.
  • Пациенту может быть дано успокоительное средство, чтобы помочь ему расслабиться. Что касается общей анестезии, то она обычно не требуется для бронхоскопии.
  • Бронхоскоп — мягкая, маленькая трубка с увеличительным стеклом на конце — будет введена через нос или рот в легкие пациента.
  • С помощью бронхоскопа врач может видеть легкие и взять небольшой образец мокроты.
  • Для безопасности нужно, чтобы кто-то отвез пациента домой после данной процедуры.

Не существует рисков, связанных с самостоятельным сбором пробы мокроты. Редкие риски бронхоскопии включают:

  • аллергические реакции на седативные средства;
  • инфекцию;
  • бронхиальное кровотечение;
  • спазмы — внезапное сжатие мышц в бронхиолах;
  • нерегулярный сердечный ритм;
  • пневмоторакс.

При проведении микроскопии мокроты медицинский работник окрашивает специальным красителем клетки образца, а затем промывает их в кислотном растворе.

Затем клетки исследуют под микроскопом. Если клетки в мазке сохраняют краситель, это означает, что в них присутствуют микобактерии.

Микобактерии обычно имеют кислотоустойчивые свойства и удерживаются на красителе при промывании в кислотном растворе.

Также может быть проведен тест на культуру. Образец мокроты помещают в культуральную среду, содержащую питательные вещества. Образцу дают возможность расти при комнатной температуре в течение нескольких дней. Это позволяет увидеть большее количество бактериальных клеток, чтобы подтвердить результаты анализа.

Микроскопия мокроты позволяет обнаружить в образце слизь, клетки, бактерии, грибы волокнистые и кристаллические структуры и паразитов.

В образце мокроты могут присутствовать следующие элементы:

Клетки

  • Альвеолярные макрофаги — при хронических процессах в бронхолегочной системе. Если они содержат пигмент гемосидерин, который состоит из оксида железа, значит есть застой в малом круге кровообращения или же об инфаркт легкого или кровоизлияние в него.
  • Макрофаги, содержащие липидные капли — при воспалительно-дегенеративном процессе в бронхиолах и бронхах.
  • Множество лимфоцитов — при коклюше или туберкулезе.
  • Наличие лейкоцитов нормально для любого образца мокроты.
  • Эритроциты в норме могут присутствовать в единичных количествах. Если в мокроте есть свежая кровь, то в ней будут неизмененные эритроциты, а если кровь долго находилась в дыхательных путях и отошла вместе с мокротой, то анализ выявит выщелоченные эритроциты.
  • Жировые моноциты (макрофаги) — при абсцессе, актиномикозе или эхинококкозе лёгких (одна из стадий развития ленточного глиста).
  • Плоский эпителий — при попадании в образец слюны. Хотя и мокрота и слюна — это нативные (естественные) жидкости организма, но мокрота из глубины легких — это не то же самое, что слюна. Мокрота — это слизь, и она обычно достаточно плотная по консистенции, особенно когда в легких есть инфекция.
  • Цилиндрические клетки мерцательного эпителия — при опухоли в легких, бронхите, бронхиальной астме или трахеите.
  • Эозинофилы — при раке легкого, астме, туберкулезной инфекции, инфаркте легкого, эозинофильной пневмонии и легочных глистных инвазиях.
  • Клетки злокачественных новообразований — при легочной опухоли.
  • При кавернозном туберкулезе и других легочных патологиях в исследуемом образце выявляют коралловидные волокна.
  • Эластические волокна характерны для туберкулеза, абсцесса, новообразований в легких и гельминтоза под названием «эхинококкоз».
  • Обызвествлённые (пропитанные кальциевыми солями) эластические волокна появляются при распаде петрификатов — следов туберкула.
  • Спирали Куршмана — обнаруживаются в мокроте астматиков и на фото выглядят как слизь спиральной формы. Она попадает в мокроту из субэпителиальных слизистых протоков железы или бронхиол.
  • Кристаллы Шарко-Лейдена (на картинках они тонкие и вытянутые) — микроскопические кристаллы, которые есть у людей, страдающих аллергическими заболеваниями, такими как астма или паразитарными инфекциями, такими как паразитическая пневмония или аскаридоз.
  • При гангрене легкого или абсцедирующей пневмонии в мокроте находят буро-красные кристаллы гематоидина.
  • Четырехугольные, бесцветные кристаллы холестерина (ХС) характерны для гнойно-воспалительного ограниченного процесса в легких или эхинококкоза лёгкого.
  • Сросшиеся кристаллы актиномицета появляются при легочном микозном заболевании — актиномикозе.

Если результаты микроскопии мокроты являются нормальными или отрицательными, это означает, что в образце не обнаружены микобактериальные организмы, грибки или паразиты.

Если тест является ненормальным или положительным, это означает, что в образце были найдены микроорганизмы, грибки или глисты.

Не следует путать микроскопическое исследование с макроскопическим. При втором типе исследования специалист изучает цвет, консистенцию, количество, запах, различные включения и слизистость мокроты.

