Диагностическая лаборатория в Уфе
Как сдавать мазок на коклюш
Анализ на коклюш, как сдавать?
Заразные болезни с воздушно-капельным механизмом передачи широко распространены среди людей различных возрастов. Особое место занимают так называемые детские инфекции. Среди них есть и такие, которые создают серьезные риски для ребенка, например, коклюш. И крайне важно вовремя выявить патологию, в чем сильно помогают лабораторные методы исследования. Анализ на коклюш и паракоклюш становится определяющим в постановке правильного диагноза.
Общие сведения
Еще до недавнего времени коклюш считался очень опасной инфекцией. Но даже на современном уровне развития медицины он может протекать довольно тяжело. Болеют в основном дети, заражаясь от сверстников. Возбудитель инфекции – бактерия Bordetella pertussis, целью которой является поражение дыхательных путей. Основным симптомом коклюша считается сильный приступообразный кашель, принимающий характер спазматического. Он беспокоит чаще всего вечером и ночью, а при прогрессировании болезни – и днем. Во время кашля ребенку трудно вдохнуть, его лицо краснеет и даже синеет, отекает, расширяются сосуды конъюнктивы. Приступ обычно заканчивается отхождением стекловидной мокроты или рвотой.
Коварство инфекции заключается в том, что она начинается как обычная простуда. Незначительное покашливание зачастую даже не сопровождается повышением температуры, общее состояние детей не страдает. Но затем приступы становятся все тяжелее. Усугубляют ситуацию токсины, выделяемые бактерией в кровь. Они могут привести к поражению головного мозга (гипоксическая энцефалопатия). Осложнениями коклюша также становятся: легочное сердце и ателектаз, конъюнктивальные кровоизлияния, инсульт. Из-за сниженного иммунитета может присоединиться вторичная инфекция (пневмония).
Паракоклюш вызывается другой, но очень схожей бактерией (Bordetella parapertussis). Поэтому она вызывает практически те же симптомы. Болезнь протекает в более легкой форме, но также характеризуется приступами сухого кашля, иногда рвотой и затруднением дыхания. Поэтому у детей параллельно выполняют анализ и на паракоклюш.
Показания
Причиной для назначения лабораторных анализов является не только подозрение на коклюш или паракоклюш. Исследование также показано детям с приступообразным кашлем, болеющим на протяжении 7 дней, тем, у кого наблюдаются эпизоды апноэ (остановки дыхания) или одышки, при сохранении симптомов более двух недель. Взятие биоматериала производится и по эпидемическим показаниям у пациентов, контактировавших с больным ребенком.
Проведение
При подозрении на коклюш или паракоклюш диагноз не может быть поставлен лишь на основании клинических данных. Поэтому выполняют различные лабораторные исследования. К наиболее распространенным относятся:
- Общий анализ крови.
- Мазок из носоглотки (микроскопия, посев).
- Серологический анализ.
- Молекулярно-генетический метод.
Каждое исследование имеет определенные особенности, требующие отдельного рассмотрения. Какой анализ нужно сдавать пациенту, скажет врач. Специалист проведет клиническое обследование и делает предварительное заключение, на основании которого проводится дальнейшая диагностика. Он выдает направление на лабораторные тесты.
Целесообразность анализов и их объем определяется врачом. Диагностику необходимо пройти в кратчайшие сроки, поскольку от ее результатов всецело зависит лечение.
Общий анализ крови
Для проведения общего анализа пациент приходит в лабораторию натощак. Другой подготовки не требуется. Кровь берется из пальца в тонкую стеклянную трубочку-капилляр. Затем медработник подсчитывает количество форменных элементов, гемоглобина, определяет СОЭ и цветной показатель. Срок выполнения составляет 1 сутки. Безусловно, это неспецифический анализ, который проводят при многих заболеваниях.
Мазок из носоглотки
Важным анализом на коклюш у детей является мазок из носоглотки. Он позволяет оценить клеточный состав слизи и выявить в ней патогенные микробы. Перед взятием биоматериала не рекомендуют:
- Полоскать горло, чистить зубы.
- Принимать антибиотики, закапывать нос.
- Сильно высмаркиваться.
- За 2–3 часа принимать пищу и пить воду.
Исследование проводится на ранних сроках болезни (не позже 3 недель с момента начала), в противном случае результаты могут быть ложноотрицательными. Мазок берется стерильным тупфером – ватным тампоном на длинной палочке – отдельно из носа и горла. Ребенку следует широко приоткрыть рот и немного запрокинуть голову назад. Одним тупфером проводят по задней стенке глотки и миндалинам, а другой вводят в носовые ходы. Тампоны помещаются в пробирки со специальной транспортировочной средой, которая будет поддерживать жизнедеятельность бактерий.
Для цитологии материал наносится на предметное стекло, фиксируется и окрашивается по Грамму. Затем картина описывается под микроскопом. А вот бакпосев – это более длительный анализ. Возбудителю коклюша нужна специфическая питательная среда (кровяной агар). На нее засевается слизь из носоглотки, а затем все инкубируется в термостате. Появившиеся колонии микробов оценивают морфологически и функционально (ферментативная активность, скорость роста).
Материала от пациента можно получить и по-другому – методом «кашлевых пластинок». Тогда открытую чашку Петри с питательной средой подносят к больному ребенку. И в момент кашля слизь сама попадает на нее. Это позволяет исключить этапы взятия мазка и рассевания.
Серологический анализ
Серологическая диагностика коклюша основана на определении антител к возбудителю. Анализ крови на коклюш включает идентификацию в плазме различных классов иммуноглобулинов (A, M, G). Каждый из них показывает, насколько сильно идет защитная реакция со стороны организма. Антитела класса А являются секреторными, они обеспечивают местную защиту слизистых оболочек. Иммуноглобулин M начинает вырабатываться уже спустя 10–14 дней от момента инфицирования. А вот антитела класса G продуцируются значительно позже (через 3–4 недели). Кровь для анализа берется у ребенка из вены натощак.
Детекция антител производится методом иммуноферментного анализа (ИФА). В его основе лежит специфическая реакция между антигеном и антителом. Сыворотку, полученную от пациента, по капле помещают в ячейки иммунологического планшета, в которых уже есть стандартные антигены к Bordetella pertussis. Затем в образовавшийся комплекс подмешивают антитела к иммуноглобулинам, меченные специальным ферментом. Последний при обнаружении гомологичных молекул расщепляет бесцветное вещество (хромоген), придавая раствору в ячейках окраску. Ее интенсивность как раз и определяется количеством антител в крови пациента. Подсчет концентрации происходит в фотометрических анализаторах.
Серологический метод является очень распространенным исследованием, позволяющим определить антитела к инфекционным болезням.
Молекулярно-генетический метод
Метод полимеразной цепной реакции – еще один анализ, проводимый при коклюше. Он основывается на определении генетического материала (ДНК) бактерии-возбудителя. Для этого анализа берется соскоб из ротоглотки: стерильным тупфером проводят по слизистой оболочке. В лаборатории к биоматериалу добавляются специальные вещества (праймеры, ферменты), которые позволяют многократно копировать фрагменты нуклеиновых кислот. Все это происходит в приборе под названием амплификатор. Он же оборудован и детектором для идентификации генетических цепей микроорганизмов. ПЦР диагностика коклюша – наиболее сложный, но в то же время и самый чувствительный метод, многократно повышающий достоверность анализов.
Результаты
После того как кровь на коклюш или мазки слизи сданы, придется подождать результатов. Время, необходимое для проведения каждого исследования, отличается. Например, если для общего анализа крови и микроскопии требуются всего сутки, то для других тестов нужно больше времени. При этом следует учитывать, что день, в который сдаются пробы, обычно не учитывается. Но в экстренных случаях все производится, конечно, быстрее.
Каждый анализ может показать, что в организме присутствует возбудитель коклюша и паракоклюша. Только одни более специфичны, а другие – менее. Результаты выдаются лабораторией на специальном бланке, где указаны фактические значения и референсные. Поэтому, сравнив их, можно сделать предположение о происхождении изменений в организме. Но следует учитывать, что расшифровка результатов производится только врачом.
Общий анализ крови
Наименьшей специфичностью обладает клинический анализ крови при коклюше у детей. В нем отмечается уменьшение числа лейкоцитов (лейкопения), относительное повышение лимфоцитов. СОЭ не реагирует или немного падает. Такая картина характерна для катаральной стадии заболевания. Следует учитывать, что степень изменений пропорциональна тяжести состояния. У пациентов со стертыми формами болезни, привитых или в период выздоровления все может быть в пределах нормы.
Мазок из носоглотки
Микроскопически Bordetella pertussis выглядит как грамотрицательная (розовая) палочка. Но чтобы сказать точно, нужно посмотреть на результаты посева. На питательной среде она растет в форме мелких круглых колоний с блестящей поверхностью, образуя зону гемолиза. Ферментативной активностью не обладает. Выявление роста говорит о позитивном анализе и подтверждает коклюш. Дополнительно оценивается чувствительность бактерии к наиболее распространенным антибиотикам.