Микроскопическое исследование мокроты

Микроскопическое исследование мокроты позволяет обнаружить слизь, клеточные элементы, волокнистые и кристаллические образования, грибы, бактерии и паразиты.

Клетки

■ Альвеолярные макрофаги — клетки ретикулогистиоцитарного происхождения. Большое количество макрофагов в мокроте выявляют при хронических процессах и на стадии разрешения острых процессов в бронхолёгочной системе. Альвеолярные макрофаги, содержащие ге-мосидерин («клетки сердечных пороков»), выявляют при инфаркте лёгкого, кровоизлиянии, застое в малом кругу кровообращения. Макрофаги с липидными каплями — признак обструктивного процесса в бронхах и бронхиолах.

■ Ксантомные клетки (жировые макрофаги) обнаруживают при абсцессе, актиномикозе, эхинококкозе лёгких.

■ Клетки цилиндрического мерцательного эпителия — клетки слизистой оболочки гортани, трахеи и бронхов; их обнаруживают при бронхитах, трахеитах, бронхиальной астме, злокачественных новообразованиях лёгких.

■ Плоский эпителий обнаруживают при попадании в мокроту слюны, он не имеет диагностического значения.

■ Лейкоциты в том или ином количестве присутствуют в любой мокроте. Большое количество нейтрофилов выявляют в слизисто-гнойной и гнойной мокроте. Эозинофилами богата мокрота при бронхиальной астме, эозинофильной пневмонии, глистных поражениях лёгких, инфаркте лёгкого. Эозинофилы могут появиться в мокроте при туберкулёзе и раке лёгкого. Лимфоциты в большом количестве обнаруживают при коклюше и, реже, при туберкулёзе.

■ Эритроциты. Обнаружение единичных эритроцитов в мокроте диагностического значения не имеет. При наличии свежей крови в мокроте определяют неизменённые эритроциты, если же с мокротой отходит кровь, находившаяся в дыхательных путях в течение длительного времени, обнаруживают выщелоченные эритроциты.

■ Клетки злокачественных опухолей обнаруживают при злокачественных новообразованиях.

Волокна

■ Эластические волокна появляются при распаде ткани лёгкого, который сопровождается разрушением эпителиального слоя и освобождением эластических волокон; их обнаруживают при туберкулёзе, абсцессе, эхинококкозе, новообразованиях в лёгких.

■ Коралловидные волокна выявляют при хронических заболеваниях лёгких, таких как кавернозный туберкулёз.

■ Обызвествлённые эластические волокна — эластические волокна, пропитанные солями кальция. Обнаружение их в мокроте характерно для распада туберкулёзного петрификата.

Спирали, кристаллы

■ Спирали Куршмана образуются при спастическом состоянии бронхов и наличии в них слизи. Во время кашлевого толчка вязкая слизь выбрасывается в просвет более крупного бронха, закручиваясь спиралью. Спирали Куршмана появляются при бронхиальной астме, бронхитах, опухолях лёгких, сдавливающих бронхи.

■ Кристаллы Шарко-Лейдена — продукты распада эозинофилов. Обычно появляются в мокроте, содержащей эозинофилы; характерны для бронхиальной астмы, аллергических состояний, эозинофильных инфильтратов в лёгких, лёгочной двуустки.

■ Кристаллы ХС появляются при абсцессе, эхинококкозе лёгкого, новообразованиях в лёгких.

■ Кристаллы гематоидина характерны для абсцесса и гангрены лёгкого.

■ Друзы актиномицета выявляют при актиномикозе лёгких.

■ Элементы эхинококка появляются при эхинококкозе лёгких.

■ Пробки Дитриха — комочки желтовато-серого цвета, имеющие неприятный запах. Состоят из детрита, бактерий, жирных кислот, капелек жира. Они характерны для абсцесса лёгкого и бронхоэктатической болезни.

■ Тетрада Эрлиха состоит из четырех элементов: обызвествлённого детрита, обызвествлённых эластических волокон, кристаллов ХС и микобак-терий туберкулёза. Появляется при распаде обызвествлённого первичного туберкулёзного очага.

Мицелий и почкующиеся клетки грибов появляются при грибковых поражениях бронхолёгочной системы.

Пневмоцисты появляются при пневмоцистной пневмонии.

Сферулы грибов выявляют при кокцидиоидомикозе лёгких.

Личинки аскарид выявляют при аскаридозе.

Личинки кишечной угрицы выявляются при стронгилоидозе.

Яйца лёгочной двуустки выявляются при парагонимозе.

Элементы, обнаруживаемые в мокроте при бронхиальной астме. При бронхиальной астме обычно отделяется малое количество слизистой, вязкой мокроты. Макроскопически можно увидеть спирали Куршмана. При микроскопическом исследовании характерно наличие эозинофилов, цилиндрического эпителия, встречаются кристаллы Шарко-Лейдена.

Похожие статьи


Смотрите также