Получение чистой культуры коклюшных палочек свидетельствует о болезни ребенка и требует соответствующего реагирования со стороны врача.
Серологический анализ
Определение антител к возбудителю инфекции – метод с довольно высокой специфичностью. Но расшифровка анализа на коклюш зависит от времени взятия биоматериала, продолжительности болезни и состояния общего иммунитета. Есть два метода определения иммуноглобулинов: качественный и количественный. При первом результат содержит лишь слова «отрицательно», «положительно» или «сомнительно». А во втором случае есть цифры, указывающие, сколько именно антител выявлено в крови пациента. Зачастую они написаны в анализе вместе. Но в лабораториях используют различные реагенты и тест-системы, поэтому назвать конкретные цифры сложно. Например, при использовании анализаторов EUROIMMUN (Германия) верхние границы нормы следующие (таблица):
Поэтому, когда в анализе IgM превышают 0,8, а IgG уже 40, то результат положителен, а инфекция однозначно есть. В более общем виде диагностическими критериями коклюша при ИФА будут:
- У взрослых и привитых детей: увеличение в 4 и более раз IgG и IgA.
- У детей, не привитых от болезни: даже однократное обнаружение любых антител.
Следует понимать, что при выявлении иммуноглобулинов М коклюш находится в острой фазе (активная инфекции), но это же свидетельствует и о недавней вакцинации. Антитела класса G указывают на продолжительность текущей болезни, перенесенную в прошлом патологию или сформированную защиту после активной иммунизации. А секреторные IgA говорят о том, что ребенок на момент проведения анализа болен коклюшем. В сомнительных случаях необходимо сделать повторное исследование. Если он окажется отрицательным, то и повода для переживаний не будет.
Молекулярно-генетический метод
Результат ПЦР-диагностики является наиболее чувствительным и специфичным. Он может быть либо положительным, либо отрицательным. В первом случае выявлен генетический материал Bordetella pertussis (parapertussis), что однозначно свидетельствует о заболевании. Но и во втором случае исключать такую вероятность нельзя, ведь в исследуемом биоматериале просто могло не оказаться бактерий или их ДНК было меньше, чем положено для выполнения анализа. Поэтому большую роль играет правильное взятие слизи.
Выбор лаборатории
Многих интересует вопрос, где сдать анализ на коклюш. Но выбор лаборатории может оказаться довольно непростым занятием. Как видим, каждое исследование имеет массу нюансов и для получения достоверного результата важно соблюдение различных условий: техники и времени взятия материала, правил его хранения и транспортировки, подготовки к анализу. В крупных и сетевых лабораториях (например, в Инвитро) эти процессы четко отлажены и контролируются. Поэтому следует внимательно отнестись к указанному вопросу, ведь от него может зависеть точность диагноза.
Несмотря на повсеместную вакцинацию, случаи коклюша не являются редкостью. Но выявить и подтвердить заболевание можно лишь лабораторными методами, которые прямо или косвенно укажут на присутствие возбудителя в организме ребенка. К проведению анализов следует отнестись со всей серьезностью, ведь их результаты однозначно повлияют на дальнейшее лечение.
Как сдавать анализ на коклюш и паракоклюш у детей
Коклюш – это детское заболевание, для которого характерен судорожный кашель. Болезнь часто протекает в скрытых или атипичных формах. Поэтому своевременная и точная диагностика затруднительна. Среди людей существует мнение о том, что паракоклюш является следствием или осложнением коклюша. Однако это утверждение ошибочно. Паракоклюш – это инфекционная болезнь, которой дети болеют гораздо меньше. Невозможно при сборе анамнеза идентифицировать эти болезни. Поэтому маленьким пациентам назначают анализ на коклюш и паракоклюш, который включает обширное лабораторное исследование.
Заболевания вызывают патогенные микроорганизмы – специфические бактерии – коклюшная и паракоклюшная палочки, палочка Борде-Жангу. Коклюш – это распространенное заболевание, ежегодно фиксируется 60 миллионов случаев, из которых более полмиллиона приводят к летальному исходу. Поэтому своевременная диагностика крайне важна.
Бактериологические исследования
Окончательный диагноз утверждается только на основе бактериологического анализа, при котором выделяют самого возбудителя. Результативность исследования зависят от периода заболевания. Чем раньше сдать анализ, тем больше шансов обнаружить палочку.
На разных этапах болезни бактериологические показатели отличаются. Первые 7 дней заболевания анализ положительный у 95% пациентов, на 2-3 неделе этот показатель составляет 65-75%. К концу первого месяца заболевания палочка обнаруживается у каждого второго ребенка. После 5-й недели болезни результаты отрицательные.
Взятие мазка
Мазок на коклюш – это бактериологическое исследование отделяемого слизистой носоглотки. Забор материала делают исключительно натощак или через 2 часа после еды и тщательного полоскания горла.
Техника взятия слизи и приготовления мазка:
- для правильного забора материала использую стерильный марлевый или ватный тампон, предварительно намотанный на железную или деревянную палочку;
- тампон перед анализом смачивают в физрастворе и помещают в пробирку;
- больному в положении сидя или лежа вводят тампон в ротовую полость так, чтобы он не касался внутренней поверхности губ, языка, зубов;
- аккуратно собирают серозно-гнойный налет и слизь на миндалинах, небе, задней стенке носоглотки;
- для точной результативности налет лучше снимать в местах, где проходит граница между здоровой и пораженной тканью;
- взятый материал наносят на лабораторное стекло, маркируют, высушивают и отправляют в лабораторию для дальнейшего исследования.
У детей также могут брать материал методом «кашлевых пластинок». Во время кашля ко рту ребенка подносят чашку Петри со специальной питательной средой на расстояние 10 см от ротовой полости. Материал стараются уловить при кашле, достаточно 5-6 кашлевых толчков. После чашку быстро закрывают герметичной крышкой и помещают в термостат с постоянной температурой 37°C.
Посев на коклюш и паракоклюш является золотым стандартом в диагностике этого заболевания. Он наиболее информативен в катаральный (острый период), в первые дни заболевания. Сама процедура при сдаче материала не вызывает дискомфорта или болевых ощущений как во время проведения, так и после забора материала. Однако маленькие дети часто сопротивляются. В этом случае необходима помощь другого медицинского работника или родителей для фиксации малыша.
Серологические методы исследования
Анализ крови на коклюш и паракоклюш для серологического исследования назначают тем пациентам, которые болеют не менее 3 недель. За это время в крови ребенка вырабатываются антитела, которые и необходимо обнаружить при исследовании. На ранних стадиях болезни этот метод не информативен.
ПЦР – полимеразную цепную реакцию при коклюше назначают чаще всего, так как ее результаты наиболее точные. Для исследования собирают мокроту. Анализ на определение антител к коклюшу проводится на автоматизированном оборудовании. Результаты оцениваются согласно нарастанию титров специфических антител к возбудителю. Анализы проводят несколько раз. Чем дольше человек болеет, тем титры продолжают увеличиваться, несмотря на угасание симптомов. Повторные анализы делают с интервалом 5-7 дней.
ИФА – иммуноферментный анализ крови при коклюше у детей. Его главная цель – обнаружение иммуноглобулинов М (IgM). Это антитела, которые первыми реагируют на появление коклюшной палочки. Они обеспечивают дальнейшую защиту всего организма от внедренной инфекции.
Правила забора крови у детей:
- Сдавать кровь нужно натощак, лучше с утра, через 12 часов после последнего приема пищи. В это время можно пить воду. Если ребенок грудного возраста, кормления разрешаются.
- Кровь берут из вены путем пункции. Прием лекарств перед анализом может дать ложный результат.
- Кровь берут в стерильную пробирку (пустую или с гелем).
- После того как ребенок сдал анализ, можно возвращаться к обычному режиму дня и приему лекарств.
РПГА – реакция пассивной гемагглютинации. Этот метод определяет не только титры к антителам, он также позволяет выяснить чувствительность организма к антибактериальным препаратам и правильно подобрать лекарственные средства индивидуально каждому ребенку. Кровь также сдается натощак из локтевой вены.
Анализ обладает высокой специфичностью, поэтому его часто назначают для определения бактериальной инфекции. При попадании микроба в организм, как иммунный ответ формируются антитела, которые адсорбируются на поверхности эритроцитов. При исследовании добавляют специальную сыворотку, которая приводит к их агглютинации (склеиванию). Эта реакция позволяет опровергнуть или подтвердить наличие возбудителя в организме.
При исследовании определяют количество эритроцитов, выпавших в осадок. Результат предоставляют в виде титров антител.
Общие клинические анализы
При коклюше и паракоклюше, как при любых инфекционно-воспалительных заболеваниях, назначают общее клиническое исследование крови.
Основные показатели крови, такие как эритроциты, тромбоциты, гемоглобин, СОЭ (скорость оседания эритроцитов) без особых изменений.
В острый период заболевания могут быть повышены лейкоциты и лимфоциты.
Время взятия общего анализа крови при коклюше значение не имеет. Прием пищи или лекарств не влияет на лейкоцитарную формулу и количественный состав компонентов крови.
Клиническое исследование крови не является основополагающим в постановке диагноза при коклюше.
Дифференциальная диагностика коклюша
Перед тем как назначить лабораторные исследования, нужно собрать анамнез, который позволит составить картину о симптомах и течении болезни. Коклюш важно дифференцировать и исключить такие заболевания:
- ОРВИ, грипп;
- паракоклюш;
- бронхит;
- пневмония.
Первые симптомы коклюша напоминают начало развития многих респираторных болезней – повышение температуры тела до 38-38,5 °C, общее недомогание, кашель разной интенсивности.
При коклюше не бывает обильных выделений из носа (ринит) и откашливающей мокроты. Это связано с тем, что возбудитель поражает не слизистую дыхательных путей, а кашлевой центр в головном мозге. Поэтому при коклюше не бывает обструкции бронхов и легких (закупорка просвета слизью).
Родители часто самостоятельно приобретают и дают детям муколитические сиропы или таблетки (отхаркивающие средства), которые при длительном применении не дают никакого результата. Динамики в кашлевом процессе не наблюдается.
Разобраться в симптоматике и поставить точный диагноз может только врач, основываясь на признаках и результатах анализов из лаборатории.
Коклюш носит эпидемический характер, и при его вспышке случаи заболевания фиксируются часто.
Коклюш у детей протекает тяжело. Кашель проходит болезненно, с пересыханием и надрывами кожи уголков рта. Самостоятельное лечение не дает никаких результатов. Чтобы избежать осложнений заболеваний, необходимо при первых признаках кашля вызвать педиатра и далее выполнять все его инструкции и рекомендации, касательно диагностики и лечения. Наилучшая профилактика коклюша – своевременная вакцинация. Каждый ребенок должен быть привит согласно календарю прививок. Обычно это дети первого года жизни. Прививки делаются с интервалом месяц, трехкратно. Это снижает риск заражения коклюшем.
Как проводится лабораторная диагностика (анализы) коклюша и паракоклюша?
Характерные приступы судорожного кашля с протяжными выдохами не всегда присутствуют у детей, получивших прививки, например, АКДС. Поэтому врачи и родители рассчитывают, что анализ на коклюш расставит все точки над «и». Заразная болезнь особенно тяжело протекает у детей первого года жизни. Инкубационный период составляет в среднем 1–2 недели, начальные симптомы напоминают ОРВИ.
Биологические особенности бактерий, вызывающих коклюш и паракоклюш
Род Bordetella объединяет 9 видов бактерий, из которых сильными патогенными свойствами обладают B. pertussis и B. parapertussis — соответственно возбудитель коклюша и паракоклюша (коклюшеподобной инфекции). Это грамотрицательные, аэробные коккобациллы. Патогенные свойства B. pertussis связаны с выделением коклюшного токсина белковой природы. Токсичные вещества бактерий в инактивированной форме включают в состав коклюшных вакцин.
Оптимальная температура выращивания культуры бордетеллы при бактериологическом посеве составляет 35°C. Возбудитель коклюша размножается на специальной среде картофельно-глицеринового либо казеиново-угольного агара. Через несколько дней возникают колонии, имеющие выпуклую форму, с серебристой поверхностью. По мере хранения выделенных штаммов проявляется изменчивость, прежде всего, меняются иммуногенные свойства возбудителя.
В каких случаях назначают лабораторные исследования
Перед тем, как сдавать анализ на коклюш, необходимо учесть, что симптомы интоксикации не проявляются сразу же после заражения. Затем усиливается ночью и по утрам приступообразный кашель. Лицо больного ребенка краснеет, периодически возникают характерные для коклюша вдохи. Завершается такой приступ отхождением вязкой мокроты либо рвотой.
Периодичность течения заболевания
| Инкубационный | От дней до 14 суток (в среднем — одна неделя) | - |
| Предсудорожный | От трех дней до двух недель | Сухой навязчивый кашель. Температура нормальная |
| Судорожный | От двух недель до двух месяцев и более | Характерные шумные вдохи во время судорожного кашля. Отхождение мокроты или рвота после приступа |
| Обратное развитие | От двух недель до двух месяцев | Кашель становится редким. Самочувствие ребенка улучшается |
| Поздняя реконвалесценция (выздоровление) | От двух до шести месяцев | Приступообразный кашель возникает только при нагрузках, волнении, других заболеваниях |
Лабораторный посев и ПЦР-исследование обычно назначают в предсудорожном периоде, когда еще нет специфических вдохов при кашле. Учитываются при этом такие диагностические признаки коклюша, как непосредственные контакты с больным человеком в детском саду, школе или семье. Врач, направляя ребенка на бактериологический посев и ПЦР, также смотрит на результаты общего анализа крови.
Читайте также: Инфекционный мононуклеоз — вызов иммунной системе детей
Лабораторная диагностика коклюшной инфекции у детей
Врачи выбирают алгоритм исследования в зависимости от возраста маленького пациента, длительности проявления симптомов заболевания, вакцинального статуса. Основной метод лабораторной диагностики — бактериологический анализ на коклюш и паракоклюш. Флюорографию назначают для исключения заболевания с похожими симптомами (острый бронхит, воспаление легких, плеврит).
Специалист в первую очередь обращает внимание на клиническую картину при осмотре ребенка, опрашивает родителей. Врач назначает исследования, способные подтвердить диагноз, при отсутствии явных симптомов заболевания. Ценный материал для педиатра дает результат анализа на коклюш в «Инвитро» (диагностическом центре). Высокий уровень лабораторной диагностики позволят определить степень тяжести заболевания, выявить осложнения инфекции.
От правильного определения примерного срока инфицирования зависит выбор специалистами лабораторных тестов.
Какие анализы сдавать для диагностики возбудителя коклюша и паракоклюшной инфекции
- Мазок из глотки — позволяет выделить культуру бактерий с помощью микробиологического посева.
- Иммуноферментный анализ крови — метод ИФА для определения антигенов и антител.
- Полимеразная цепная реакция — тест ПЦР для выделения ДНК возбудителя.
Примерная схема лабораторной диагностики коклюша и паракоклюша
| Категории | Без лечения антибиотиком | На фоне антибиотика | Без лечения антибиотиком | На фоне антибиотика | Без лечения/с лечением |
| Непривитые дети до 1 года | Бак. посев, метод ПЦР | ПЦР | Бак. посев, метод ПЦР | ПЦР, серология | Серология |
| Непривитые дети старше 1 года | Бак. посев, метод ПЦР | ПЦР | ПЦР, серология, бак. посев | Серология | Серология |
| Привитые дети, подростки | Метод ПЦР, бак. посев | ПЦР | ПЦР, серология | Серология | Серология |
Получение результата бактериального посева занимает несколько дней. Между тем, экспресс-тест ПЦР дает возможность расшифровать диагноз спустя всего несколько часов. Информативность вышеперечисленных методов диагностики выше у невакцинированных детей. После четырех недель прямые тесты уже не столь эффективны для выделения и определения возбудителя коклюша. Серология позволяет уточнить картину в поздние периоды заболевания даже у ранее вакцинированных детей.
Бактериологическое исследование
Медперсонал берет мазок у детей с задней стенки глотки, далее высевает на питательную смесь в специальных лабораторных емкостях, где происходит развитие микробов в течение нескольких дней. Готовый материал тщательно изучается под микроскопом, чтобы выделить колонии B. pertussis или B. parapertussis. Бактериологическое исследование рассчитано на то, что в начале заболевания бактерии находятся в глотке и носовой полости.
Бактериологический посев считается «золотым стандартом» диагностики коклюшной инфекции у детей.
Микробиологический посев с последующим микроскопическим исследованием при коклюше позволяет диагностировать либо исключить инфекцию. Если результаты анализа положительные, то необходимо начать адекватное лечение и профилактику осложнений. Однако бактериологическое исследование малодостоверно на фоне терапии антибактериальными средствами.
Забор материала тампоном из глотки доставляет незначительный дискомфорт взрослому, но малыши обычно сопротивляются и капризничают. Для такого случая предусмотрен вариант забора слизи для исследования из носа. Перед тем, как сдать анализ, рекомендуется не полоскать горло, не чистить зубы, не закапывать лекарства в нос. Необходимо, чтобы в глотке и в носовой полости накопилась мокрота с возбудителем заболевания.
ПЦР и серология при коклюше
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — исследование бактериальной ДНК. Метод ПЦР позволяет диагностировать коклюш на молекулярно-генетическом уровне. Биологический материал получают при заборе мокроты больного коклюшем. Метод полимеразной цепной реакции часто используют при отрицательных результатах бактериологического исследования.
Лабораторный иммуноферментный анализ подходит для периода заболевания, когда в организме уже вырабатываются антитела. Методика ИФА основывается на качественном определении антигенов и специфических антител в кровяной плазме. Наличие иммуноглобулинов М характерно для самого заболевания, а иммуноглобулины G циркулируют в крови уже после перенесенной инфекции.
Если антител к антигенам возбудителя в анализе крови на коклюш не обнаружат, то ребенок не болен и не перенес инфекцию ранее.
Серологический тест может назначаться для ретроспективной диагностики коклюша, выявления очага инфекции и предупреждения ее распространения. Расшифровка результата покажет в крови больных и переболевших детей повышение уровней специфических иммуноглобулинов М и G к токсинам бактерий Bordetella.
Общий анализ крови при коклюше указывает на наличие либо отсутствие воспалительного процесса в организме ребенка. Заболевание коклюшем можно заподозрить при повышенном количестве лимфоцитов и лейкоцитов, при этом показатели СОЭ будут в норме. Врачи рекомендуют сдавать кровь на анализ в утренние часы, перед завтраком.
Лечение коклюша в РФ включено в программу ОМС, в государственных медучреждениях проводят все необходимые мероприятия. Альтернативная возможность обследования — обращение в диагностические центры «Инвитро». Врач-консультант лаборатории объяснит назначение каждого анализа, даст его подробную расшифровку.
Как проводится лабораторная диагностика (анализы) коклюша и паракоклюша? обновлено: Май 17, 2016 автором: admin
Какой анализ сдают на коклюш?
Анализ на коклюш позволяет выявить наличие в организме возбудителя заболевания, если в постановке диагноза существует сомнение. Выделяют несколько методик, помогающих зафиксировать в организме коклюшную палочку. Это делает диагностику полноценной, что способствует правильному назначению терапии.
Биологические особенности возбудителя патологии
Коклюш провоцируется коклюшной палочкой, относящейся к роду Бордетелла. Бактерии имеют овальную форму без жгутиков. Не поражают клетки-мишени и не способны жить вне человеческого организма. Путь передачи – воздушно-капельный. Бактерии распространяются при сильном кашле или чихании от больного человека к здоровому.
Входными воротами для коклюшной палочки является слизистая оболочка носоглотки, где бактерии активизируются. Инкубационный период протекает без видимых симптомов. Характерный приступообразный кашель развивается только при масштабном поражении организма инфекцией.
Патогенные микроорганизмы вырабатывают токсины, которые разносятся вместе с током крови ко всем тканям и органам, нарушая обменные процессы в них. Поражается нервная система, что чревато развитием ряда осложнений, особенно в детском возрасте.
Диагностировать коклюш по приступообразному кашлю можно лишь тогда, когда от момента заражения прошло не менее 20-25 дней. Клинический анализ крови и бактериологическое исследование мазка из горла дают более информативные показатели, позволяя начинать лечение болезни еще до того момента, как разовьются основные ее признаки.
Показание к исследованию и значение своевременной диагностики заболевания
Обследование на наличие коклюшной инфекции показано, если:
- В коллективе были обнаружены вспышки заболевания, но видимых симптомов коклюша в данный момент нет.
- Затяжной кашель в виде приступов (непродуктивный), который возникает преимущественно в ночное время суток и не исчезает при употреблении медикаментов.
- Наличие хронических заболеваний органов дыхания, которые на фоне ослабленного иммунитета постоянно обостряются.
Анализ на коклюш стоит сдать при затяжном кашлеНачальные этапы заболевания могут протекать с незначительным увеличением температуры. Если другие признаки респираторного заболевания отсутствуют, есть смысл сдать анализ на коклюш.
Виды анализов
Определить наличие коклюша в организме, особенно, если от момента инфицирования прошло менее 10 дней, крайне сложно. Для этих целей используют бактериологическое исследование мазка из горла, исследование крови на наличие антигенов коклюша, а также выявление ДНК-молекул возбудителя.
Бактериологическое исследование
Процедура предполагает забор мазка и культивирование микрофлоры на питательных средах в условиях лаборатории. Анализ информативен, если забор материала осуществляется на 5-10 день заболевания. В противном случае высока вероятность получения ложноотрицательных показателей, что связано с активизацией местного иммунитета.
На достоверность результатов влияет антибиотикотерапия. Исследование производят до ее назначения. Наиболее эффективны двойные тесты, когда анализ сдают с интервалом в 3-5 дней.
С помощью ватной палочки или стерильного шпателя из горла берут небольшой мазок, который помещают на питательную среду в чашу Петри. Через определенное время содержимое чаши исследуют под микроскопом, оценивая количественный и качественный состав микрофлоры горла.
Первые признаки коклюшной инфекции проявляются на 2-3 сутки, когда при исследовании содержимого чаши Петри визуализируются палочки. Заключительный результат можно получить на 5 сутки.
Анализ крови на наличие антител
Этот вариант диагностики является наиболее информативным, так как помогает оценить наличие палочек непосредственно в крови, а не на определенном участке тела. Суть методики заключается в выделении антител к коклюшу, которые проявляются в крови при попадании бактерий в организм. Внимание обращают на следующие титры антител:
- Иммуноглобулины группы М – появляются в крови самые первые, как только иммунитет активизируется и начинает активно бороться с возбудителем коклюша. Визуализируются в крови со 2 недели после инфицирования.
- Иммуноглобулины группы А – указывают на наличие нагрузки на иммунитет и развитие воспалительного процесса. Появляются со 2-3 недели.
- Иммуноглобулины группы G – являются наиболее точными показателями наличия коклюша в крови. Вырабатываются иммунными клетками с 3 недели после заражения.
Анализ крови на наличие антител — один из анализов на коклюшЕсли предварительная вакцинация отсутствует, а уровень иммуноглобулинов стремительно растет, то заболевание подтверждается. Для получения более информативного результата тест методом ИФА осуществляют трижды, с интервалом в 10-12 дней.
Исследование крови методом ПЦР
Эффективность этого анализа проявляется, если коклюш в крови находится не более 3 недель. Суть исследования заключается в осуществлении соскоба с задней стенки горла и исследование его методом полимеразной цепной реакции, в результате которой удается вычленить фрагменты ДНК коклюшной палочки.
Перед взятием соскоба рекомендовано сутки не чистить зубы, не употреблять горячую и холодную пищу, а также отказаться от приема подкисленных напитков.
Постановка диагноза осуществляется на основании всех 3 лабораторных исследований. Некоторые анализы могут быть малоинформативными или давать ложноотрицательный результат, поэтому к забору материала на обследование нужно предварительно готовиться.
Подготовка
Перед забором крови необходимо придерживаться следующих правил:
- Кровь сдавать натощак в первой половине дня.
- Отказаться от употребления жареных, жирных, соленых и сладких блюд за 2-3 дня до проведения исследования.
- Хорошо выспаться и отдохнуть накануне.
- Ограничить физические нагрузки.
При исследовании мазка или соскоба из горла важно сохранять микрофлору слизистой оболочки. Для этого на сутки следует отказаться от чистки зубов, орошения горла антисептическими растворами, ингаляций. Кислая, острая и соленая пища, алкогольные напитки и сладкие газированные напитки исключены.
Важно за несколько дней до обследования исключить употребление медикаментов, особенно подавляющих рост бактерий. Антибиотики способны давать ложноотрицательные результаты, хотя инфекция в крови сохраняется и разносится ко всем органам и требует комплексного лечения.
Расшифровка
Все 3 анализа сдают отдельно, полученные данные записывают в расшифровки. Иммуноглобулины оценивают по количественному и качественному составу:
- IgA – появление этих антител в количестве более 25 единиц указывает на наличие острой стадии заболевания.
- IgM – предположить о наличии заболевания можно при наличии более 18 единиц.
- IgG – вырабатывается иммунитет к заболеванию, положительный результат фиксируется при превышении нормы в 18 единиц на 1 мл крови.
Все три показателя стоят в колонках, где указывается их наличие или отсутствие «+» или «-». Там, где результат положительный, указывается количественное значение. По уровню содержания антител можно судить о давности заболевания, его особенностях течения, делать прогнозы.
Бактериологическое исследование мазка или соскоба из горла показывает наличие или отсутствие коклюшных палочек, а также их количественный состав.
Бактериологическое исследование мазка из горлаПо результатам исследований можно не только выявить наличие возбудителя в крови, но и понять причину. Либо коклюш развивается из-за недавней иммунизации, либо является следствием инфицирования организма возбудителем.
Количественные данные в расшифровке могут отличаться между собой, поэтому каждая лаборатория указывает педельнодопустимые значения. С данной выпиской лучше обратиться к доктору, который сможет сопоставить все результаты комплексной диагностики и сделать заключение, по результатам которого будет назначено лечение.
В том случае, когда исследуется ребенок, родители должны проинформировать лечащего врача и лаборанта о том, как давно была произведена иммунизация от коклюша, и как ребенок перенес прививку. Эти данные помогут исключить вероятность инфицирования через вакцину.
При наличии подозрений на получение недостоверных результатов, исследование производят через 3-4 дня повторно. Важна подготовка, без которой риски получения ложных данных максимальна. Особенно внимание обращают на употребляемые лекарства, о чем сообщают лаборанту и доктору.
